使用外排体对肿瘤抑制因子的治疗性调节制造技术

本文中提供了基于脂质的纳米粒(例如外排体)的组合物，其包含激活肿瘤抑制因子的治疗剂。还提供了使用这样的组合物来治疗患有至少部分地由肿瘤抑制活性的丧失引起的癌症的患者的方法。特别地，提供了包含靶向突变体p53的siRNA的外排体及其用于治疗癌症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用外排体对肿瘤抑制因子的治疗性调节相关申请的引用本申请要求于2018年4月19日提交的美国临时申请号62/659,859的优先权权益，其全部内容通过引用并入本文。序列表的引用本申请包含序列表，其已通过EFS-Web以ASCII格式提交，并且通过引用在此整体并入。所述ASCII副本于2019年4月9日创建，命名为UTFCP1369WO_ST25.txt且大小为0.7千字节。背景1.
本公开内容一般地涉及医学和肿瘤学领域。更特别地，其涉及通过施用携带载物(cargo)的外排体以激活野生型肿瘤抑制因子和/或抑制肿瘤抑制因子的致癌性功能获得性(gain-of-function)突变体来治疗癌症的组合物和方法。2.
技术介绍
p53是肿瘤抑制因子并且在数种不同类型的癌症中是突变或缺失的。数项不同的研究已示出p53基因中的突变有助于癌症进展和转移。已示出突变体p53在许多不同类型癌症(包括胰腺癌和乳腺癌)中的中心功能作用。尽管p53在癌症生物学中有这样的中心作用，但目前尚不存在抑制突变体p53的药物。我们使用外排体开发了新的方法来特异性抑制突变体p53。包括外排体的胞外囊泡(extracellularvesicle，EV)是纳米尺寸的胞间通讯载体，其参与数种生理过程并含有DNA、RNA和蛋白质。外排体显示出进入其他细胞的能力并且可潜在地将治疗剂递送到癌细胞中。专利技术概述因此，本文中提供了使用外排体特异性地激活肿瘤抑制因子(例如p53)的组合物和方法。r>在一个实施方案中，提供了组合物，其包含基于脂质的纳米粒，所述基于脂质的纳米粒包含使显性负肿瘤抑制因子突变体(dominantnegativetumorsuppressormutant)或致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体(oncogenicgain-of-functionsuppressormutant)失活的治疗剂载物。在一些方面中，基于脂质的纳米粒在其表面上包含CD47。在一些方面中，基于脂质的纳米粒在其表面上包含生长因子。在一些方面中，基于脂质的纳米粒是脂质体或外排体。在一些方面中，治疗剂载物是治疗性蛋白质、抗体、抑制性RNA、基因编辑系统或小分子药物。在某些方面中，治疗性蛋白质对应于致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体的显性负形式。在某些方面中，抗体结合胞内抗原。在某些方面中，抗体是全长抗体、scFv、Fab片段、(Fab)2、双链抗体(diabody)、三链抗体(triabody)或微抗体(minibody)。在某些方面中，抑制性RNA是siRNA、shRNA、miRNA或前miRNA(pre-miRNA)。在某些方面中，siRNA敲低显性负肿瘤抑制因子突变体或致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体的表达。在某些方面中，基因编辑系统是CRISPR系统。在某些方面中，CRISPR系统包含内切核酸酶和指导RNA(gRNA)。在某些方面中，内切核酸酶和gRNA在外排体内的单个核酸分子上编码。在某些方面中，CRISPR系统靶向致癌突变。在某些方面中，显性负肿瘤抑制因子突变体或致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体是一个或更多个点突变。在一些方面中，肿瘤抑制因子是ACVR1B、APC、ARID1B、ARID2、ASXL1、ATM、ATRX、AXIN1、B2M、BAP1、BCOR、BLU(β*)、BRCA1、BRCA2、CACNA2D2(基因26)、CASP8、C-CAM、CDKN1A(p21)、CDKN1B(p27)、CDKN1C(p57)、CDKN2A(p16)、CDKN2D(p19)、CEBPA、CFTR、CIC、CHK2、CREBBP、CTS-1、CYB561D2、CYLD、DAXX、DCC、DPC4、EP300、FAM123B、FCC、FUBP1、FUS1、GATA1、GATA3、HIN-1、HNF1A、HYAL1(Luca-10、HYAL2(Luca-2)、KDM5C、KDM6A、KRAS、KRAS2b、MADR2/JV18、MAP3K1、MCC、MEN1、MEN2、MLH1、MLL2、MLL3、MMAC1、MSH2、MSH6、MTS1、NCOR1、NF1、NF2、NOTCHl、NOTCH2、NPM1、NPRL2(基因21)、PAX5、PBRM1、PHF6、PIK3R1、PL6、PLAGL1、PRUM1、PTCH1、PTEN、RASSFl(123F2)、RB1、RNF43、RUNX1、SCGB1A1、SEMA3A、SETD2、Skp2、SMAD2、SMAD4、SMARCA4、SMARCB1、SOCS1、SOX9、STAG2、STK11、TET2、TNPAIP3、TP53、TP73、TRAF7、TSC1、VHL、WRN、WT1或WWOX。在一些方面中，肿瘤抑制因子是TP53。在某些方面中，致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体是TP53R273H。在某些方面中，治疗剂是siRNA，其中所述siRNA具有SEQIDNO：1的序列。在一些方面中，肿瘤抑制因子是KRAS。在某些方面中，致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体是KRASG12D。在某些方面中，治疗剂是siRNA，其中所述siRNA具有SEQIDNO：2的序列。在一些方面中，组合物包含第一基于脂质的纳米粒和第二基于脂质的纳米粒，所述第一基于脂质的纳米粒包含具有SEQIDNO：1序列的siRNA，所述第二基于脂质的纳米粒包含具有SEQIDNO：2序列的siRNA。在一个实施方案中，提供了包含本专利技术实施方案中任一个的基于脂质的纳米粒的药物组合物。在一些方面中，组合物配制成用于肠胃外施用。在一些方面中，组合物配制成用于静脉内、肌内、皮下或腹膜内注射。在一些方面中，组合物还包含抗微生物剂。在某些方面中，抗微生物剂是苯扎氯铵、苄索氯铵、苄醇、布罗波尔(bronopol)、西曲溴铵(centrimide)、西吡氯铵(cetylpyridiniumchloride)、氯己定、氯丁醇、氯甲酚、氯二甲酚、甲酚、乙醇、甘油、海克替啶(exetidine)、咪唑烷脲(imidurea)、苯酚、苯氧乙醇、苯乙醇、硝酸苯汞、丙二醇或硫柳汞。在一个实施方案中，提供了在有此需要的患者中治疗癌症的方法，其包括向患者施用本专利技术实施方案中任一个的组合物，从而在患者中治疗癌症。在一些实施方案中，施用导致治疗剂载物向患者中的癌细胞的递送。在一些方面中，癌症是乳腺癌、肺癌、头颈癌、前列腺癌、食管癌、气管癌、脑癌、肝癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、子宫癌、宫颈癌、睾丸癌、结肠癌、直肠癌或皮肤癌。在某些方面中，胰腺癌是胰腺导管腺癌。在一些方面中，癌症是转移性的。在一些方面中，癌症对于致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体是纯合的。在一些方面中，癌细胞对于致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体是杂合的。在一些方面中，癌细胞对于显性负肿瘤抑制因子突变体是纯合的。在一些方面中，施用是全身性施用。在某些方面中，全身性施用是静脉内施用。在一些方面中，所述方法还包括向患者至少施用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.组合物，其包含基于脂质的纳米粒，所述基于脂质的纳米粒包含使显性负肿瘤抑制因子突变体或致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体失活的治疗剂载物。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180419 US 62/659,8591.组合物，其包含基于脂质的纳米粒，所述基于脂质的纳米粒包含使显性负肿瘤抑制因子突变体或致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体失活的治疗剂载物。


2.权利要求1所述的组合物，其中所述基于脂质的纳米粒在其表面上包含CD47。


3.权利要求1所述的组合物，其中所述基于脂质的纳米粒在其表面上包含生长因子。


4.权利要求1所述的组合物，其中所述基于脂质的纳米粒是脂质体或外排体。


5.权利要求1所述的组合物，其中所述治疗剂载物是治疗性蛋白质、抗体、抑制性RNA、基因编辑系统或小分子药物。


6.权利要求5所述的组合物，其中所述治疗性蛋白质对应于致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体的显性负形式。


7.权利要求5所述的组合物，其中所述抗体结合胞内抗原。


8.权利要求5所述的组合物，其中所述抗体是全长抗体、scFv、Fab片段、(Fab)2、双链抗体、三链抗体或微抗体。


9.权利要求5所述的组合物，其中所述抑制性RNA是siRNA、shRNA、miRNA或前miRNA。


10.权利要求9所述的组合物，其中所述siRNA敲低所述显性负肿瘤抑制因子突变体或致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体的表达。


11.权利要求9所述的组合物，其中所述基因编辑系统是CRISPR系统。


12.权利要求11所述的组合物，其中所述CRISPR系统包含内切核酸酶和指导RNA(gRNA)。


13.权利要求12所述的组合物，其中所述内切核酸酶和所述gRNA在所述外排体内的单个核酸分子上编码。


14.权利要求11所述的组合物，其中所述CRISPR系统靶向致癌突变。


15.权利要求14所述的组合物，其中所述显性负肿瘤抑制因子突变体或致癌性功能获得性肿瘤抑制因子突变体是一个或更多个点突变。


16.权利要求1所述的组合物，其中所述肿瘤抑制因子是ACVR1B、APC、ARID1B、ARID2、ASXL1、ATM、ATRX、AXIN1、B2M、BAP1、BCOR、BLU(β*)、BRCA1、BRCA2、CACNA2D2(基因26)、CASP8、C-CAM、CDKN1A(p21)、CDKN1B(p27)、CDKN1C(p57)、CDKN2A(p16)、CDKN2D(p19)、CEBPA、CFTR、CIC、CHK2、CREBBP、CTS-1、CYB561D2、CYLD、DAXX、DCC、DPC4、EP300、FAM123B、FCC、FUBP1、FUS1、GATA1、GATA3、HIN-1、HNF1A、HYAL1(Luca-10、HYAL2(Luca-2)、KDM5C、KDM6A、KRAS、KRAS2b、MADR2/JV18、MAP3K1、MCC、MEN1、MEN2、MLH1、MLL2、MLL3、MMAC1、MSH2、MSH6、MTS1、NCOR1、NF1、NF2、NOTCH1、NOTCH2、NPM1、NPRL2(基因21)、PAX5、PBRM1、PHF6、PIK3R1、PL6、PLAGL1、PRDM1、PTCH1、PTEN、RASSF1(123F2)、RB1、RNF43、RUNX1、SCGB1A1、SEMA3A、SETD2、Skp2、SMAD2、SMAD4、SMARCA4、SMARCB1、SOCS1、SOX9、STAG2、STK11、TET2、TNPAIP3、TP53、TP73、TRAF7、TSC1、VHL、WRN、WT1或WWOX。


17.权利要求1所述的组合物，其中所述肿瘤抑制因子是TP53。


18.权利要求17所...

【专利技术属性】
技术研发人员：拉古·卡尔卢里，
申请(专利权)人：得克萨斯州大学系统董事会，
类型：发明
国别省市：美国;US