一种测定蛋白溶液中DMSO含量的方法技术

本发明专利技术提供一种测定蛋白溶液中DMSO含量的方法，包括如下步骤：S1、取DMSO对照品适量，以乙醇为稀释剂，配制适当浓度的DMSO对照品溶液，作为对照品溶液；S2、取蛋白溶液，以乙醇为溶剂，配制供试品溶液；S3、配制系列DMSO对照品溶液，经GC‑MS法检测，分别获得对照品溶液中DMSO的峰面积，并与溶液浓度进行标准曲线拟合；S4、取供试品溶液经GC‑MS法检测，获得供试品溶液的峰面积，用外标法计算供试品溶液中DMSO的含量。本发明专利技术可实现准确定量，还具有具有检测时间短、准确度好、精密度高、专属性好、重复性好等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种测定蛋白溶液中DMSO含量的方法
本专利技术属于检测
，具体涉及一种测定蛋白溶液中DMSO含量的方法。
技术介绍
二甲基亚砜(DMSO)是一种氢键破坏剂，因其具有抗冻作用，可用于细胞的冻存，DMSO也是一种渗透性保护剂，能够降低细胞冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。但是传统气相色谱法测定对于蛋白溶液中DMSO残留量测定来说，灵敏度远远不能满足要求，且分析时间过长。因此，急需一种测定蛋白溶液中DMSO含量的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术的不足，提供一种测定蛋白溶液中DMSO含量的方法。本专利技术提供了如下的技术方案：一种测定蛋白溶液中DMSO含量的方法，包括如下步骤：S1、取DMSO对照品适量，以乙醇为稀释剂，配制适当浓度的DMSO对照品溶液，作为对照品溶液；S2、取蛋白溶液，以乙醇为溶剂，配制供试品溶液；S3、配制系列DMSO对照品溶液，经GC-MS法检测，分别获得对照品溶液中DMSO的峰面积，并与溶液浓度进行标准曲线拟合；S4、.取供试品溶液经GC-MS法检测，获得供试品溶液的峰面积，用外标法计算供试品溶液中DMSO的含量；其中步骤S3和步骤S4中GC-MS法的色谱条件为：采用色谱柱为AgilentDB-624UI，规格为30m×0.32mm，ID1.8μm；进样口温度为200-250℃；进样体积为0.8-1.5μL，进样模式为分流，分流比为20：1；淬灭气为氦气，碰撞气为氮气；检测器为质谱检测器；电子能量为70eV；离子源温度为250℃；四级杆温度为150℃；传输线温度为280℃；SIM模式为定量离子：DMSO：63/78；溶剂延迟3.0min。优选的，色谱条件中柱温初始柱温50℃，保持3.0min，以25℃/min的速率升温至230℃，维持0min；流速为1.5mL/min。优选的，色谱条件中进样口温度为220℃，进样体积为1μL。本专利技术的有益效果是：本专利技术提供一种测定蛋白中DMSO的残留量测定方法，可以实现精确至0.05ppm的准确定量，具有检测时间短、准确度好、精密度高、专属性好、重复性好等优点。附图说明附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制。在附图中：图1是本专利技术专属性结果对比图。具体实施方式一种测定蛋白溶液中DMSO含量的方法，包括如下步骤：S1、取DMSO对照品适量，以乙醇为稀释剂，配制适当浓度的DMSO对照品溶液，作为对照品溶液；S2、取蛋白溶液，以乙醇为溶剂，配制供试品溶液；S3、配制系列DMSO对照品溶液，经GC-MS法检测，分别获得对照品溶液中DMSO的峰面积，并与溶液浓度进行标准曲线拟合；S4、.取供试品溶液经GC-MS法检测，获得供试品溶液的峰面积，用外标法计算供试品溶液中DMSO的含量；其中步骤S3和步骤S4中GC-MS法的色谱条件为：采用色谱柱为AgilentDB-624UI，规格为30m×0.32mm，ID1.8μm；柱温初始柱温50℃，保持3.0min，以25℃/min的速率升温至230℃，维持0min；流速为1.5mL/min；进样口温度为220℃；进样体积为1μL，进样模式为分流，分流比为20：1；淬灭气为氦气，碰撞气为氮气；检测器为质谱检测器；电子能量为70eV；离子源温度为250℃；四级杆温度为150℃；传输线温度为280℃；SIM模式为定量离子：DMSO：63/78；溶剂延迟3.0min。定量限溶液中，检测离子对测定的SIM色谱峰的信噪比均应大于10:1，系统适用性中空白溶液不干扰目标杂质出峰，此外，系统适用性溶液的针对照品溶液峰面积RSD≤10％，保留时间RSD≤2.0％，对照品溶液回收率应在80％～120％之间。按照步骤S3和步骤S4中的GC-MS法的色谱条件，测定专属性结果，具体的专属性结果如图1所示，从图1可以看出，空白溶液和供试品溶液无干扰，供试品加标溶液(指的是供试品溶液+对照品溶液)具有明显响应。在供试品溶液中加入适量对照品溶液，作准确度实验，准确度结果如表1所示。其中回收率计算公式为：表1准确度结果从上表可以看出，本方法具有良好的准确度。以上所述仅为本专利技术的优选实施例而已，并不用于限制本专利技术，尽管参照前述实施例对本专利技术进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定蛋白溶液中DMSO含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS1、取DMSO对照品适量，以乙醇为稀释剂，配制适当浓度的DMSO对照品溶液，作为对照品溶液；/nS2、取蛋白溶液，以乙醇为溶剂，配制供试品溶液；/nS3、配制系列DMSO对照品溶液，经GC-MS法检测，分别获得对照品溶液中DMSO的峰面积，并与溶液浓度进行标准曲线拟合；/nS4、.取供试品溶液经GC-MS法检测，获得供试品溶液的峰面积，用外标法计算供试品溶液中DMSO的含量；/n其中步骤S3和步骤S4中GC-MS法的色谱条件为：采用色谱柱为Agilent DB-624UI，规格为30m×0.32mm，ID 1.8μm；进样口温度为200-250℃；进样体积为0.8-1.5μL，进样模式为分流，分流比为20：1；淬灭气为氦气，碰撞气为氮气；检测器为质谱检测器；电子能量为70eV；离子源温度为250℃；四级杆温度为150℃；传输线温度为280℃；SIM模式为定量离子：DMSO：63/78；溶剂延迟3.0min。/n

【技术特征摘要】
1.一种测定蛋白溶液中DMSO含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、取DMSO对照品适量，以乙醇为稀释剂，配制适当浓度的DMSO对照品溶液，作为对照品溶液；
S2、取蛋白溶液，以乙醇为溶剂，配制供试品溶液；
S3、配制系列DMSO对照品溶液，经GC-MS法检测，分别获得对照品溶液中DMSO的峰面积，并与溶液浓度进行标准曲线拟合；
S4、.取供试品溶液经GC-MS法检测，获得供试品溶液的峰面积，用外标法计算供试品溶液中DMSO的含量；
其中步骤S3和步骤S4中GC-MS法的色谱条件为：采用色谱柱为AgilentDB-624UI，规格为30m×0.32mm，ID1.8μm；进样口温度为200-250...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱子丰，顾凯，卢彦，
申请(专利权)人：上海明捷医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31