一种肺腺癌诊断的生物标志物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种肺腺癌诊断的生物标志物及其应用，具体而言，所述肺腺癌诊断的生物标志物为ENSG00000277534，本发明专利技术通过实验研究证明了与正常对照组织相比，肺腺癌组织中ENSG00000277534的表达水平显著上调。根据ENSG00000277534的上述性质可以根据其制备诊断肺腺癌的产品；体外细胞实验证明抑制ENSG00000277534的表达可以抑制肺腺癌细胞增殖并促进细胞凋亡，故抑制ENSG00000277534的表达可作为治疗肺腺癌的一种新的治疗策略，且具有良好的临床应用价值。具有良好的临床应用价值。具有良好的临床应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种肺腺癌诊断的生物标志物及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体而言，涉及一种肺腺癌诊断的生物标志物ENSG00000277534及其应用。

技术介绍

[0002]肺癌(Lung cance，LC)分为小细胞肺癌(Small cell lung cancer,SCLC)和非小细胞肺癌(Non
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small cell lung cancer，NSCLC)两大类，其中，非小细胞肺癌占肺癌总数的约85％，主要包括肺腺癌(Lung adenocarcinoma，LUAD)、肺鳞癌(Lung squamous cell carcinoma，LUSC)等。肺癌是全世界死亡率第一的高度恶性呼吸系统肿瘤，在我国，肺癌的发病率与死亡率均为首位，每年肺癌发病人数超过70万，死亡人数超过60万，其中，肺腺癌约占所有肺癌的一半，很多患者被确诊时已是中晚期。统计显示，肺腺癌最常见于50
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59岁年龄组，女性肺腺癌患者增长很快，但大多数都不吸烟，其发病机制非常复杂，除遗传因素外，主要危险因素是吸烟、石棉、氡和其他环境因素等多种因素参与了肿瘤的发生发展，目前其发病机制尚未完全清楚。
[0003]近年来，尽管肺腺癌的靶向及免疫等治疗手段取得了很大进展，但整体预后不佳，现阶段整体五年生存率为15.9％，主要原因是肺腺癌的高分子异质性，目前依靠低剂量CT扫描和经典血清肿瘤标志物的诊断方法有限且不特异，因此，肺癌患者就诊时通常处于晚期。肺腺癌治疗的方法包括手术治疗、放射治疗、化学药物治疗、靶向药物治疗及免疫治疗等，其中，手术、放疗、化疗都存在治疗的针对性不强、治愈率不高、降低患者免疫力等缺点，而靶向治疗和免疫治疗可以在一定程度上提高部分患者的有效率。因此，对肺癌发生发展的分子机制进行更加深入的研究与探索，寻找与肺腺癌诊断及治疗、预后相关的新的生物标志物具有至关重要的意义。
[0004]本专利技术通过对一定量的临床肺腺癌样本进行研究，发现了ENSG00000277534在肺腺癌组织中显著高表达，与正常组织中的ENSG00000277534的表达量相比具有显著性的差异，进而通过验证实验证明了ENSG00000277534可用作肺腺癌诊断和治疗的生物标志物，并且具有良好的临床应用价值，目前尚未见有关于ENSG00000277534与肺腺癌关系的报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种肺腺癌诊断的生物标志物ENSG00000277534及其应用，本专利技术通过对一定量的临床肺腺癌样本进行研究，发现了ENSG00000277534在肺腺癌组织中显著高表达，与正常组织中的ENSG00000277534的表达量相比具有显著性的差异，进而通过验证实验证明了ENSG00000277534可用作肺腺癌诊断和治疗的生物标志物，并且具有良好的临床应用价值。
[0006]本专利技术的上述目的通过以下技术方案得以实现：
[0007]本专利技术的第一方面提供了ENSG00000277534作为生物标志物在制备肺腺癌的诊断产品中的应用。
[0008]进一步，所述ENSG00000277534在肺腺癌患者组织中表达上调。
[0009]进一步，所述产品包括通过RT
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PCR、qPCR、原位杂交或高通量测序平台检测ENSG00000277534的表达水平的试剂。
[0010]进一步，RT
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PCR是指将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。具体方法包括：首先经反转录酶的作用，从RNA合成cDNA，再以cDNA为模板，在DNA聚合酶作用下扩增合成目的片段。
[0011]进一步，qPCR是指一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法，通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。
[0012]进一步，原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的方法。
[0013]进一步，高通量测序平台是指采用Illumina成熟的TruSeq边合成边测序的技术平台，集扩增、测序和数据分析的测序仪，每次运行能产生超过7Gb的数据，循环时间短、测序准确。
[0014]本专利技术的第二方面提供了一种用于诊断肺腺癌的产品。
[0015]进一步，所述产品通过检测受试者样本中ENSG00000277534的表达水平来诊断肺腺癌。
[0016]进一步，所述受试者样本包括(但不限于)：组织、血液、尿液或唾液；
[0017]优选地，所述受试者样本为组织。
[0018]在本专利技术的具体实施例中，所述受试者样本为组织，通过对一定量的临床确诊为肺腺癌患者的肿瘤组织及其癌旁正常组织进行相关的实验研究和验证，确定与肺腺癌发生发展相关的生物标志物。
[0019]进一步，所述产品包括试剂盒或芯片；
[0020]优选地，所述试剂盒包括特异性扩增ENSG00000277534的引物；
[0021]优选地，所述芯片包括包括特异性识别ENSG00000277534的探针；
[0022]更优选地，所述特异性扩增ENSG00000277534的引物序列如SEQ ID NO.1～2所示。
[0023]进一步，所述的引物序列SEQ ID NO.1～2是根据ENSG00000277534基因的转录本ENST00000620414设计的。
[0024]在本专利技术中，试剂盒还包括：容器、阳性对照物、阴性对照物、缓冲剂、助剂或溶剂，以及试剂盒的使用说明书，其中记载了如何采用试剂盒进行检测，以及如何利用检测结果对是否患有肺腺癌进行判断或辅助判断、对肺腺癌患者的治疗方案进行选择。
[0025]具体地，所述试剂盒还包括：从肺腺癌组织中抽提总RNA所用的试剂；以总RNA为模板将ENSG00000277534逆转录为cDNA的试剂；将cDNA进行实时荧光定量PCR的试剂。
[0026]进一步，所述从肺腺癌组织中抽提总RNA所用的试剂包括(但不限于)：RNAiso Plus、异丙醇、三氯甲烷、无核酸酶水、体积百分比浓度为75％的乙醇。
[0027]进一步，以总RNA为模板将ENSG00000277534逆转录为cDNA的试剂包括(但不限于)：逆转录缓冲液、RNA酶抑制剂、三磷酸碱基脱氧核苷酸、逆转录酶以及随机引物。
[0028]进一步，将cDNA进行实时荧光定量PCR的试剂包括(但不限于)：实时荧光定量SYBR Green染料、无核酸酶水。
[0029]本专利技术所述的试剂盒可包含适于实用(如针对于不同的检测方法)的多种不同的试剂，并不局限于上述所列举的试剂，只要是基于ENSG00000277534基因或其转录本的检测来诊断肺腺癌的试剂均在本专利技术保护的范围内。
[0030]进一步，所述产品还包括试纸、高通量测序平台。
[0031]高通量测本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ENSG00000277534作为生物标志物在制备肺腺癌的诊断产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述ENSG00000277534在肺腺癌患者组织中表达上调。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括通过RT
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PCR、qPCR、原位杂交或高通量测序平台检测ENSG00000277534的表达水平的试剂。4.一种用于诊断肺腺癌的产品，其特征在于，所述产品通过检测受试者样本中ENSG00000277534的表达水平来诊断肺腺癌；优选地，所述受试者样本为组织。5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述产品包括试剂盒或芯片；优选地，所述试剂盒包括特异性扩增ENSG00000277534的引物；优选地，所述芯片包括包括特异性识别ENSG00000277534的...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕茜，刘颖，高志康，陈碧，
申请(专利权)人：徐州市中心医院，
类型：发明
国别省市：