本发明专利技术提供了一种PEP‑1‑G4S‑KGF2融合蛋白及其编码基因和应用，属于基因工程技术领域，所述PEP‑1‑G4S‑KGF2融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。采用本发明专利技术提供的PEP‑1‑G4S‑KGF2融合蛋白提高了穿透上皮细胞的细胞膜能力，提高了角质细胞生长因子2达到损伤部位组织的有效浓度。
【技术实现步骤摘要】
一种PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白及其编码基因和应用
本专利技术涉及基因工程
，尤其涉及一种PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白及其编码基因和应用。
技术介绍
角质细胞生长因子2(keratinocytegrowthfactor2,KGF2)是成纤维细胞生长因子家族中具有肝素结合特异性的一员，又称为FGF10，由208个氨基酸残基组成，其N端是由39个疏水残基构成的信号肽序列。KGF2主要由成纤维细胞及其他间充质来源的细胞分泌，通过间充质-上皮相互作用的方式，主要作用于表达于上皮组织的特异性受体FGFR2-Ⅲb，有效促进上皮细胞的增殖、移行、分化。有文献报道，KGF2对于多种损伤如急慢性炎症、溃疡、物理化学烧伤等的修复有重要作用，尤其对放、化疗引起的口腔黏膜炎、静脉溃疡、溃疡性结肠炎等难治性上皮组织损伤作用显著。KGF2还参与和调控四肢、肺支气管、牙齿、胰腺、脑垂体、眼睑和皮肤及下颌腺等器官的形成和发育。但是KGF2渗透到上皮细胞的深层部位的量有限，如何提高KGF2渗透的浓度还没有详细的研究报道。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白及其编码基因和应用，采用本专利技术提供的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白提高了穿透上皮细胞的细胞膜能力，提高了角质细胞生长因子2达到损伤部位组织的有效浓度。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白，所述PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。本专利技术还提供了一种编码上述技术方案所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白的基因，所述基因的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示。本专利技术还提供了上述技术方案所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在制备提高穿透细胞膜能力的药物中的应用。本专利技术还提供了上述技术方案所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在制备修复上皮组织损伤的药物中的应用。本专利技术还提供了上述技术方案所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在制备促进细胞增殖的药物中的应用。优选的，所述细胞包括上皮细胞。本专利技术还提供了上述技术方案所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在制备促进细胞迁移的药物中的应用。优选的，所述细胞包括上皮细胞。本专利技术还提供了上述技术方案所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在制备修复急慢性炎症、溃疡和物理化学烧伤的药物中的应用。本专利技术提供了一种PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白及其编码基因和应用，所述PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。采用本专利技术提供的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白提高了穿透上皮细胞的细胞膜能力，利用穿膜肽PEP具有携带大分子渗透生物膜结构的功能，提高了角质细胞生长因子2达到损伤部位组织的有效浓度。附图说明图1为PEP-1-G4S-KGF2融合序列酶切鉴定图；图2为PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白菌株生长曲线图；图3为PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白表达图；图4为PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白纯化图；图5为PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白促细胞迁移图；图6为融合蛋白穿膜免疫荧光检测结果图，其中PE为带有KGF2抗体染色，蓝色为DAPI染核。具体实施方式本专利技术提供了一种PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白，所述PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，具体如下所示：KETWWETWWTEWSQPKKKKKVGGGGSLGQDMVSPEATNSSSSSFSSPSSAGRHVRSYNHLQGDVRWRKLFSFTKYFLKIEKNGKVSGTKKENCPYSILEITSVEIGVVAVKAINSNYYLAMNKKGKLYGSKEFNNDCKLKERIEENGYNTYASFNWQHNGRQMYVALNGKGAPRRGQKTRRKNTSAHFLPMVVHS。在本专利技术中，所述PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白中的PEP-1氨基酸序列为KETWWETWWTEWSQPKKKKKV(SEQIDNo.12)，具有辅助穿膜作用；所述G4S氨基酸序列为GGGGS，其作用是连接作用；所述KGF2氨基酸的序列为(SEQIDNo.13)LGQDMVSPEATNSSSSSFSSPSSAGRHVRSYNHLQGDVRWRKLFSFTKYFLKIEKNGKVSGTKKENCPYSILEITSVEIGVVAVKAINSNYYLAMNKKGKLYGSKEFNNDCKLKERIEENGYNTYASFNWQHNGRQMYVALNGKGAPRRGQKTRRKNTSAHFLPMVVHS，对上皮组织损伤具有修复作用。本专利技术还提供了一种编码上述技术方案所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白的基因，所述基因的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示，具体如下：在本专利技术中，编码PEP-1氨基酸序列的核苷酸序列如SEQIDNo.3所示，具体如下：aaggagacctggtgggagacctggtggaccgagtggagccagcccaagaagaagaagaaggtg。在本专利技术中，编码G4S氨基酸序列的核苷酸序列如SEQIDNo.4所示，具体如下：ggcggcggcggcagc。在本专利技术中，编码KGF2氨基酸序列的核苷酸序列如SEQIDNo.5所示，具体如下：本专利技术对所述PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白和编码PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白的基因的获取方法没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的方法常规获取得到即可或委托合成即可。本专利技术还提供了上述技术方案所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在制备提高穿透细胞膜能力的药物中的应用。在本专利技术中，所述药物中优选以PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白为唯一活性物质。本专利技术对药物的剂型没有特殊限定，采用PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在医学上可接受的剂型即可。本专利技术还提供了上述技术方案所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在制备修复上皮组织损伤的药物中的应用。在本专利技术中，所述药物中优选以PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白为唯一活性物质。本专利技术对药物的剂型没有特殊限定，采用PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在医学上可接受的剂型即可。本专利技术还提供了上述技术方案所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在制备促进细胞增殖的药物中的应用。在本专利技术中，所述药物中优选以PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白为唯一活性物质。本专利技术对药物的剂型没有特殊限定，采用PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在医学上可接受的剂型即可。在本专利技术中，所述细胞优选包括上皮细胞。本专利技术还提供了上述技术方案所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在制备促进细本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白，其特征在于，所述PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。/n
【技术特征摘要】
1.一种PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白，其特征在于，所述PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示。
2.一种编码权利要求1所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示。
3.权利要求1所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在制备提高穿透细胞膜能力的药物中的应用。
4.权利要求1所述的PEP-1-G4S-KGF2融合蛋白在制备修复上皮组织损伤的药物中的应用。
【专利技术属性】
技术研发人员：甘向东，龙民慧，李飞，张森，
申请(专利权)人：北京致力生科科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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