用于结合IL-17的肽配体制造技术

一种IL‑17特异性的肽配体，其包含多肽和分子支架，所述多肽包含三个选自半胱氨酸、L‑2,3‑二氨基丙酸(Dap)、N‑β‑烷基‑L‑2,3‑二氨基丙酸(N‑AlkDap)和N‑β‑卤代烷基‑L‑2,3‑二氨基丙酸(N‑HAlk Dap)的残基，条件是所述三个残基中的至少一个选自Dap、N‑AlkDap或N‑HAlkDap，所述三个残基被至少两个环序列隔开，肽通过多肽的Dap或N‑AlkDap或N‑HAlkDap残基经共价烷基氨基键以及通过多肽的半胱氨酸残基(当所述三个残基包括半胱氨酸时)经硫醚键与支架连接，从而在分子支架上形成两个多肽环。还提供了药物缀合物，其包含与一个或多个效应基团缀合的肽配体，以及提供了包含缀合物的药物组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于结合IL-17的肽配体
本专利技术涉及作为IL-17的高亲和力结合剂的肽配体。本专利技术还包括包含与一个或多个效应物和/或官能团缀合的所述肽的药物缀合物，包含所述肽配体和药物缀合物的药物组合物，以及所述肽配体和药物缀合物在预防、抑制或治疗IL-17介导的疾病或病症中的用途。具体地，本专利技术涉及这种类型的肽配体，其具有用于在肽和支架分子之间形成两个或更多个键的新型化学结构。
技术介绍
不同的研究团队先前曾通过在肽的半胱氨酸残基与支架分子的合适官能团之间形成两个或多个硫醚键，将肽束缚在支架部分上。例如，在WO2004/077062和WO2006/078161中公开了通过将含半胱氨酸的肽连接至分子支架例如三(溴甲基)苯来产生候选药物化合物的方法。利用半胱氨酸硫醇产生共价硫醚键以实现环化的优点在于它们的选择性和双正交反应性。含硫醇的线性肽可与硫醇反应性支架化合物例如1,3,5三溴甲基苯(TBMB)环化以形成双环肽，所得产物在苄基位置上包含三个硫醚。线性肽与TBMB形成具有硫醚键的环状双环肽的整体反应示于图1中。需要一种将肽偶联到支架部分以形成环状肽结构的替代化学方式，其采用硫醚部分的合适替代物，从而实现与不同肽的相容性、物化性质的改变(如改善的溶解度)、生物分布的改变和其他优点。WO2011/018227描述了用于改变第一肽配体或第一组肽配体(其中每个肽配体包含至少两个由环序列隔开的与分子支架共价连接的反应基团，所述分子支架与所述反应基团形成共价键)的构象以产生第二肽配体或第二组肽配体的方法，所述方法包括从所述第一衍生物或第一组衍生物的肽和支架组装所述第二衍生物或第二组衍生物，加上以下步骤之一：(a)改变至少一个反应基团；或(b)改变分子支架的性质；或(c)改变至少一个反应基团与分子支架之间的键；或(a)、(b)或(c)的任意组合。我们早先于2017年12月20日提交的未决申请PCT/EP2017/083953和PCT/EP2017/083954描述了双环肽，其中与支架分子连接的一个或多个硫醚键已被烷基氨基键取代。白介素17(IL-17)，也称为IL-17A和CTLA-8，是一种刺激多种细胞类型中多种其他细胞因子分泌的促炎细胞因子。例如，IL-17可诱导IL-6、IL-8、G-CSF、TNF-a、IL-1β、PGE2和IFN-γ以及许多趋化因子和其他效应物(参见Gaffen，SL(2004)ArthritisResearch&Therapy6，240-247)。IL-17由TH17细胞表达，所述TH17细胞参与炎症病理和自身免疫。其也由CD8+T细胞、γδ细胞、NK细胞、NKT细胞、巨噬细胞和树突状细胞表达。IL-17和Thl7与多种自身免疫和炎性疾病的发病机制相关联，但对于宿主抵抗许多微生物(尤其是细胞外细菌和真菌)的防御至关重要。人IL-17A是Mw为17,000道尔顿的糖蛋白(Spriggs等人(1997)JClinImmunol，17，366-369)。IL-17可以形成同型二聚体或与其家族成员IL-17F形成异型二聚体。IL-17与IL-17RA和IL-17RC结合以介导信号传导。IL-17通过其受体进行信号传导，激活NF-KB转录因子以及各种MAPK(参见Gaffen，SL(2009)NatureRevImmunol9，556-567)。IL-17可与其他炎性细胞因子(例如TNF-α、IFN-γ和IL-Ιβ)共同作用以介导促炎作用(参见Gaffen，SL(2004)ArthritisResearch&Therapy6，240-247)。IL-17水平升高与许多疾病有关，包括类风湿性关节炎(RA)、骨侵蚀、腹膜内脓肿、炎症性肠病、同种异体移植排斥、银屑病、血管生成、动脉粥样硬化、哮喘和多发性硬化症(参见Gaffen，SL(2004)同上和US2008/0269467)。在系统性红斑狼疮(SLE)患者中发现较高血清浓度的IL-17，近来确定其可以单独作用或与B细胞活化因子(BAFF)协同作用来控制B细胞存活、增殖以及分化成产生免疫球蛋白的细胞(Doreau等(2009)NatureImmunology7，778-7859)。IL-17还与眼表疾病如干眼症有关(WO2010/062858和WO2011/163452)。IL-17还牵涉到在强直性脊柱炎(Appel等人(2011)ArthritisResearchandTherapy，13，R95)和银屑病性关节炎(Mclnnes等人(2011)Arthritis&Rheumatism63(10),779)中发挥作用。IL-17和产生IL-17的TH17细胞最近还牵涉到某些癌症(Ji和Zhang(2010)CancerImmunolImmunother59，979-987)。例如，已显示表达IL-17的TH17细胞与多发性骨髓瘤有关(Prabhala等人(2010)Blood，线上DOI10.1182/blood-2009-10-246660)，并与HCC患者的不良预后相关联(Zhang等人(2009)JHepatology50，980-89)。而且，发现乳腺癌相关的巨噬细胞表达IL-17(Zhu等人(2008)BreastCancerResearch10，R95)。然而，IL-17在癌症中的作用在许多情况下尚不清楚。特别地，已鉴定出IL-17和产生IL-17的TH17细胞在肿瘤免疫中既有正面作用又有负面作用，有时在同一癌症类型中也如此(Ji和Zhang(2010)CancerImmunolImmuother59，979-987)。IL-17A与IL-17受体(RA/RC复合物)结合。IL-17A可以作为同型二聚体或与IL-17F一起作为异型二聚体存在。IL-17A表达受限(淋巴细胞、嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞)。IL-17A与气道炎症和银屑病有关。IL-17E(也称为IL-25)与IL-17受体(RA/RB复合物)结合。IL-17E与气道炎症有关，并将嗜酸性粒细胞募集到肺组织。IL-17E与IL-17A有较远关联(17％)。IL-17E表达极低(Th2、嗜酸性粒细胞、肥大细胞和巨噬细胞)。IL-17F以比IL-17A低的亲和力与IL-17受体(RA/RC复合物)结合。它具有与IL-17A类似的表达模式。IL-17F与气道炎症和银屑病有关。IL-17F与IL-17A最密切关联(44-55％)，可以作为同型二聚体或与IL-17A一起作为异型二聚体存在。我们早先于2017年12月15日提交的未决申请GB1720932.1描述了对IL-17具有高结合亲和力的双环肽配体。这些申请进一步描述了肽配体与治疗剂的缀合物，具体是与细胞毒性剂的缀合物。
技术实现思路
本专利技术的专利技术人已发现，通过烷基氨基键取代对IL-17具有亲和力的环状肽中的硫醚键，得到显示出与全部使用硫醚键制备的相应缀合物相似的IL-17亲和力的环状肽缀合物。预期用烷基氨基键取代硫醚键将使根据本专利技术的缀合物有改善的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种IL-17特异性的肽配体，其包含多肽和分子支架，所述多肽包含三个选自半胱氨酸、L-2,3-二氨基丙酸(Dap)、N-β-烷基-L-2,3-二氨基丙酸(N-AlkDap)和N-β-卤代烷基-L-2,3-二氨基丙酸(N-HAlkDap)的残基，条件是所述三个残基中的至少一个选自Dap、N-AlkDap或N-HAlkDap，所述三个残基被至少两个环序列隔开，所述肽通过所述多肽的Dap或N-AlkDap或N-HAlkDap残基经共价烷基氨基键以及当所述三个残基包括半胱氨酸时通过所述多肽的半胱氨酸残基经硫醚键与所述支架连接，从而在所述分子支架上形成两个多肽环。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180622 GB 1810327.51.一种IL-17特异性的肽配体，其包含多肽和分子支架，所述多肽包含三个选自半胱氨酸、L-2,3-二氨基丙酸(Dap)、N-β-烷基-L-2,3-二氨基丙酸(N-AlkDap)和N-β-卤代烷基-L-2,3-二氨基丙酸(N-HAlkDap)的残基，条件是所述三个残基中的至少一个选自Dap、N-AlkDap或N-HAlkDap，所述三个残基被至少两个环序列隔开，所述肽通过所述多肽的Dap或N-AlkDap或N-HAlkDap残基经共价烷基氨基键以及当所述三个残基包括半胱氨酸时通过所述多肽的半胱氨酸残基经硫醚键与所述支架连接，从而在所述分子支架上形成两个多肽环。


2.如权利要求1所限定的肽配体，其中所述肽配体包含选自以下的氨基酸序列：
Ci-X1-Cii-X2-Ciii
其中：
Ci、Cii和Ciii独立地为半胱氨酸、L-2,3-二氨基丙酸(Dap)、N-β-烷基-L-2,3-二氨基丙酸(N-AlkDap)或N-β-卤代烷基-L-2,3-二氨基丙酸(N-HAlkDap)，条件是Ci、Cii和Ciii中的至少一个是Dap、N-AlkDap或N-HAlkDap；且
X1和X2表示半胱氨酸、Dap、N-AlkDap或N-HAlkDap残基之间的氨基酸残基，其中X1和X2各自独立地具有2至7个氨基酸残基。


3.如前述权利要求中任一项所限定的肽配体，其中Ci、Cii和Ciii中的两个选自Dap、N-AlkDap或N-HAlkDap，且Ci、Cii和Ciii中的第三个是半胱氨酸，优选Aii是半胱氨酸。


4.如权利要求1或2所限定的肽配体，其中Ci、Cii和Ciii中的一个选自Dap、N-AlkDap或N-HAlkDap，Ci、Cii和Ciii中其余的是半胱氨酸。


5.如前述权利要求中任一项所限定的肽配体，其中所述分子支架是1,3,5-三(亚甲基)苯(TBMB)。


6.如前述权利要求中任一项所限定的肽配体，其对IL-17A是特异性的且包含选自SEQIDNO:1至3的氨基酸序列：
CiPQDLELCiiTFLFGDCiii(SEQIDNO：1)；
CiDQDELMCiiFLTGHQCiii(SEQIDNO：2)；和
CiPENELYCiiFLSSQQCiii(SEQIDNO：3)；
或其药学上可接受的盐，
其中Ci、Cii和Ciii独立地为半胱氨酸、L-2,3-二氨基丙酸(Dap)、N-β-烷基-L-2,3-二氨基丙酸(N-AlkDap)或N-β-卤代烷基-L-2,3-二氨基丙酸(N-HAlkDap)，条件是Ci、Cii和Ciii中的至少一个是Dap、N-AlkDap或N-HAlkDap。


7.如权利要求6所限定的肽配体，其包含选自以下的氨基酸序列：
A-(SEQIDNO：1)-A；
A-(SEQIDNO：2)-A；和
SEQIDNO：3，
如A-(SEQIDNO：1)-A。


8.如权利要求1至5中任一项所限定的肽配体，其对IL-17E是特异性的且包含...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·特夫，G·穆德，S·帕万，
申请(专利权)人：拜斯科技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB