抗OX40抗体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了抗OX40全人抗体。具体地，通过酵母展示技术筛选得到特异性结合OX40的全人抗体，并通过亲和力成熟改善了抗体的亲和力。本发明专利技术还提供了所述抗体用于预防或治疗肿瘤的用途。瘤的用途。

【技术实现步骤摘要】
抗OX40抗体及其应用
[0001]本申请是申请日为2015年10月15日、申请号为CN2015800837165、专利技术名称为“抗 OX40抗体及其应用”的中国专利申请的分案申请。


[0002]本专利技术涉及医药生物领域，尤其涉及一种抗OX40抗体及其应用。

技术介绍

[0003]T细胞活化需要两种信号协同作用：第一信号由T细胞抗原受体(TCR)识别抗原产生， 经CD3分子将信号转导至细胞内，第一信号决定T细胞在适应性免疫应答中的特异性；第二 信号是由抗原提呈细胞(APC)或者靶细胞表面的共刺激分子与T细胞表面的相应的协同刺 激分子受体相互作用而产生。共刺激信号刺激抗原特异性T细胞增殖，并分化为效应T细胞。 如果缺乏共刺激信号，T细胞则会进入无反应或自身免疫耐受状态，甚至进入程序性死亡。
[0004]OX40(又称TNFRSF4、ACT35、CD134、IMD16或TXGP1L)是TNFR受体超家族成 员，是I型跨膜糖蛋白，OX40主要表达于活化的CD4+T细胞和CD8+T细胞上(Paterson等 (1987)MolImmunol24:1281
–
1290)。其胞外段由3个半胱氨酸富集域和一个C端不完全CRD 组成(DeanneM等(2006)Structure14:1321
‑
1330)。OX40是次级共刺激分子。与CD28不同， OX40不表达于静止的T细胞表面，而在T细胞活化24
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72小时有较高的表达。其配体OX40L (TNFSF4，TXGP1，OX
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40L，gp34或CD252)是II型跨膜糖蛋白，表达于活化的抗原提呈 细胞，如树突状细胞、B细胞等(Godfrey,W.R等(1994)JExpMed180:757
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762)。OX40/OX40L 信号在T细胞的活化、增值以及抑制凋亡过程中发挥着非常重要的作用。研究表明激活型的 OX40抗体能够有效地促进T细胞增殖和活化，并产生较好的抗肿瘤作用(BrendanD.Curti等 (2013)CancerRes73:7189
‑
7198)。
[0005]StefanieN.Linch等人对OX40激活性抗体和其他治疗肿瘤的方法的联和使用做了详细的 整理与描述(StefanieN.Linch等(2015)frontiers in oncology 5:1
‑
14)。已有的报道也显示当放 疗和OX40激活性抗体联用时可以明显延长小鼠的生存期(Gough M J等(2010)J Immunother33(8):798
‑
809；Kjaergaard J等(2005)103(1)：156
‑
164)。
[0006]本领域仍需要能够与OX40高亲和性结合、并且具有OX40激动剂活性的抗OX40抗体。

技术实现思路

[0007]为解决上述技术问题，本专利技术的目的是提供一种良好特异性、较高的亲和性和稳定性的 抗OX40抗体及其应用。
[0008]本专利技术第一方面涉及抗OX40抗体或其抗原结合部分，其包括选自如下一组的CDR区：
[0009]1)其重链可变区CDR1、CDR2、CDR3的序列分别如SEQ ID NO：5
‑
7所示，轻链可变 区
CDR1、CDR2、CDR3的序列分别如SEQ ID NO：14
‑
16所示，或者其重链可变区和轻链 可变区与前述序列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位；b)同一性 大于70％、80％、85％、90％或97％；
[0010]2)其重链可变区CDR1、CDR2、CDR3的序列分别如SEQ ID NO：23
‑
25所示，轻链可 变区CDR1、CDR2、CDR3的序列分别如SEQ ID NO：32
‑
34所示，或者其重链可变区和轻 链可变区与前述序列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位；b)同一 性大于70％、80％、85％、90％或97％；
[0011]3)其重链可变区CDR1、CDR2、CDR3的序列分别如SEQ ID NO：41
‑
43所示，轻链可 变区CDR1、CDR2、CDR3的序列分别如SEQ ID NO：50
‑
52所示，或者其重链可变区和轻 链可变区与前述序列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位；b)同一 性大于70％、80％、85％、90％或97％。
[0012]根据本专利技术第一方面任一项的抗OX40抗体或其抗原结合部分，其还包括选自于如下一 组的重链可变区框架区：
[0013]1)其重链可变区FR1、FR2、FR3、FR4的序列分别如SEQ ID NO：8
‑
11所示；
[0014]2)其重链可变区FR1、FR2、FR3、FR4的序列分别如SEQ ID NO：26
‑
29所示；
[0015]3)其重链可变区FR1、FR2、FR3、FR4的序列分别如SEQ ID NO：44
‑
47所示。
[0016]根据本专利技术第一方面任一项的抗OX40抗体或其抗原结合部分，其还包括选自于如下一 组的轻链可变区框架区：
[0017]1)其轻链可变区FR1、FR2、FR3、FR4的序列分别如SEQ ID NO：17
‑
20所示；
[0018]2)其轻链可变区FR1、FR2、FR3、FR4的序列分别如SEQ ID NO：35
‑
38所示；
[0019]3)其轻链可变区FR1、FR2、FR3、FR4的序列分别如SEQ ID NO：53
‑
56所示。
[0020]根据本专利技术第一方面任一项的抗OX40抗体或其抗原结合部分，包括选自于如下一组的 重链可变区，其序列如SEQ ID NO：4、22和40所示，或者其重链可变区与前述序列相比满 足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位、b)同一性大于70％、80％、85％、90％ 或97％。
[0021]进一步的，包括选自于如下一组的重链可变区，其序列如SEQ ID NO：4、22和40所示， 或者其重链可变区CDR区与前述序列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗 原表位；b)突变氨基酸的个数不超过3个。
[0022]进一步的，包括选自于如下一组的重链可变区，其序列如SEQ ID NO：4、22、40、62、 66、69、72和79所示。
[0023]根据本专利技术第一方面任一项的抗OX40抗体或其抗原结合部分，包括选自于如下一组的 轻链可变区，其序列如SEQ ID NO：13、31和49所示，或者其轻链可变区CDR区与前述序 列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位、b)同一性大于70％、80％、 85％、9本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗OX40抗体或其抗原结合部分，其特征在于：其包括如下一组的CDR区：1)其重链可变区CDR1、CDR2、CDR3的序列分别如SEQ ID NO：41
‑
43所示，轻链可变区CDR1、CDR2、CDR3的序列分别如SEQ ID NO：50
‑
52所示，或者其重链可变区和轻链可变区与前述序列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位；b)同一性大于70％、80％、85％、90％或97％；2)其重链可变区CDR1、CDR2、CDR3的序列分别如SEQ ID NO：23
‑
25所示，轻链可变区CDR1、CDR2、CDR3的序列分别如SEQ ID NO：32
‑
34所示，或者其重链可变区和轻链可变区与前述序列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位；b)同一性大于70％、80％、85％、90％或97％。2.根据权利要求1所述的抗OX40抗体或其抗原结合部分，其特征在于：包括选自于序列如SEQ ID NO：40和22所示的重链可变区，或者其重链可变区与前述序列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位；b)同一性大于70％、80％、85％、90％或97％。3.根据权利要求2所述的抗OX40抗体或其抗原结合部分，其特征在于：包括选自于如下一组的重链可变区，其序列如SEQ ID NO：40和22所示，或者其重链可变区CDR区与前述序列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位；b)突变氨基酸的个数不超过3个。4.根据权利要求3所述的抗OX40抗体或其抗原结合部分，其特征在于：包括选自于如下一组的重链可变区，其序列如SEQ ID NO：22、40、62、66、69、72和79所示。5.根据权利要求1所述的抗OX40抗体或其抗原结合部分，其特征在于：包括选自于序列如SEQ ID NO：31和49所示一组的轻链可变区，或者其轻链可变区与前述序列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位；b)同一性大于70％、80％、85％、90％或97％。6.根据权利要求5所述的抗OX40抗体或其抗原结合部分，其特征在于：包括选自于如下一组的轻链可变区，其序列如SEQ ID NO：31和49所示，或者其轻链可变区CDR区与前述序列相比满足以下二者中至少一个的序列：a)结合相同抗原表位；b)突变氨基酸的个数不超过3个。7.根据权利要求6所述的抗OX40抗体或其抗原结合部分，其特征在于：包括选自于如下一组的轻链可变区，其序列如SEQ ID NO：31、49和74所示。8.根据权利要求1所述的抗OX40抗体或其抗原结合部分，其特征在于：其为全抗体、双特异性抗体、scFv、Fab、Fab'、F(ab')2或Fv。9.根据权利要求8所述的抗OX40抗体或其抗原结合部分，其特征在于：当其为scFv时，其重链和轻链可变区之间可含有连接肽。10.根据权利要求1所述的抗OX40抗体或其抗原结合部分，其特征在于：其重链恒定区选自IgG、IgM、IgE、IgD和IgA。11.根据权利要求1所述的抗OX40抗体或其抗原结合部分，其特征在于：其轻链恒定区为κ或λ。12.一种核酸分子，其特征在于：其包含能够编码抗体重链可变区的核酸序列，所述重链可变区包含选自如下一组的氨基酸序列：(1)SEQ ID NO：41
‑
43；...

【专利技术属性】
技术研发人员：俆霆，栾彦，汪皛皛，彭建建，马树立，马慧，潘晓龙，傅士龙，宁姗姗，费烨琼，赵猛，
申请(专利权)人：苏州丁孚靶点生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：