新型肿瘤相关转录因子ZSCAN16及其在抑制肿瘤中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种新型肿瘤相关转录因子ZSCAN16及其在抑制肿瘤中的作用，属于生物医药技术领域。ZSCAN16基因作为膀胱癌治疗靶点的应用。本发明专利技术的优点如下：本发明专利技术揭示了ZSCAN16在膀胱癌发展的过程中可能发挥重要的生物学作用，并且其与肿瘤的发展也密切相关。本发明专利技术结果显示，ZSCAN16是膀胱癌发生和发展的关键新的癌基因。体外实验结果表明，ZSCAN16的沉默抑制了T24细胞的增殖、集落形成、细胞凋亡以及迁移和侵袭。ZSCAN16可作为膀胱癌调控的研究靶点，可作为肿瘤的诊断，预后评估标志物，还可作为靶点开发抑制肿瘤的药物。还可作为靶点开发抑制肿瘤的药物。还可作为靶点开发抑制肿瘤的药物。

【技术实现步骤摘要】
新型肿瘤相关转录因子ZSCAN16及其在抑制肿瘤中的应用


[0001]本专利技术涉及新型的肿瘤相关靶点ZSCAN16及其在抑制肿瘤中的应用，属于生物医药


技术介绍

[0002]膀胱癌是世界上最常见的泌尿生殖系统恶性肿瘤之一，自2015年以来，全球共有340万人罹患膀胱癌，每年新增43万例。中国膀胱癌的发病率和死亡率在过去的十年中迅速上升。吸烟、家族史、放疗史、反复膀胱感染和化学物质接触等已被证明是膀胱癌发生和进展的高危因素。膀胱癌患者的标准治疗包括放疗、化疗和手术切除。非肌肉浸润性膀胱癌的治疗包括内镜下膀胱肿瘤切除，术后辅助膀胱内灌注化疗，常用药物包括表阿霉素、阿霉素、卡介苗以及丝裂霉素。而对于肌肉浸润性膀胱癌，推荐MAVC方案即顺铂、阿霉素、长春碱联合甲氨蝶呤作为一线化疗方案。然而，尽管膀胱癌的诊断和治疗取得了进展，但在过去的几十年中，患者的总生存率没有改善。因此，研究新的分子治疗靶点势在必行，这有利于我们更加深入的认识膀胱癌的发病机制，以制定更加有效的分子治疗策略。
[0003]近年来，免疫治疗已成为癌症研究的热点。逃避免疫系统是癌症的标志。肿瘤细胞能表达一系列免疫抑制相关蛋白，诱导免疫细胞功能紊乱和凋亡。NF-κB(活化B细胞的核因子kappa轻链增强剂)转录因子家族在肿瘤进展与转移，以及免疫调节中发挥关键作用。NF-κB家族的所有蛋白质在其N末端都有一个相对同源结构域。p50和p65作为最常见的NF-κB信号传导途径的异源三聚体，与肿瘤密切相关。p50和p65的抑制作用主要通过与抑制蛋白IκBα结合来介导的，以抑制细胞核内信号传导。磷酸化、降解和泛素化作为IκBα转录后的主要修饰作用，导致p50或p65亚单位从IκB复合物中释放，引起核易位并最终导致一系列癌基因的激活。大量研究证明，PRMT5诱导了NF-κB的对称性去甲基化，以增强了其活性。膀胱癌细胞凋亡主要受NF-κB相关信号通路控制，与细胞增殖过程密切相关。鉴于存在大量潜在未知癌基因，寻找新转录因子或可调节关键转录因子的新基因，有助于为将来靶向治疗提供强有力的分子基础。
[0004]ZSCAN16(含锌指和16个结构域)是一个蛋白质编码基因，属于DNA结合转录因子家族。作为一种“新”的转录因子，ZSCAN16的功能和机制很少被报道。SCAN结构域家族是高度保守的锌指转录因子家族的一个亚群。在膀胱癌中，唯一报道的SCAN结构域家族成员是ZSCAN12，是膀胱癌潜在的生物标志物，可用于高级膀胱癌诊断。
[0005]而目前尚未有关于ZSCAN16基因与中膀胱癌相关的研究报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题是提供一种新型肿瘤相关转录因子ZSCAN16。
[0007]本专利技术要解决的另一个技术问题是提供肿瘤相关转录因子ZSCAN16在抑制肿瘤中的作用。
[0008]为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0009]ZSCAN16基因作为膀胱癌治疗靶点的应用。
[0010]ZSCAN16蛋白的抑制剂在制备预防和/或治疗膀胱癌的药物中的用途。
[0011]所述药物包括药学上可接受的载体和有效量的活性成分，其中所述的活性成分为ZSCAN16蛋白的抑制剂。
[0012]所述ZSCAN16蛋白的抑制剂选自ZSCAN16蛋白的抗体和/或ZSCAN16蛋白的结合蛋白。
[0013]ZSCAN16基因表达的抑制剂在制备预防和/或治疗膀胱癌的药物中的用途。
[0014]所述药物包括药学上可接受的载体和有效量的活性成分，其中所述的活性成分为ZSCAN16基因表达的抑制剂。
[0015]所述ZSCAN16基因的抑制剂选在ZSCAN16基因特异性的RNAi、ZSCAN16基因特异性的microRNA、或抑制ZSCAN16基因启动子的抑制剂中的一种或多种。
[0016]一种预防和/或治疗膀胱癌的药物，包括药学上可接受的载体和有效量的以下活性成分：ZSCAN16蛋白的抑制剂和/或ZSCAN16基因的抑制剂。
[0017]所述ZSCAN16蛋白的抑制剂选自ZSCAN16蛋白的抗体和/或ZSCAN16蛋白的结合蛋白；所述ZSCAN16基因表达的抑制剂选在ZSCAN16基因特异性的RNAi、ZSCAN16基因特异性的microRNA、或抑制ZSCAN16基因启动子的抑制剂中的一种或多种。
[0018]一种体外非治疗性抑制肿瘤细胞的方法，在ZSCAN16蛋白抑制剂或ZSCAN16基因抑制剂存在的条件下，培养肿瘤细胞，从而抑制肿瘤细胞。其中所述的肿瘤细胞是膀胱癌细胞。
[0019]根据我们之前的研究，我们发现ZSCAN16在膀胱癌中高度表达，这表明这可能是一个潜在的癌基因。在本专利技术中，我们旨在研究ZSCAN16在膀胱癌中的作用，我们的研究结果表明ZSCAN16在膀胱癌细胞中高度表达，沉默ZSCAN16抑制了膀胱癌细胞的增殖，进一步的Western Blot研究显示ZSCAN16在膀胱癌中通过调节NF-κB信号通路发挥作用。这些结果揭示了ZSCAN16在膀胱癌中作为一种新的治疗靶点的巨大前景。
[0020]众所周知，膀胱癌的发生和发展包括多种病理过程，涉及大规模的基因改变，其中癌基因的激活和肿瘤抑制因子的失活是膀胱肿瘤形成的关键事件。作为世界上最致命的癌症之一，膀胱癌的细胞内机制仍不清楚。我们有必要研究新的癌基因作为膀胱癌的治疗靶点。在我们之前的研究中(数据未发表)，我们发现ZSCAN16在膀胱癌中高度表达。因此，为了进一步探讨ZSCAN16在膀胱癌中的作用，我们通过设计和筛选shRNA以沉默T24膀胱癌细胞系中的ZSCAN16，并最终确定两个最为有效的shRNA靶点KD1和KD2，以用于后续研究ZSCAN16对T24细胞功能的影响。
[0021]我们的研究结果表明，ZSCAN16在膀胱癌中是一种新的癌基因。我们发现ZSCAN16的mRNA表达与膀胱癌疾病进展呈正相关，即TCGA数据库中膀胱癌样中ZSCAN16的表达水平明显高于其癌旁正常组织水平。为了在功能上探讨ZSCAN16对膀胱癌细胞增殖的影响，我们利用双shRNA靶点，分别沉默T24细胞中的ZSCAN16。体内外实验结果表明，ZSCAN16是一种功能强大的转录因子，能影响细胞增殖、克隆形成和凋亡等多种细胞功能。
[0022]膀胱癌通常被认为容易转移，这是与患者预后密切相关的一个重要因素。通过伤口-愈合试验、划痕-迁移试验和侵袭试验，明确了ZSCAN16在膀胱癌转移和侵袭中的致癌作用。综上所述，ZSCAN16可能是膀胱癌的潜在致癌基因，为了进一步研究ZSCAN16致癌的细胞
内机制，我们选择了22个与细胞增殖和转移密切相关的基因进行蛋白质免疫印迹分析，并进行功能回复确认实验。研究发展，NF-κB下调在ZSCAN16沉默调控中最为显著。NF-κ B是一种多效性转录因子，在几乎所有细胞类型中表达，是一系列信号转导事件的终点，这些信号转导事件是由大量与许多生物学过程如炎症、免疫、分化、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.ZSCAN16基因作为膀胱癌治疗靶点的应用。2.ZSCAN16蛋白的抑制剂在制备预防和/或治疗膀胱癌的药物中的用途。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述药物包括药学上可接受的载体和有效量的活性成分，其中所述的活性成分为ZSCAN16蛋白的抑制剂。4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于：所述ZSCAN16蛋白的抑制剂选自ZSCAN16蛋白的抗体和/或ZSCAN16蛋白的结合蛋白。5.ZSCAN16基因表达的抑制剂在制备预防和/或治疗膀胱癌的药物中的用途。6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于：所述药物包括药学上可接受的载体和有效量的活性成分，其中所述的活性成分为ZSCAN16基因表达的抑制剂。7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述ZSCAN16基因表达的抑制剂选在ZSCAN16基因5
’
UTR、启动子、CDS及3
’
UTR区域特异性的RNAi、ZSCAN1...

【专利技术属性】
技术研发人员：李炫昊，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京友谊医院，
类型：发明
国别省市：