肽活化剂制造技术

本发明专利技术涉及用于活化Lck的组合物和方法，包括体内、体外和离体用途。体外和离体用途。体外和离体用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】肽活化剂


[0001]本专利技术涉及Lck(淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶)活性的刺激并且涉及用于防治或治疗各种疾病或病状的Lck活化剂。

技术介绍

[0002]在分子生物学中，CD4(分化簇4)是在免疫细胞(诸如T辅助细胞、单核细胞、巨噬细胞和树突细胞)的表面发现的一种糖蛋白。CD4+ T辅助细胞是白细胞，其是免疫系统的重要部分并且可将信号发送到其它免疫细胞(诸如CD8杀伤细胞)以破坏感染性颗粒。当T细胞受体(TCR)和共受体结合抗原肽：主要组织相容性复合物(MHC)时，T细胞被活化，这会导致TCR复合物聚集并触发细胞内级联反应。在T细胞活化中，共受体CD4和CD8分别与II类或I类MHC分子结合，增加了T细胞对抗原的敏感性。
[0003]Lck是Src家族激酶的成员并且对于T细胞效应子潜能(即，发育中的胸腺细胞和成熟T细胞的增殖和分化以及有效的细胞因子转录)的形成至关重要(Lovatt M等人，Mol&Cell Biology,2006,26(22):8655-8665)。
[0004]Lck对TCR的磷酸化通过创建结合位点来启动下游信号传导，所述结合位点将细胞溶质激酶ZAP70(ζ链相关蛋白激酶70)募集到细胞膜上(Iwashima M等人，Science,1994,263:1136-1139)。更特别地，Lck受C-末端Src激酶(Csk)调节，该C-末端激酶使Tyr 505磷酸化，从而导致Lck失活，通过活性位点重新排列而激活Lck的激酶活性的Lck活化环Tyr 394的反式自体磷酸化，以及通过磷酸酶去磷酸化(Fulop T等人，Longevity&Healthspan,2012,1:6)。
[0005]在TCR刺激后，与CD4/CD8相关的Lck与TCR/CD3复合物接近，并且使CD3分子的基于免疫受体酪氨酸的活化基序(ITAM)磷酸化。然后ZAP70激酶被募集到磷酸化的ITAM上，随后被Lck活化。这导致多个途径的活化，多个途径的活化最终导致T细胞活化和IL-2产生(Wang G等人，BioMed Research International,2014,doi.org/10.1155/2014/682010)。
[0006]另外，树突细胞(DC)介导的Lck活化导致“TCR许可”，这一过程极大地提高了TCR对同源肽-MHC II类抗原复合物的反应的敏感性和幅度(Meraner P等人，2007,J Immunol,178(4):2262-2271)。此类上皮内DETC细胞(树突状表皮T细胞)或γ/δT细胞在体内稳态、组织修复、炎症和防御恶性肿瘤方面起关键作用(Witherden DA和Havran WL,J Leukoc Biol,2013,94(1):69-76)。

技术实现思路

[0007]在一方面，本专利技术提供了用于活化Lck的肽，其中所述肽包含式I的Lck活化多肽部分或其反向序列：
[0008]R/K
’-
x
1-R/K-x
2-R/K-x
3-x
4-x
5-x
6-R/K
”ꢀꢀꢀ
式I
[0009]其中：
[0010]每个R/K均独立地为精氨酸或赖氨酸氨基酸残基；
(2Adod)4。
[0034]在另一方面，本专利技术提供了由选自由以下组成的组的氨基酸序列组成的肽：RSKAKNPLYR-(2Adod)4、rskaknplyr-(2Adod)4、RVKVKVVVVR
--
(2Adod)4和rvkvkvvvvr-(2Adod)4。
[0035]在另一方面，本专利技术提供了药物组合物，所述药物组合物包含作为活性成分的如本文所述的肽以及药学上可接受的稀释剂或载剂。
[0036]在另一方面，本专利技术提供了增加Lck激酶活性的方法，所述方法包括使Lck激酶与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0037]在另一方面，本专利技术提供了增加Lck激酶的Y394磷酸化的方法，所述方法包括使Lck激酶与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0038]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞或细胞群体的IL-2分泌的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0039]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞上或细胞群体中的IL-2Ra(CD25)表达的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0040]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞上或细胞群体中的IL-2RB(CD122)表达的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0041]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞或细胞群体的IL-2反应性的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0042]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞上或细胞群体中的IL-15R表达的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0043]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞或细胞群体的IL-15反应性的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0044]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞上或细胞群体中的CD28表达的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0045]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞或细胞群体的IL-21分泌的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0046]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞上或细胞群体中的IL-21R(CD360)IL-2RB表达的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0047]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞或细胞群体的IL-21反应性的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0048]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞上或细胞群体中的IL-12R表达的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0049]在一个实施方案中，IL-12R为IL-12RB1和/或IL-12RB2。
[0050]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞或细胞群体的IL-12反应性的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含如本文所述的肽的组合物或如本文所述的药物组合物接触。
[0051]在另一方面，本专利技术提供了增加细胞或细胞群体的细胞因子分泌的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于活化Lck的肽，其中所述肽包含式I的Lck活化多肽部分或其反向序列：R/K
’-
x
1-R/K-x
2-R/K-x
3-x
4-x
5-x
6-R/K
”ꢀꢀ
式I其中：每个R/K均独立地为精氨酸或赖氨酸氨基酸残基；R/K
’
为精氨酸或赖氨酸氨基酸残基并且存在或不存在；R/K”为精氨酸或赖氨酸氨基酸残基并且存在或不存在；x1至x6各自独立地为氨基酸；并且其中氨基酸x3至x6集体地存在或不存在，并且当氨基酸x3至x6不存在时，R/K”不存在。2.根据权利要求1所述的肽，其中氨基酸x1至x6中的一者或多者为疏水性氨基酸。3.根据权利要求1或权利要求2所述的肽，其中所述Lck活化多肽部分包含L氨基酸残基。4.根据权利要求1或权利要求2所述的肽，其中所述Lck活化多肽部分由L氨基酸残基组成。5.根据权利要求1或权利要求2所述的肽，其中所述Lck活化多肽部分包含D氨基酸残基。6.根据权利要求1或权利要求2所述的肽，其中所述Lck活化多肽部分由D氨基酸残基组成。7.根据权利要求1至6中任一项所述的肽，其中所述Lck活化多肽部分的序列选自由以下组成的组：RSKAKNPLY、rskaknply、RVKVKVVVV和rvkvkvvvv。8.根据权利要求1至7中任一项所述的肽，所述肽进一步包含与所述Lck活化多肽部分的N-末端或C-末端偶联的式II的化合物；其中：n为所述化合物的单体单元的数目并且是1至5的整数；每个m独立地为0至18的整数；并且每个R基团独立地为H或C1至C
18
侧链。9.根据权利要求8所述的肽，其中每个单体单元的R基团独立地为C1至C
18
侧链。10.根据权利要求8所述的肽，其中每个R基团的长度独立地为18-m个碳原子，其中m的值为0至17。11.根据权利要求1至7中任一项所述的肽，所述肽进一步包含与所述Lck活化多肽部分的N-末端或C-末端偶联的化合物，其中所述化合物为至少一个脂肪酸。12.根据权利要求11所述的肽，其中至少四个脂肪酸与所述Lck活化多肽部分的C-末端偶联。13.根据权利要求12所述的肽，其中多于一个脂肪酸的偶联是线性的。14.根据权利要求12所述的肽，其中多于一个脂肪酸的偶联是支化的。
15.根据权利要求11至14中任一项所述的肽，其中所述脂肪酸是饱和的。16.根据权利要求11至14中任一项所述的肽，其中所述脂肪酸选自由羊油酸、羊脂酸、羊蜡酸(癸酸)和月桂酸(十二烷酸)组成的组。17.根据权利要求11至16中任一项所述的肽，其中最远端的脂肪酸被酰胺化。18.根据权利要求1至7中任一项所述的肽，其中所述氨基酸序列在所述Lck活化多肽部分的C-末端被酰胺化。19.一种包含选自由以下组成的组的氨基酸序列的肽：RSKAKNPLYR-(2Adod)4、rskaknplyr-(2Adod)4、RVKVKVVVVR
--
(2Adod)4和rvkvkvvvvr-(2Adod)4。20.一种由选自由以下组成的组的氨基酸序列组成的肽：RSKAKNPLYR-(2Adod)4、rskaknplyr-(2Adod)4、RVKVKVVVVR
--
(2Adod)4和rvkvkvvvvr-(2Adod)4。21.一种药物组合物，所述药物组合物包含作为活性成分的根据权利要求1至20中任一项所述的肽以及药学上可接受的稀释剂或载剂。22.一种增加Lck激酶活性的方法，所述方法包括使Lck激酶与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物接触。23.一种增加Lck激酶的Y394磷酸化的方法，所述方法包括使Lck激酶与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物接触。24.一种增加细胞或细胞群体的IL-2分泌的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物接触。25.一种增加细胞上或细胞群体中的IL-2Ra(CD25)表达的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物接触。26.一种增加细胞上或细胞群体中的IL-2RB(CD122)表达的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物接触。27.一种增加细胞的或细胞群体中的IL-2反应性的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物接触。28.一种增加细胞上或细胞群体中的IL-15R表达的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物接触。29.一种增加细胞的或细胞群体中的IL-15反应性的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物接触。30.一种增加细胞上或细胞群体中的CD28表达的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物接触。31.一种增加细胞或细胞群体的IL-21分泌的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物
接触。32.一种增加细胞上或细胞群体中的IL-21R(CD360)IL-2RB表达的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物接触。33.一种增加细胞的或细胞群体中的IL-21反应性的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物接触。34.一种增加细胞上或细胞群体中的IL-12R表达的方法，所述方法包括使细胞或细胞群体与包含根据权利要求1至20中任一项所述的肽的组合物或根据权利要求21所述的药物组合物接触。35.根据权利要求34所述的方法，其中所述IL-12R为IL-12RB1...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：英特肽治疗有限公司，
类型：发明
国别省市：