【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于组分残留检测领域，涉及一种抗生素类药物中泡敌残留的检测方法。
技术介绍
1、泡敌，又称聚氧乙烯聚氧丙烯季戊四醇醚，是一种聚醚类消泡剂，广泛应用于抗生素、酶制剂以及食品等发酵工艺中，具有抑泡时间长、效果好、消泡速度快、热稳定性好、与酸、碱不发生化学反应等特点。聚氧乙烯聚氧丙烯季戊四醇醚用于抗生素的发酵生产时，毒性非常低，ld5012.6g/kg(小鼠，经口)。由于药品是特殊的商品，其安全性直接关系到人们的健康和生命，因此泡敌作为药物的有关物质，对其进行严格控制，其含量不得大于0.1％。但是目前报道的方法，检测灵敏度达不到要求，因此急需开发一种能够解决目前药物中消泡剂聚氧乙烯聚氧丙烯季戊四醇醚残留的检测方法。
2、目前对聚醚类消泡剂残留检测的方法报道极少，由于泡敌没有质谱响应，缺少高灵敏度的检测方法。发酵类产品需要泡敌做消泡剂，并且需要控制泡敌在产品中残留量，一般标准控制水平需要控制在0.1％。但是目前，没有公开报道的技术手段可以实现高灵敏度检测来辅助控制泡敌在产品中残留量达到一般标准的水平--小于0.1％。检测聚醚类消泡剂残留，尤其是检测发酵类产品中的泡敌残留量的文献报道的方法多为nmr法和hplc-elsd法，但是多存在各种细节上的不足而不能达到精准高灵敏检测来辅助控制残留量的目的，本专利技术计划用hplc-cad的方法检测抗生素中泡敌的残留，此技术采取常用的高效液相色谱仪结合电喷雾检测器(cad)技术的手段，对抗生素类药品中的泡敌残留进行准确定量，电喷雾检测器(cad)的操作难道门槛比较低，可以大大方
技术实现思路
1、针对现有技术的缺点，本专利技术提供一种高效液相色谱仪结合电喷雾检测器的方法，对发酵工艺中残留的消泡剂进行直接测定，操作简单，方便。
2、为实现上述目的，本专利技术采取以下技术方案：一种抗生素类药物中泡敌残留的检测方法，包括如下步骤：
3、获取泡敌对照品，所述对照品为市售、或者自制的既定含量的对照品，其纯度范围为80-100％之间；
4、采用高效液相色谱-电雾式检测器联用技术，即hplc-cad检测所述对照品，得到对照品中泡敌峰的峰面积astd；
5、获取待测品，所述待测品为自制或市售的任一抗生素类原料药；
6、采用高效液相色谱-电雾式检测器联用技术，即hplc-cad检测所述待测品，得到所述待测品中供试品中泡敌峰的峰面积aspl；
7、比对所述对照品和所述待测品的检测结果，获得所述待测品中泡敌的含量；
8、根据以下公式获得泡敌的含量：
9、
10、式中：
11、aspl ：待测品中泡敌峰的峰面积；
12、astd ：待测品中泡敌峰的峰面积；
13、wstd ：对照品中泡敌称样量/mg；
14、vstd ：对照品的稀释体积/ml；
15、vspl ：待测品溶液的稀释体积/ml；
16、wspl ：待测品的称样量/mg；
17、p ：对照品的含量。
18、优选的，所述对照品的浓度为24μg/ml～220μg/ml。
19、优选的，检测时，流动相a为水相、流动相b为有机相；所述流动相b为甲酸、异丙醇组成的混合液；所述流动相a为甲酸、水的混合溶液，其中，甲酸的质量比为2％。
20、优选的，所述流动相a和流动相b中，水相和有机相的体积比为90：10；2.5min后其体积比例为80：20；2.6min后其体积比例为0：100，在该体积比例保持2.4min；5.1min后，水相和有机相的体积比回到起始比例90：10。
21、优选的，检测时，流动相的流速0.5ml/min～1.5ml/min，色谱柱为混合型阴离子交换反相色谱柱，温度为20℃-40℃。
22、更进一步，检测时，流动相的流速1.0ml/min，色谱柱为waters oasis max(20mm×2.1mm,30μm)，温度为30℃。
23、优选的，cad的检测条件为：频率5-20mhz，滤波1-5s。
24、更进一步的，cad的检测条件为：频率10mhz，滤波1s。
25、本专利技术的有益效果：
26、通过采用高效液相色谱-电雾式检测器(hplc-cad)联用技术，使泡敌首先经高效液相色谱进行分离，然后分离后的洗脱液进入电雾式检测器(cad)中进行检测，根据cad检测结果即可实现对药物中的残留的泡敌进行定量。该方法能够有效地避免泡敌没有紫外吸收而无法检测的问题，且该方法检测限低，lod为2μg/ml，灵敏度高，能够准确地检测出药物中残留的微量泡敌的含量。
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1.一种抗生素类药物中泡敌残留的检测方法，其特征在于，包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种抗生素类药物中泡敌残留的检测方法，其特征在于，所述对照品的浓度为24μg/mL～220μg/mL。
3.根据权利要求1所述的一种抗生素类药物中泡敌残留的检测方法，其特征在于，检测所述对照品时，流动相A为水相、流动相B为有机相；所述流动相B为甲酸、异丙醇组成的混合液；所述流动相A为甲酸、水的混合溶液，其中，甲酸在流动相A/B中的质量比皆为2％。
4.根据权利要求3所述的一种抗生素类药物中泡敌残留的检测方法，其特征在于，所述流动相A和流动相B中，水相和有机相的体积比为90：10；2.5min后其体积比例为80：20；2.6min后其体积比例为0：100，在该体积比例保持2.4min；5.1min后，水相和有机相的体积比回到起始比例90：10。
5.根据权利要求4所述的一种抗生素类药物中泡敌残留的检测方法，其特征在于，检测时，流动相的流速0.5ml/min～1.5ml/min，色谱柱为混合型阴离子交换反相色谱柱，温度为20℃-40℃。
...【技术特征摘要】
1.一种抗生素类药物中泡敌残留的检测方法，其特征在于，包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种抗生素类药物中泡敌残留的检测方法，其特征在于，所述对照品的浓度为24μg/ml～220μg/ml。
3.根据权利要求1所述的一种抗生素类药物中泡敌残留的检测方法，其特征在于，检测所述对照品时，流动相a为水相、流动相b为有机相；所述流动相b为甲酸、异丙醇组成的混合液；所述流动相a为甲酸、水的混合溶液，其中，甲酸在流动相a/b中的质量比皆为2％。
4.根据权利要求3所述的一种抗生素类药物中泡敌残留的检测方法，其特征在于，所述流动相a和流动相b中，水相和有机相的体积比为90：10；2.5min后其体积比例为80：20；2.6min后其体积比例为0：100，在该体积比例保持2.4min；5.1min后，水相和有机相的...
【专利技术属性】
技术研发人员：周长进，张慧颖，朱子丰，张初航，
申请(专利权)人：上海明捷医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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