一种用于抗手足口病毒的牛奶制剂制造技术

本发明专利技术公开了一种用于抗手足口病毒的牛奶制剂，属于生物技术领域。该牛奶制剂的制备方法为：利用一种或多种肠道病毒抗原混合物对奶牛进行接种免疫，接种抗原后的奶牛分泌的牛乳即为用于抗手足口病毒的牛奶制剂，所述肠道病毒为EV71、CA16、CA10、CA4、CA5、CA9、CB2、CB5、埃可病毒中的一种或多种。与当前上市的EV71灭活疫苗、普通牛乳相比，本发明专利技术制备的牛奶制剂同时兼具两者的特性，既可作为预防性制剂防止婴幼儿感染手足口病，也可作为手足口病患者恢复期的保健用品，此外本发明专利技术制备的牛奶制剂与上市的EV71疫苗相比，具有广谱性和安全性的特点。点。点。

【技术实现步骤摘要】
一种用于抗手足口病毒的牛奶制剂


[0001]本专利技术属于生物
，尤其涉及一种用于抗手足口病毒的牛奶制剂。

技术介绍

[0002]手足口病(HFMD)是一种由肠道病毒引起的婴幼儿(5岁以下)传染性疾病，主要表现为发热，手、足、臀部水疱疹，口腔黏膜溃疡，也有小部分儿童可能出现脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹和神经呼吸综合征等严重并发症，死亡率可高达1.8％，手足口病位居我国丙类转染病之首。从历史上看，手足口病的爆发主要由两种肠道病毒引起：柯萨奇病毒A16(CA16)和肠道病毒71(EV71)。近年来，柯萨奇病毒(CA6)和柯萨奇病毒(CA10)与散发性手足口病病例广泛相关，并且随着神经系统并发症和死亡人数的增加而在世界范围内爆发。其中，中国是受影响最严重的国家之一。
[0003]由于引发手足口病的病原体数量较多，目前，手足口病没有可用的治疗干预或疫苗。虽然EV71灭活疫苗已在多个亚洲国家完成临床试验，并于2016年起在国内使用，但该疫苗只针对EV71单一一种病原体，这种疫苗不能预防其它主要的新兴手足口病病毒，如CA16、CA10和CA6等。因而，随着EV71疫苗覆盖率逐年提高，EV71相关手足口病病例及重症病例明显减少，但不容忽视得是手足口病的总体发病率并未下降，且非EV71导致的手足口病病例随时间增加，例如CA16、CA10和CV
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A6感染病例呈逐年上升趋势。
[0004]针对EV71疫苗临床应用后其它病原体引发手足口病感染率居高不下的现状，许多研发机构正在开发EV71&CA16的二价灭活疫苗，以及EV71&CA16&CA10&CA6的四价重组蛋白疫苗等，以期通过同时对抗手足口病的多种主要病原体，从而快速遏制手足口病的流行。然而，可以预测的是，随着不断出现的手足口病新型病原体被疫苗控制，未来还会有手足口病的新型病原体不断出现，使疫苗研发和疫苗接种工作不堪病原体变化的重负，陷入当前应对新冠病毒变异的被动局面，也带来了人类婴幼儿究竟需要接种多少针疫苗的疑问。
[0005]面对旧病原体不断被疫苗控制、新病原体不断出现、新疫苗不断被研发、人类接种疫苗不断增加的现状，亟需寻找一种解决人类疫苗越接种越多问题的方法。基于上述，结合肠道病毒经口感染的特点，我们首次专利技术一种广谱的多价联合牛乳制剂用以预防和治疗手足口病的发生。
[0006]一般1周岁以下的婴幼儿合成免疫球蛋白的能力较差，主要靠母亲乳汁中的抗体，抵抗外界病原体，维持体液免疫应答。有研究表明大约50％的新生儿在出生后具有显着的抗EV71抗体水平，主要是通过哺乳的方式从母体获取的被动免疫力，但母源保护在6个月后开始显著下降，因此，乳汁可能是预防和治疗手足口病发生的最佳制剂。牛乳是我们常见的营养品，其中含有丰富的免疫球蛋白，IgG含量高达50mg/mL，免疫手足口病毒的奶牛可以产生相应病原体的特异性抗体，当母体不能提供相应病原的抗体或者母体本身不含病原特异性抗体时，可通过摄入这些免疫球蛋白补充添加相应的病原体特异抗体，增强被动免疫力以达到预防或治疗手足口病的目的，不通过药物即能最大程度的保护儿童和婴幼儿免受手足口病的侵害。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的之一在于提供一种用于抗手足口病毒的牛奶制剂，所述牛奶制剂的制备方法为：利用一种或多种肠道病毒抗原混合物对奶牛进行接种免疫，接种抗原后的奶牛分泌的牛乳即为用于抗手足口病毒的牛奶制剂。
[0008]优选地，所述肠道病毒为EV71、CA16、CA10、CA4、CA5、CA9、CB2、CB5、埃可病毒中的一种或多种。
[0009]更优选地，所述肠道病毒抗原混合物为病毒的灭活疫苗、重组蛋白疫苗、mRNA疫苗、病毒结构类似物、减毒疫苗中的一种或多种。
[0010]本专利技术的目的之二在于提供所述用于抗手足口病毒的牛奶制剂在制备抗手足口病毒产品中的应用。
[0011]优选地，所述抗手足口病毒产品为广谱抗手足口病病毒制剂。
[0012]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0013](1)现有的EV71灭活疫苗对于保护EV71感染的保护效力在90％以上，对于其它手足口病病原如CA16和CA10等的预防效果非常有限，且目前仍没有相应的广谱疫苗。本专利技术制备的多价牛乳抗病毒制剂能够在提供婴幼儿所需营养的情况下，对多种手足口病病毒如EV71、CA16及CA10等产生预防兼治疗的良好效果。
[0014](2)EV71灭活疫苗接种无法长期维持体内的特异性抗体水平，且需要反复加强才能达到维持较长时间。即便如此，手足口病也具有较高的复发可能。因此，本专利技术制备的多价牛乳抗病毒制剂可作为日常的营养品，可随时进行保护性抗体的体外补充，达到及时预防和治疗手足口病的目的。
[0015](3)手足口病的易感对象为5岁以下的婴幼儿，这部分易感人群对针剂注射比较排斥，且因免疫系统发育不完全，免疫反应较弱，可能无法达到理想水平。而牛乳作为常见的饮品，因其营养丰富而广受欢迎，因此，牛乳抗病毒制剂更易于被易感人群所接受。
[0016](4)相比于EV71灭活疫苗和普通牛乳，本专利技术制备的多价牛乳抗病毒制剂同时兼具两者的特性，既可作为预防性制剂防止婴幼儿感染手足口病，也可作为手足口病患者恢复期的保健用品。
附图说明
[0017]图1为实施例1中不同时间点牛乳中抗体检测结果，其中A.不同时间点牛乳中不同亚类(IgG/IgA/IgM)抗体含量的测定；B.不同时间点牛乳中针对三种病毒(EV71/CA10/CA16)的特异性结合抗体的测定；C.不同时间点牛乳中针对三种病毒(EV71/CA10/CA16)的中和抗体的测定。
[0018]图2为实施例2中三种肠道病毒分别与免疫牛初乳/对照牛初乳灌胃小鼠后的检测结果。
具体实施方式
[0019]实施例1
[0020](1)利用牛乳中含有保护性抗体的特性，通过将三种手足口病病毒(EV71/CA16/CA10)混合进行灭活处理并免疫怀孕奶牛，诱导其产生含有病毒特异性抗体的牛乳。具体
为：分别对预产期为1个月的怀孕母牛进行初次免疫，于牛颈部皮下注射10mL三价灭活疫苗，对照组注射10mL PBS，并于产前10天左右进行三价灭活疫苗的加强免疫。
[0021](2)于怀孕奶牛产后0天、7天、30天、90天及180天分别收集牛乳，基于ELISA方法对牛乳中IgG/IgA/IgM含量、三种病毒(EV71/CA10/CA16)病毒特异性结合抗体进行检测，基于细胞中和实验对病毒特异性中和抗体进行检测。
[0022]结果如图1所示，牛乳IgG/IgA/IgM三种抗体随时间变化而显著降低，尤其是产后0至30天。其中，初乳中IgG的含量最高，高达100mg/mL，其次是IgA，10mg/mL，且免疫组初乳IgG及IgA抗体水平显著高于对照组。此外，针对EV71/CA16/CA10三种病原的特异性结合抗体均随时间变化而显著降低，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于抗手足口病毒的牛奶制剂，其特征在于，所述牛奶制剂的制备方法为：利用一种或多种肠道病毒抗原混合物对奶牛进行接种免疫，接种抗原后的奶牛分泌的牛乳即为用于抗手足口病毒的牛奶制剂。2.根据权利要求1所述的牛奶制剂，其特征在于，所述肠道病毒为EV71、CA16、CA10、CA4、CA5、CA9、CB2、CB5、埃可病毒中的一种或多种。3.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘江宁，魏孝辉，赵彬彬，武婧，
申请(专利权)人：中国医学科学院医学实验动物研究所，
类型：发明
国别省市：