新型富亮氨酸重复神经元蛋白1(LRRN1)抗体和其用途制造技术

本发明专利技术提供了单克隆抗体或其抗原结合部分，所述单克隆抗体或其抗原结合部分与胎‑胚胎去分化抗原，如在分化成胚状体之前在人胚胎干细胞的表面上大量表达的表面糖蛋白富亮氨酸重复神经元蛋白1(LRRN1)结合。本文还公开了新型LRRN1抗体的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新型富亮氨酸重复神经元蛋白1(LRRN1)抗体和其用途相关申请的交叉引用本申请要求于2018年5月16日提交的美国专利申请第62/672,363号的权益，所述美国专利申请的公开内容通过全文引用的方式并入本文。
本专利技术涉及针对富亮氨酸重复神经元蛋白1(LRRN1)的抗体，包含对LRRN1具有特异性的特异性部分或变体，以及编码此类抗体的核酸，以及其使用方法，包含包括抗体的治疗调配物和药物组合物。进一步地，提供了施用本专利技术的抗体的方法，向受试者施用本专利技术的抗体有效抑制癌细胞或干细胞。
技术介绍
对包含人胚胎干细胞(hESC)和癌症干细胞在内的干细胞的研究表明，干细胞表面标志物对于监测分化状态或理解干细胞的功能属性至关重要。使用糖蛋白质组学，发现富亮氨酸重复神经元蛋白1(LRRN1)是人胚胎干细胞(ESC)的新型表面标志物，所述新型表面标志物在分化成胚状体(EB)时消失。LRRN1还可以在许多恶性肿瘤细胞中表达，包含卵巢癌、肝癌、胰腺癌、肺癌、结直肠癌和乳腺癌，参见https://www.proteinatlas.org/ENSG00000175928-LRRN1/pathology。由于对有效治疗和/或预防癌症的需求仍未得到满足，故这些发现为针对如LRRN1等干细胞表面糖蛋白的抗体的研发提供了基本原理。本专利技术提供了针对干细胞表面糖蛋白的抗体，以满足这些和其它需求。
技术实现思路
本专利技术公开了一种抗体或其抗原结合部分，所述抗体或其抗原结合部分包括：(a)重链可变结构域，所述重链可变结构域的氨基酸序列与SEQIDNO:1的氨基酸序列约90％到100％相同；以及(b)轻链可变结构域，所述轻链可变结构域的氨基酸序列与SEQIDNO:2的氨基酸序列约90到100％相同。本专利技术还公开了一种抗体或其抗原结合部分，所述抗体或其抗原结合部分包括：(a)第一重链互补决定区(HCDR1)，所述HCDR1的氨基酸序列与SEQIDNO:3、SEQIDNO:9或SEQIDNO:15约90％到100％相同；(b)第二重链互补决定区(HCDR2)，所述HCDR2的氨基酸序列与SEQIDNO:4、SEQIDNO:10或SEQIDNO:16约90％到100％相同；(c)第三重链互补决定区(HCDR3)，所述HCDR3的氨基酸序列与SEQIDNO:5、SEQIDNO:11或SEQIDNO:17约90％到100％相同；(d)第一轻链互补决定区(LCDR1)，所述LCDR1的氨基酸序列与SEQIDNO:6、SEQIDNO:12或SEQIDNO:18约90％到100％相同；(e)第二轻链互补决定区(LCDR2)，所述LCDR2的氨基酸序列与SEQIDNO:7、SEQIDNO:13或SEQIDNO:19约90％到100％相同；以及(f)第三轻链互补决定区(LCDR3)，所述LCDR3的氨基酸序列与SEQIDNO:8、SEQIDNO:14或SEQIDNO:20约90％到100％相同。还提供了缀合物，所述缀合物包括本文所描述的抗体或其抗原结合部分，所述抗体或其抗原结合部分可操作地附着到治疗剂或诊断剂。还提供了用于通过向有需要的受试者施用本文所描述的抗体或其抗原结合部分来抑制癌细胞的方法。本专利中使用的术语“专利技术(invention)”、“本专利技术(theinvention)”、“本专利技术(thisinvention)”和“本专利技术(thepresentinvention)”旨在广义地指代本专利的主题和下面的专利权利要求全部。含有这些术语的陈述应被理解为不限制本文所述的主题或不限制下面的专利权利要求的含义或范围。本专利所覆盖的本专利技术的实施例由下面的权利要求而非本概述来限定。本概述是本专利技术的各个方面的高级概括并且介绍了在下面的具体实施方式部分中进一步描述的概念中的一些概念。本概述不旨在标识所要求保护的主题的关键或必要特征，也不旨在单独使用以确定所要求保护的主题的范围。应当通过参考整个说明书的适当部分、任何或所有附图和每个权利要求来理解本主题。附图说明本专利含有至少一张彩色附图。在请求并支付必要的费用后，官方将会提供带有彩色附图的本专利的副本。下面参考附图对本专利技术的说明性实施例进行详细描述。图1是示出了通过AKT介导的LRRN1对干性维持和中内胚层分化的作用的图形摘要。图2A和图2B是展示了Alexa488标记的LRRN1单克隆抗体在乳腺癌细胞中的内化的荧光显微镜术图像。图3是展示了LRRN1E36单克隆抗体在有或没有PBMC温育的情况下相比于对照组以及有或没有PBMC温育的IgG的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)的条形图。具体实施方式如本文所使用的，冠词“一个/一种(a/an)”是指冠词的一个或多于一个(即，至少一个)语法对象。术语“受试者”可以指怀疑患有癌症的脊椎动物。受试者包含温血动物，如哺乳动物，如灵长类动物，并且更优选地，人。非人灵长类动物也是受试者。术语受试者包含如猫、狗等家养动物、家畜(例如，牛、马、猪、绵羊、山羊等)和实验动物(例如，小鼠、兔、大鼠、沙鼠、豚鼠等)。如本文所使用的“有效量”是指足以减轻癌症的症状和体征，如体重减轻、疼痛和可触知的肿块的抗体或缀合物的剂量，所述可触知的肿块是在临床上作为可触知的肿块或在放射学上通过各种成像手段可检测的。术语“有效量”和“治疗有效量”可互换使用。本文中的所有数字均可以被理解为由“约”修饰。如本文所使用的，术语“约”意指涵盖±10％的变化。抗体如本文所使用的术语“抗体”是指免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性部分，即，含有免疫特异性地结合糖蛋白的抗原结合部分的分子。这样，术语抗体不仅涵盖完整的抗体分子，而且还涵盖抗体片段以及抗体和抗体片段的变体(包含衍生物)。在天然抗体中，两条重链通过二硫键相互连接，并且每条重链通过二硫键与轻链连接。有两种类型的轻链，λ(l)和κ(k)。有五个主要的重链类别(或同种型)决定抗体分子的功能活性：IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。每条链含有不同的序列结构域。轻链包含两个结构域，可变结构域(VL)和恒定结构域(CL)。重链包含四个结构域，可变结构域(VH)和三个恒定结构域(CH1、CH2和CH3，统称为CH)。轻链(VL)和重链(VH)两者的可变区决定了对干细胞表面糖蛋白的结合识别和特异性。抗体的轻链和重链各自具有三个互补决定区(CDR)，分别指定为LCDR1、LCDR2、LCDR3和HCDR1、HCDR2、HCDR3。因此，抗原结合位点包含六个CDR，包括来自重链可变区和轻链可变区中的每个可变区的CDR组。框架区(FR)是指插入在CDR之间的氨基酸序列。关于本专利技术的指定氨基酸序列的一致性或同源性在本文中被定义为，在比对序列并在必要时引入缺口以实现最大同源性或一致性百分比之后并且在不将任何保守取代视为序列同源性或一致性的一部分的情况下，候选序列中的与指定残基相同的氨基酸残基的百分比。指定序列的N端、C端或内部延伸、缺失或插本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗体或其抗原结合部分，其包括：/n(a)重链可变结构域，所述重链可变结构域的氨基酸序列与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有约90％到100％一致性；以及/n(b)轻链可变结构域，所述轻链可变结构域的氨基酸序列与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有约90到100％一致性。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180516 US 62/672,3631.一种抗体或其抗原结合部分，其包括：
(a)重链可变结构域，所述重链可变结构域的氨基酸序列与SEQIDNO:1的氨基酸序列具有约90％到100％一致性；以及
(b)轻链可变结构域，所述轻链可变结构域的氨基酸序列与SEQIDNO:2的氨基酸序列具有约90到100％一致性。


2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合部分，其中所述重链可变结构域是SEQIDNO:1并且所述轻链可变结构域是SEQIDNO:2。


3.一种抗体或其抗原结合部分，其包括：
第一重链互补决定区(HCDR1)，所述HCDR1的氨基酸序列与SEQIDNO:3、SEQIDNO:9或SEQIDNO:15具有约90％到100％一致性，
第二重链互补决定区(HCDR2)，所述HCDR2的氨基酸序列与SEQIDNO:4、SEQIDNO:10或SEQIDNO:16具有约90％到100％一致性，
第三重链互补决定区(HCDR3)，所述HCDR3的氨基酸序列与SEQIDNO:5、SEQIDNO:11或SEQIDNO:17具有约90％到100％一致性，
第一轻链互补决定区(LCDR1)，所述LCDR1的氨基酸序列与SEQIDNO:6、SEQIDNO:12或SEQIDNO:18具有约90％到100％一致性，
第二轻链互补决定区(LCDR2)，所述LCDR2的氨基酸序列与SEQIDNO:7、SEQIDNO:13或SEQIDNO:19具有约90％到100％一致性，以及
第三轻链互补决定区(LCDR3)，所述LCDR3的氨基酸序列与SEQIDNO:8、SEQIDNO:14或SEQIDNO:20具有约90％到100％一致性。


4.根据权利要求3所述的抗体或其抗原结合部分，其中，
所述HCDR1是SEQIDNO:3，
所述HCDR2是SEQIDNO:4，
所述HCDR3是SEQIDNO:5，
所述LCDR1是SEQIDN...

【专利技术属性】
技术研发人员：游正博，陈铃津，吴汉忠，
申请(专利权)人：长庚医疗财团法人林口长庚纪念医院，中央研究院，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71