一种肝素钠封管注射液分子量与分子量分布的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种肝素钠封管注射液的分子量与分子量分布的检测方法，属于医学制剂检测技术领域。所述检测方法为分子排阻色谱法，色谱条件为：固定相是以亲水改性键合硅胶为填料的色谱柱；流动相为醋酸盐缓冲溶液；流动相流速为每分钟0.5～2.0mL；柱温为20～35℃；检测器为示差折光检测器或者蒸发光检测器。利用本发明专利技术的方法，可以有效地对低浓度的肝素钠封管注射液的分子量与分子量分布进行测定，分析结果重现性良好，为肝素钠封管注射液的质量控制进一步增加了有效的检测方法。进一步增加了有效的检测方法。进一步增加了有效的检测方法。

【技术实现步骤摘要】
一种肝素钠封管注射液分子量与分子量分布的检测方法


[0001]本专利技术属于医学制剂检测
，具体地，涉及一种肝素钠封管注射液分子量与分子量分布的检测方法。

技术介绍

[0002]外周静脉留置针在静脉输液在临床的应用越来越广泛，它既减轻了对患者反复穿刺带来的痛苦，便于抢救，又可适当减轻护理人员的工作量，提高护士工作效率，但在应用过程中易出现套管堵塞，影响留置时间。目前临床使用的封管液主要是不同浓度肝素钠溶液和生理盐水。生理盐水不具有抗凝作用，但能维持细胞外液容量、渗透压与体内盐水平衡。肝素钠系自猪或牛的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属黏多糖类物质，具有延长血凝时间的作用。由于肝素钠具有带强负电荷的理化特性，能干扰血凝过程的许多环节，在体内外都有抗凝血作用。
[0003]肝素钠为黏多糖类物质，其分子量有五糖、六糖、糖醛酸和氨基糖经过不同位置相接形成的线性链状高分子结构，分子量在3000到30000Da范围。在2008年，美国Hospira制药公司以及Baxter制药厂推出了肝素钠封管注射液(Heparin lock flush solution)，制剂规格分别为5ml：500单位、5ml：50单位。其中5ml：50单位的规格专用于婴儿。
[0004]目前中国药典、美国药典和欧洲药典均收载该产品用于临床抗凝血剂。临床药理表明其生理活性与其副作用跟其链状结构有关系，即与使用的肝素钠平均分子量存在直接联系。为保证临床用药的安全性和有效性，对其分子量分布范围监控显得尤其重要。
[0005]中国专利申请201310111864.6提供了肝素钠封管注射液的质量检测方法，专利中主要针对有关物质的检测方法进行了研究，对于可能影响临床用药安全和有效的分子量分布没有进行研究。中国药典中虽然收载有肝素钠注射液的分子量与分子量分布的研究，但由于其注射液浓度很高因此不适合于肝素钠封管注射液的分子量分布的检测。

技术实现思路

[0006]为了克服现有技术存在的缺陷，实现对肝素钠封管注射液分子量与分子量分布的检测，本专利技术采用如下技术方案实现本专利技术目的：
[0007]本专利技术提供一种分子排阻色谱检测肝素钠封管注射液中分子量与分子量分布的方法，采用色谱条件为：固定相是以亲水改性键合硅胶为填料的色谱柱；流动相为醋酸盐缓冲溶液；流动相流速为每分钟0.5～2.0mL；柱温为20～35℃；检测器为示差折光检测器或者蒸发光检测器。
[0008]在本专利技术的一些实施方案中，待检测肝素钠封管注射液的上样量为20～100μL，肝素钠上样的总量不低于56μg。例如，如果待检测肝素钠封管注射液的上样量为20～100μL，若肝素钠上样的总量不低于56μg，则可以直接进样。对于肝素钠浓度相对较低(如肝素钠浓度为1mg/mL)的待检测肝素钠封管注射液，可以采用较高的进样量，如60～100μL。对于若采用最高进样量100μL，肝素钠上样的总量仍低于0.5656μg，需对待检测肝素钠封管注射液进
行浓缩并利用流动相进行复溶。在本专利技术的一些具体实施方案中，浓缩复溶的方法为：取待检测封管注射液置于烧杯中，水浴蒸干，加入流动相进行溶解即可。
[0009]在本专利技术的一些实施方案中，所述色谱柱采用刚性的球型硅胶为基质，在其表面通过共价键化学键合亲水基团而成。进一步地，使用不同孔径的色谱柱串联。在本专利技术的一些具体实施方案中，采用肝素钠原料药典标准中的TSK4000SW
xl
和TSK3000SW
xl
串联。
[0010]以亲水改性键合硅胶为填料的色谱柱适宜采用水相流动相进行洗脱，尝试不同水相做为流动相，最终选择醋酸盐缓冲液作为流动相。该种流动相能够保证肝素钠出峰更加稳定，峰形对称性更加优异。
[0011]在本专利技术的一些实施方案中，本专利技术采用的流动相为醋酸铵，醋酸铵的溶解度更大，对于色谱柱的损坏更小。进一步地，浓度选择0.1mol/L，避免了浓度过小造成缓冲能力不足，浓度过大对于色谱柱和色谱仪造成损坏。
[0012]在本专利技术中，流动相的流速设定采用一般技术人员公知的常识，常见的范围一般为每分钟0.5～2mL，为了避免肝素峰和氯化钠峰出现分离问题，本专利技术优选流速为每分钟0.5～0.9mL。更优选每分钟0.6mL。
[0013]在本专利技术中，检测器采用常规分子量与分子量分布测定方法进行选择，同时参考了药典中使用的检测器类型，本专利技术最终选择示差折光检测器。同时为了保证示差折光检测器的稳定性，最终选择检测器的温度为35℃。
[0014]在本专利技术中，柱温是根据常规的色谱柱使用温度，以及方便温度控制的原则，本专利技术柱温优选30℃。
[0015]本专利技术的有益效果
[0016]由于肝素钠封管注射液(5ml:50单位)用于儿科患者中，本专利技术的方法对于其在临床使用中安全性提供了科学有效的检测方法和控制手段。
[0017]本专利技术的方法能够有效的减少在儿科用药中出现使用高浓度的肝素钠注射液用0.9％氯化钠注射液稀释后封管的方法，减少配制过程中的浪费和不安全因素。
[0018]本专利技术的方法填补了肝素钠封管注射液质量控制对于分子量与分子量分布控制的空白，提供了一种有效的耐用的检测方法对肝素钠封管注射液的安全性和有效性进行控制。
[0019]本专利技术的方法耐用性好，容易实现，采用的仪器设备及试剂和样品的处理方式均是常规用品，试验参数也是常规参数，无苛刻条件，成本低，大多数实验室的条件均能满足要求。
附图说明
[0020]图1示出了本专利技术实施例1空白溶液图谱。
[0021]图2示出了本专利技术实施例1氯化钠定位溶液。
[0022]图3示出了本专利技术实施例1统适用性图谱。
[0023]图4示出了本专利技术实施例1标准品溶液图谱。
[0024]图5示出了本专利技术实施例1供试溶液图谱。
具体实施方式
[0025]除非另有说明、从上下文暗示或属于现有技术的惯例，否则本申请中所有的份数和百分比都基于重量，且所用的测试和表征方法都是与本申请的提交日期同步的。在适用的情况下，本申请中涉及的任何专利、专利申请或公开的内容全部结合于此作为参考，且其等价的同族专利也引入作为参考，特别这些文献所披露的关于本领域中的合成技术、产物和加工设计、聚合物、共聚单体、引发剂或催化剂等的定义。如果现有技术中披露的具体术语的定义与本申请中提供的任何定义不一致，则以本申请中提供的术语定义为准。
[0026]本申请中的数字范围是近似值，因此除非另有说明，否则其可包括范围以外的数值。数值范围包括以1个单位增加的从下限值到上限值的所有数值，条件是在任意较低值与任意较高值之间存在至少2个单位的间隔。例如，如果记载组分、物理或其它性质(如分子量，熔体指数等)是100至1000，意味着明确列举了所有的单个数值，例如100，101，102等，以及所有的子范围，例如100到166，155到170，198到200等。对于包含小于1的数值或者包含大于1的分数(例如1.1，1.5本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分子排阻色谱检测肝素钠封管注射液中分子量与分子量分布的方法，其特征在于，采用色谱条件为：固定相是以亲水改性键合硅胶为填料的色谱柱；流动相为醋酸盐缓冲溶液；流动相流速为每分钟0.5～2.0mL；柱温为20～35℃；检测器为示差折光检测器或者蒸发光检测器。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，待检测肝素钠封管注射液的上样量为20~100μL，肝素钠上样的总量不低于56μg。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱采用刚性的球型硅胶为基质，在其表面通过共价键化学键合亲水基团...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈成刚，魏佳，李文博，曲永站，孙雪梅，仲建平，
申请(专利权)人：石家庄凯瑞德医药科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：