一种新型的原癌蛋白SET抑制剂和其融合多肽及其应用制造技术

本发明专利技术属于药物领域，具体地公开了一种新型的原癌蛋白SET抑制剂和其融合多肽及其应用；原癌蛋白SET抑制剂的氨基酸序列为SEQ ID NO.1，SEQ ID NO.2，SEQ ID NO.3。对应的融合多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.4,SEQ ID NO.5,SEQ ID NO.5。可以在1微摩尔浓度水平上抑制由SET蛋白介导的细胞增殖，并在体内外实验实现出良好的肿瘤抑制效果，具有潜在的新药开发价值。值。值。

【技术实现步骤摘要】
一种新型的原癌蛋白SET抑制剂和其融合多肽及其应用


[0001]本专利技术属于药物领域，具体涉及一种原癌蛋白SET抑制剂融合多肽CY-1，CY-2，CY-3及其应用，具有抑制由SET介导的肿瘤细胞增殖及相关功能的多肽。
技术背景
[0002]肿瘤一直是一个严重的医学问题，肿瘤转移是其致死率高居不下的主要原因。2018年全球新发癌症1810万，死亡960万。医学界一直致力于研究肿瘤治疗的有效手段，众多小分子抑制剂及免疫治疗药物被争相开发，相对延长了肿瘤病人的生存时间。
[0003]SET蛋白是一种多功能的原癌蛋白，在各种细胞中广泛表达，SET蛋白参与调控细胞周期，细胞运动，细胞凋亡等多种细胞过程且在细胞转录调控和DNA损伤修复中发挥关键作用。SET蛋白的高表达与肿瘤发生，肿瘤转移和不良预后明显相关。乳腺癌作为女性高发性的肿瘤之一，其发病率和死亡率呈现连年增长的趋势，其中雌激素受体阳性的乳腺癌约占70％左右，雌激素可与雌激素受体结合并启动雌激素响应基因的表达，从而促进肿瘤细胞增殖和转移，所以临床上雌激素受体阳性乳腺癌的主要治疗手段是使用雌激素竞争性拮抗剂他莫昔芬等抑制雌激素受体所介导的雌激素基因的响应，进而抑制肿瘤细胞的增殖和转移以减缓病情发展。SET蛋白被发现可与雌激素受体相互作用，但它在雌激素诱导的基因转录激活中的调节功能和作用机制一直存在着争议，SET蛋白在雌激素受体ERα阳性的MCF-7细胞中过表达，是激素受体介导的基因表达的重要调控因子。我们研究首次发现SET蛋白促进雌激素诱导的雌激素受体α介导的基因表达。
[0004]SET蛋白是一种典型的核小体组装蛋白，真核生物中，每个染色质核小体是由147bp的DNA链，一个组蛋白八聚体和一个组蛋白linker组成。每个组蛋白八聚体包含成对的H2A，H2B，H3，H4组蛋白，linker组蛋白H1进一步对核小体连接压缩成紧致的染色质，因此在正常情况下染色体DNA是无法直接接近的。调整细胞复制和转录状态通常需要先改变染色质结构，因此组蛋白修饰因子，染色质重塑复合物和组蛋白分子伴侣在调整染色质DNA可及性的过程中起重要的调控作用。SET作为核小体组装蛋白家族的重要成员之一，可与核心组蛋白相互作用，参与染色质结构重塑，促进PolⅡ对DNA的识别进而启动基因转录起始。同时，SET蛋白还可以与组蛋白linker H1相互作用，参与移除H1从而解除H1所介导的DNA转录抑制状态。但SET参与转录调控的表观遗传学及分子生物学机制仍有待于进一步探究。

技术实现思路

[0005]专利技术目的
[0006]本专利技术提供一种具有潜在医学和药学价值的全新的原癌蛋白SET多肽抑制剂序列及融合多肽序列，该SET蛋白抑制剂CY-1,2,3及其融合多肽CPCY-1,2,3对治疗体内外肿瘤具有良好的效果。
[0007]技术方案
[0008]一种原癌蛋白SET抑制剂，其特征在于：Xm-QYYLVPDM-Yn，其中X或Y为任意氨基酸，
m与n表示氨基酸数目，m≥0，n≥0。也就是说以QYYLVPDM为母序列基础上，C端或N端可以为大于等于一个任意氨基酸取代。
[0009]进一步选择：
[0010]一种SET蛋白抑制剂，其特征在于：其氨基酸序列为CY-1:SEQ ID NO.1，CY-2:SEQ ID NO.2，CY-3:SEQ ID NO.3。
[0011]一种SET蛋白抑制剂与穿膜肽形成融合多肽，其特征在于：其氨基酸序列为CPCY-1:SEQ ID NO.4，CPCY-2:SEQ ID NO.5，CPCY-3:SEQ ID NO.6。
[0012]其中所述穿膜肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.7。
[0013]所述的SET蛋白抑制剂及其融合多肽CY-3在制备治疗抑制肿瘤药物中的应用。
[0014]所述的肿瘤包括胃癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、胶质瘤、黑色素瘤、宫颈癌、胰腺癌、结肠癌、直肠癌、卵巢癌前列腺癌或睾丸癌。
[0015]SET多肽抑制剂序列为
[0016]CY-1:QYYLVPDM；
[0017]CY-2:LQYYLVPDMD；
[0018]CY-3:QYYLVPDMDDE；
[0019]穿膜肽序列为KETWWETWWTEWSQPKKKRKV；
[0020]CPCY-1:KETWWETWWTEWSQPKKKRKVQYYLVPDM；
[0021]CPCY-2:KETWWETWWTEWSQPKKKRKVLQYYLVPDMD；
[0022]CPCY-3:KETWWETWWTEWSQPKKKRKVQYYLVPDMDDE。
[0023]有益效果
[0024]1、如图1-3所示，本专利技术首次发现SET蛋白可以通过其酸性结构域与组蛋白变体H2A.Z相互作用，在雌激素存在的情况下，SET蛋白可以被招募至雌激素受体结合位点从而参与雌激素响应基因的表达调控，但将其酸性结构域进行突变后，该突变体无法结合在雌激素响应元件，此时雌激素受体阳性的乳腺癌MCF-7细胞的雌激素响应明显降低。基于此，本专利技术设计了阻断SET蛋白与组蛋白H2A.Z相互作用的竞争性小分子多肽，抑制SET蛋白介导的雌激素响应基因的表达，从而抑制肿瘤细胞的增殖与转移。
[0025]本专利技术通过化学方法合成了多肽抑制剂CY-1，CY-2，CY-3该多肽抑制剂可以选择性的抑制SET蛋白与组蛋白H2A.Z的相互作用，逆转SET蛋白上调所介导的肿瘤细胞转录组的变化，体现了很好的抑制肿瘤细胞增殖的效果，且可穿过细胞膜及核膜定位于细胞核，抑制雌激素受体阳性细胞MCF-7的雌激素响应。，因为主要以CY-1作为靶序列结合，故理论上只要含有CY-1序列，或以CY-1序列为基础C端或N取代一个以上氨基酸，可以达到如上类似效果，只是作用效果强弱差异。
[0026]目前，国际上还没有以的SET蛋白作为核小体组装蛋白为治疗靶点设计抑制剂，本专利技术首次利用该靶点进行药物设计得到融合多肽CPCY-1，CPCY-2，CPCY-3，其利用穿膜肽和CY-1，CY-2或CY-3形成新的融合多肽，增加了CY-1，CY-2或CY-3进入细胞的能力，故在抑制肿瘤进展中表现出良好的效果，具有良好的开发前景。本专利技术以CPCY-3为例进行细胞毒性，细胞迁移实验、细胞定位实验，CPCY-3抑制雌激素受体阳性乳腺癌MCF-7对雌激素的响应，发现SET蛋白抑制剂体外具有抑制SET蛋白介导的细胞增殖，转录调控等功能。
附图说明
[0027]图1SET蛋白与组蛋白H2A.Z相互作用结果，其中A为不同量的H2A.Z蛋白可与H2A竞争性结合SET蛋白，B为SET蛋白及其突变体M1的结构域图示。
[0028]图2SET蛋白结合于雌激素作用元件的结果图，其中图A为雌激素响应元件示意图；图B-E分别为雌激素处理前后SET蛋白及突变体在雌激素响应元件(ERE)1和2、转录起始位点TSS及编码区(coding region)上的结合结果。
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种原癌蛋白SET抑制剂，其特征在于：Xm-QYYLVPDM-Yn，其中X或Y为任意氨基酸，m与n表示氨基酸数目，m≥0，n≥0。2.根据权利要求1所述的一种原癌蛋白SET抑制剂，其特征在于：其氨基酸序列为 SEQ ID NO.1、 SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3。3.一种融合多肽，其特征在于：其氨基酸序列为SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6。4...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭长缨，于丽婷，顾亚茹，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：