OGR1的用途制造技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，尤其涉及OGR1的用途。本发明专利技术结合体内和体外多层次实验发现，在高度酸化的肿瘤微环境中，OGR1作用于T细胞并减弱其效应功能，从而促进肿瘤生长。抑制T细胞上OGR1的表达能显著增强CD4

【技术实现步骤摘要】
OGR1的用途
本专利技术涉及医药
，尤其涉及OGR1的用途。
技术介绍
传统的肿瘤治疗手段包括手术、放疗和化疗，在提高患者生存率和生存期限方面取得了重大进展。随着肿瘤分子生物学和免疫学的发展，肿瘤分子靶向治疗和免疫治疗逐渐成为肿瘤治疗的热点。其中肿瘤免疫治疗又称肿瘤生物治疗，是运用生物技术和生物制剂对从病人体内采集的免疫细胞进行体外培养和扩增后回输到病人体内，以激发和增强机体自身免疫功能，从肿瘤的源头加以控制，识别、杀伤肿瘤细胞，并对其进行毁灭性打击，从而成功预防肿瘤的复发和转移，达到治疗肿瘤目的的方法和技术。例如，靶向于B细胞淋巴瘤表面标志CD19的CAR-T细胞对血液系统B细胞淋巴瘤有很好的治疗效果，并于2017年通过美国FDA审批。研究表明，PD1/PD-L1抑制剂显著抑制黑色素转移瘤的发生发展等。虽然这些基于T细胞的抗肿瘤免疫治疗方法取得了可喜进展，但仍有很多局限性，如：CAR-T细胞治疗对实体瘤疗效甚微，PD1/PD-L1广谱性差等。造成这些的很大部分原因在于肿瘤酸性微环境中抑制信号的结果，酸性的微环境会抑制T细胞的增殖和激活，表现为高亲和力的IL-2受体CD25表达受损，影响细胞因子分泌和细胞周期的进展，从而减弱杀伤肿瘤作用。OGR1（ovariancancerGprotein-coupledreceptor1）作为质子感知G蛋白偶联受体（GPCR，Gproteincoupledreceptor）家族的成员之一，可将细胞外酸转化为细胞内信号，并在pH值6.8处被完全激活。T细胞上高表达OGR1，但其在肿瘤微环境中对T细胞功能的影响仍属空白。因此，研究OGR1对T细胞抗肿瘤免疫的潜在作用，筛选有效的小分子抑制剂，将具有向临床治疗转化的积极意义。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供OGR1的用途，研究表明，OGR1功能缺失会促进CD4+、CD8+T细胞在肿瘤灶中的浸润，增强其增殖和迁移能力，调节肿瘤杀伤因子的分泌，具有提高抗肿瘤效果的作用。根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了OGR1的用途，所述用途包括以下任一项：1）在制备增强T细胞肿瘤杀伤能力的药物中的应用；2）在制备增强T细胞抗肿瘤细胞因子分泌水平的药物中的应用；3）在制备增强T细胞增殖能力的药物中的应用；4）在制备增强T细胞迁移能力的药物中的应用；5）在制备T细胞中的应用，所述T细胞具有以下性质：肿瘤杀伤能力强、抗肿瘤细胞因子分泌能力强、增殖能力强、迁移能力强；6）在制备治疗肿瘤的药物中的应用。进一步，所述细胞因子包括INF-γ、TNF、GramB。进一步，所述T细胞为CD4+T细胞或CD8+T细胞。根据本专利技术的另一个方面，本专利技术提供了一种药物，所述药物包括抑制OGR1的物质。进一步，抑制OGR1的物质包括抑制OGR1表达或活性的物质。更进一步，所述物质包括Cre/loxP系统、FLP/FRT系统、Dre/Rox系统、锌指核酸内切酶技术、转录激活因子样效应核酸酶技术、CRISPR/Cas9基因编辑系统、NgAgo-gDNA基因编辑技术或RNA干扰技术中使用的试剂。根据本专利技术的又一个方面，本专利技术提供了一种T细胞，所述T细胞中OGR1表达或活性被抑制。进一步，所述T细胞经过了肿瘤微环境的刺激。根据本专利技术的又一个方面，本专利技术提供了一种体外制备T细胞的方法，所述方法包括：抑制T细胞中OGR1表达或活性；提取T细胞。进一步，所述方法包括：利用Cre/loxP系统、FLP/FRT系统、Dre/Rox系统、锌指核酸内切酶技术、转录激活因子样效应核酸酶技术、CRISPR/Cas9基因编辑系统、NgAgo-gDNA基因编辑技术或RNA干扰技术抑制T细胞中OGR1表达或活性。在本专利技术具体实施例中，抑制T细胞中OGR1表达或活性使用的Cre/loxP系统。需要说明的是，本申请虽然仅仅记载了使用Cre/loxP系统抑制T细胞中OGR1表达或活性，但并不代表其他抑制T细胞中OGR1表达或活性的方法不能用于本专利技术，本专利技术只是以Cre/loxP系统作为抑制OGR1表达或活性的一种方法的例子来说明抑制OGR1表达或活性这一过程可以如何实现。更具体地，所述方法包括：1）抑制受试者的T细胞中OGR1表达或活性；2）肿瘤微环境刺激；3）提取T细胞。优选地，受试者不患有肿瘤；优选地，所述受试者包括除人以外的哺乳动物。进一步，肿瘤微环境刺激7天。进一步，肿瘤微环境可通过植入肿瘤细胞创造，植入肿瘤细胞的方式包括皮下植入、原位移植、尾静脉注射。进一步，提取T细胞的方式可以从血液中提取也可以从脾脏中提取，优选地，从血液中提取。作为可替代的技术方案，所述方法包括：1）抑制患有肿瘤的受试者的T细胞中OGR1表达或活性；2）提取T细胞。优选地，受试者包括哺乳动物。举例来说，哺乳动物可以是以下任何物种：家养宠物，如小鼠、大鼠、沙鼠、兔子、天竺鼠、仓鼠、猫或狗；或家畜，如山羊、绵羊、猪、牛或马。在本专利技术的另外一个优选实施例中，受试者可以是灵长类动物，如猴、长臂猿、大猩猩、猩猩(orang-utang)、黑猩猩或倭黑猩猩(bonobo)。在本专利技术的一个优选实施例中，受试者是人类。进一步，提取T细胞的方式可以从血液中提取也可以从脾脏中提取，优选地，从血液中提取。进一步，本专利技术的制备的T细胞是CD4+T细胞或CD8+T细胞。根据本专利技术的又一个方面，本专利技术提供了根据前面所述的方法制备而成的T细胞。根据本专利技术的又一个方面，本专利技术提供了前面所述的T细胞在制备治疗肿瘤的药物中的应用。本专利技术所述的肿瘤包括先不限于黑色素瘤、膀胱癌、血癌、骨癌、脑癌、乳腺癌、中枢神经系统癌症、宫颈癌、结肠癌、子宫内膜癌、食管癌、胆囊癌、胃肠道癌、外生殖器癌、泌尿生殖道癌、头癌、肾癌、喉癌、肝癌、肺癌、肌肉组织癌症、颈癌、口腔或鼻黏膜癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、皮肤癌、脾癌、小肠癌、大肠癌、胃癌、睾丸癌、甲状腺癌。在本专利技术的具体实施方案中，本专利技术的肿瘤是黑色素瘤。本专利技术的药物还包括药学上可接受的载体。药学上可接受的载体可以是任何常规使用的那些且仅由化学-物理的考虑(例如溶解度和与活性试剂的反应性的缺失)和给药方式限制。在此描述的所述药学上可接受的载体，例如，载体，佐剂，赋形剂和稀释剂对那些本领域技术人员公知的并且公众容易获得。优选所述药学上可接受的载体为对活性试剂为化学惰性的载体和在使用条件下无有害副作用或毒性的载体。载体的选择将部分由具体的本专利技术的药物以及由用于施用本专利技术的药物的具体方法决定。因此，存在多种合适的本专利技术的药物的制剂。合适的制剂可以包括用于肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、动脉内、鞘内、瘤内或腹膜内施用的那些制剂中的任何制剂。可以使用多于一种途径来施用本专利技术的药物，并且在某些情况下，特定途径可以比另一途径提供本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.OGR1的应用，所述用途包括以下任一项：/n1）在制备增强黑色素瘤环境刺激条件下T细胞肿瘤杀伤能力的药物中的应用；/n2）在制备增强黑色素瘤环境刺激条件下T细胞抗肿瘤细胞因子分泌水平的药物中的应用；/n3）在制备增强黑色素瘤环境刺激条件下T细胞增殖能力的药物中的应用；/n4）在制备增强黑色素瘤环境刺激条件下T细胞迁移能力的药物中的应用；/n5）在制备黑色素瘤环境刺激条件下的T细胞中的应用，所述T细胞具有以下性质：肿瘤杀伤能力强、抗肿瘤细胞因子分泌能力强、增殖能力强、迁移能力强；/n6）在制备治疗黑色素瘤的药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.OGR1的应用，所述用途包括以下任一项：
1）在制备增强黑色素瘤环境刺激条件下T细胞肿瘤杀伤能力的药物中的应用；
2）在制备增强黑色素瘤环境刺激条件下T细胞抗肿瘤细胞因子分泌水平的药物中的应用；
3）在制备增强黑色素瘤环境刺激条件下T细胞增殖能力的药物中的应用；
4）在制备增强黑色素瘤环境刺激条件下T细胞迁移能力的药物中的应用；
5）在制备黑色素瘤环境刺激条件下的T细胞中的应用，所述T细胞具有以下性质：肿瘤杀伤能力强、抗肿瘤细胞因子分泌能力强、增殖能力强、迁移能力强；
6）在制备治疗黑色素瘤的药物中的应用。


2.一种体外制备T细胞的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：高苒，秦川，张文龙，杨星九，李梦媛，曹琳，李维莎，
申请(专利权)人：中国医学科学院医学实验动物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11