索非布韦中有关物质的检测方法技术

本发明专利技术提供一种索非布韦中有关物质的检测方法。本发明专利技术采用高效液相色谱法进行检测，色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；检测波长258‑262nm，流动相A：磷酸二氢钾‑四丁基溴化铵‑水，流动相B为乙腈，洗脱方式为梯度洗脱。本发明专利技术提供的检测方法能够实现主成分与已知杂质、以及多个未知杂质之间的有效分离，且本发明专利技术提供的方法经专属性、灵敏度等方法学研究及验证，发现本发明专利技术的方法灵敏、准确、重现性较好，能够用更为简便的方法实现对索非布韦原料中更多杂质的定性和定量，为提高和更好地控制索非布韦制剂产品的质量提供了可靠保障。

【技术实现步骤摘要】
索非布韦中有关物质的检测方法
本专利技术涉及药物分析检测
，尤其涉及一种索非布韦中有关物质的检测方法。
技术介绍
索非布韦(又名索弗布韦，英文名Sofosbuvir，商品名Sovaldi)是吉利德公司开发的用于治疗慢性丙肝的药物，于2013年12月6日经美国食品药品监督管理局(FDA)批准在美国上市，2014年1月16日经欧洲药品管理局(EMEA)批准在欧盟各国上市。该药物是首个无需联合干扰素就能安全有效治疗某些类型丙肝的药物。临床试验证实针对1型和4型丙肝，该药物联合聚乙二醇干扰素和利巴韦林的总体持续病毒学应答率(SVR)高达90％；针对2型丙肝，该药物联合利巴韦林的SVR可达85-95％；针对3型丙肝，该药物联合利巴韦林的SVR可达61-63％。上述复方药物更安全，疗效更加，且可以彻底根除丙肝病毒，被医学界视为治疗丙肝的突破性药物。有关物质是在药物合成生产过程中带入的起始物料、中间体、副反应产物和降解杂质等，其影响着药物的产品质量，甚至还会造成严重的不良反应。有关物质的检测方法的开发是药品质量研究中的重要部分，能够提高药物安全性、有效性与质量可控性。采用现有索非布韦有关物质的检测方法对原料破坏样品中的有关物质进行分析，发现一些风险杂质被包含在主峰中，有关物质并不能得到有效分离，现有检测方法并不能真实反映药品的质量。因此，研发一种能够检测索非布韦中有关物质的分析方法，尽可能多的检测出其含有的杂质，对于提高索非布韦制剂产品的质量以及提高患者用药安全性具有十分重要的意义。
技术实现思路
针对上述技术问题，本专利技术提供一种索非布韦中有关物质的检测方法。为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案是：一种索非布韦中有关物质的检测方法，采用高效液相色谱法进行检测，色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；UV检测器，检测波长258-262nm；流动相A：磷酸二氢钾-四丁基溴化铵-水，流动相B为乙腈；洗脱方式为梯度洗脱，洗脱程序如下：0-4min，75％流动相A，25％流动相B；4-20min，75％→40％流动相A，25％→60％流动相B；20-28min，40％→30％流动相A，60％→70％流动相B。相对于现有技术，本专利技术提供的索非布韦中有关物质的检测方法，采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以磷酸二氢钾-四丁基溴化铵-水作为流动相A，以乙腈作为流动相B，通过高效液相色谱法以特定的梯度洗脱的方式，能够实现索非布韦中主成分与多个已知杂质、未知杂质的有效分离，准确定性及定量检测出索非布韦中多个已知杂质和未知杂质，且本专利技术提供的方法经专属性、灵敏度等方法学研究及验证，发现本专利技术的方法灵敏度、准确度、重现性较好，杂质的检测限和定量限低，能够实现对索非布韦中更多杂质的定性和定量检测，为提高和更好地控制索非布韦制剂产品的质量提供了可靠保障。本专利技术中有关物质是指在索非布韦的合成工艺中引入的或降解生成的杂质，其中，已知杂质包括杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质G、杂质H和杂质I，各已知杂质的结构式下表所示。优选的，流速为0.9-1.1mL/min，柱温30-40℃。更优选的，检测波长为260nm，流速为1.0mL/min，柱温为35℃。优选的，进样体积为10μL。优选的检测条件可使索非布韦中的主成分、未知杂质以及已知杂质之间达到更高的分离度，可以保证多种杂质的有效检出，从而实现对索非布韦中有关物质的定量检测。优选的，所述流动相A中磷酸二氢钾的浓度为9-11mmol/L，四丁基溴化铵的浓度为0.9-1.1mmol/L。更优选的，所述流动相A中磷酸二氢钾的浓度为10mmol/L，四丁基溴化铵的浓度为1.0mmol/L。优选的，所述梯度洗脱的程序为：0-4min，75％流动相A，25％流动相B；4-20min，75％→40％流动相A，25％→60％流动相B；20-28min，40％→30％流动相A，60％→70％流动相B；28-28.01min，30％→75％流动相A，70％→25％流动相B；28.01-35min，75％流动相A，25％流动相B。优选的流动相配合优选的梯度洗脱，在不产生基线干扰的前提下，能够更好地检测出索非布韦中的杂质，有利于有关物质的检出，并且有效改善峰形，使检测结果的准确度及精密度更高。优选的，所述色谱柱的规格为250*4.6mm，填料直径为5μm。更优选的，所述色谱柱为HypersilBDSC18，4.6*250mm，5μm。优选的色谱柱规格可以使各组分峰形、分离度及检测的灵敏度俱佳，且基线干扰较小，从而有利于索非布韦与杂质有效分离，且结果准确可靠，重复性好。优选的，所述供试品溶液的浓度为1.0mg/mL。优选的供试品浓度有利于使主成分及杂质的峰形更好，柱效高，积分更准确，从而有利于对供试品中杂质的含量进行更准确的计算。本专利技术提供的检测方法，能够实现索非布韦中的7种已知杂质、多个未知杂质和主成分之间的有效分离，准确定性及定量检测索非布韦中杂质情况，检出的杂质种类、数量均高于现有方法。附图说明图1为实施例2中2.1专属性项下系统适用性溶液的色谱图；图2为实施例2中2.1专属性项下自身对照溶液的色谱图；图3为实施例2中2.1专属性项下杂质A定位溶液的色谱图；图4为实施例2中2.1专属性项下杂质B定位溶液的色谱图；图5为实施例2中2.1专属性项下杂质C定位溶液的色谱图；图6为实施例2中2.1专属性项下杂质D定位溶液的色谱图；图7为实施例2中2.1专属性项下杂质G定位溶液的色谱图；图8为实施例2中2.1专属性项下杂质H定位溶液的色谱图；图9为为实施例2中2.1专属性项下杂质I定位溶液的色谱图；图10为实施例2中2.2强制降解试验项下酸破坏的供试品溶液的色谱图；图11为实施例2中2.2强制降解试验项下高温破坏的供试品溶液的色谱图；图12为实施例2中2.2强制降解试验项下光照破坏的供试品溶液的色谱图；图13为实施例2中2.2强制降解试验项下碱破坏的供试品溶液的色谱图；图14为实施例2中2.2强制降解试验项下高湿破坏的供试品溶液的色谱图；图15为实施例2中2.2强制降解试验项下氧化破坏的供试品溶液的色谱图；图16为实施例2中2.2强制降解试验项下未破坏的供试品溶液的色谱图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1材料与方法：仪器：高效液相色谱仪，紫外检测器，量瓶，电子天平。试剂：乙腈、磷酸二氢钾、四丁基溴化铵、索非布韦对照品(石家庄凯瑞德医药科技发展有本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种索非布韦中有关物质的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行检测，色谱条件为：/n色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；/nUV检测器，检测波长258-262nm；/n流动相A：磷酸二氢钾-四丁基溴化铵-水，流动相B为乙腈；/n洗脱方式为梯度洗脱，洗脱程序如下：/n0-4min，75％流动相A，25％流动相B；/n4-20min，75％→40％流动相A，25％→60％流动相B；/n20-28min，40％→30％流动相A，60％→70％流动相B。/n

【技术特征摘要】
1.一种索非布韦中有关物质的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行检测，色谱条件为：
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；
UV检测器，检测波长258-262nm；
流动相A：磷酸二氢钾-四丁基溴化铵-水，流动相B为乙腈；
洗脱方式为梯度洗脱，洗脱程序如下：
0-4min，75％流动相A，25％流动相B；
4-20min，75％→40％流动相A，25％→60％流动相B；
20-28min，40％→30％流动相A，60％→70％流动相B。


2.如权利要求1所述索非布韦中有关物质的检测方法，其特征在于，流速为0.9-1.1mL/min，柱温30-40℃。


3.如权利要求2所述的索非布韦中有关物质的检测方法，其特征在于，检测波长为260nm，流速为1.0mL/min，柱温为35℃。


4.如权利要求1所述索非布韦中有关物质的检测方法，其特征在于，进样体积为10μL。


5.如权利要求1所述的索非布韦中有关物质的检测方法，其特征在于，所述流动相A中磷酸二氢钾的浓度为9-11mmol/L，四丁基溴化铵的浓度为0.9-1.1mmol/L...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏佳，寇国通，冯珠群，李文博，曲永战，
申请(专利权)人：石家庄凯瑞德医药科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：河北;13