一种高效液相色谱法制备高纯度重组表皮生长因子的工艺制造技术

本发明专利技术涉及一种高效液相色谱法制备高纯度重组表皮生长因子的工艺，属于生物医药技术领域。本发明专利技术高效液相色谱法制备高纯度重组表皮生长因子的工艺包括如下步骤：S1、粗纯处理：将重组表皮生长因子的发酵液加入到疏水高效液相色谱柱进行吸附和洗脱，收集洗脱液即为粗纯产物；S2、精纯处理：将粗纯产物加入到弱阴离子高效液相色谱柱中进行吸附和洗脱，收集洗脱液即为高纯度重组表皮生长因子；本发明专利技术采用两步高效液相色谱柱处理的方法对重组表皮生长因子进行精纯处理，可有效去除重组表皮生长因子发酵液中的各种杂质，得到高比活性、高纯度的表皮生长因子。

【技术实现步骤摘要】
一种高效液相色谱法制备高纯度重组表皮生长因子的工艺
本专利技术属于生物医药
，涉及一种高效液相色谱法制备高纯度重组表皮生长因子的工艺。
技术介绍
表皮生长因子(EpidermalGrowthFactor，简称EGF)是广泛存在于哺乳动物体内的一类多肽物质，人表皮生长因子(hEGF)最早在1974年从人尿中提纯。hEGF是由53个氨基酸组成的小分子多肤组成，分子量约为6000道尔顿，等电点约为4.6，分子内有三对二硫键，因而对酸、碱、热等理化因素均较稳定。hEGF是一种多功能细胞生长因子，具有广泛的生物学效应，通过与细胞膜上hEGF受体结合发挥生理作用。研究表明：表皮细胞、成纤维细胞、内皮细胞以及平滑肌细胞等多种细胞的细胞膜上都含有hEGF受体，其中表皮细胞含量最高。hEGF接近细胞后与细胞膜上的hEGEF受体结合，促使细胞内部发生一系列复杂的生化级联反应，使得RNA、DNA和蛋白质合成增加，最终促进细胞生长繁殖、加速细胞新陈代谢。hEGF在医学上己用于烧烫伤、溃疡、各类创伤以及角膜损伤等的治疗。EGF还能促进正常表皮细胞的新陈代谢本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高效液相色谱法制备高纯度重组表皮生长因子的工艺，其特征在于，包括如下步骤：/nS1、粗纯处理：将重组表皮生长因子的发酵液加入到疏水高效液相色谱柱进行吸附和洗脱，收集洗脱液即为粗纯产物；/nS2、精纯处理：将粗纯产物加入到弱阴离子高效液相色谱柱中进行吸附和洗脱，收集洗脱液即为高纯度重组表皮生长因子。/n

【技术特征摘要】
1.一种高效液相色谱法制备高纯度重组表皮生长因子的工艺，其特征在于，包括如下步骤：
S1、粗纯处理：将重组表皮生长因子的发酵液加入到疏水高效液相色谱柱进行吸附和洗脱，收集洗脱液即为粗纯产物；
S2、精纯处理：将粗纯产物加入到弱阴离子高效液相色谱柱中进行吸附和洗脱，收集洗脱液即为高纯度重组表皮生长因子。


2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法制备高纯度重组表皮生长因子的工艺，其特征在于，步骤S1所述重组表皮生长因子的发酵液采用大肠杆菌分泌表达，并添加异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导分泌表皮生长因子至胞外发酵液中。


3.根据权利要求1所述的高效液相色谱法制备高纯度重组表皮生长因子的工艺，其特征在于，步骤S1所述疏水高效液相色谱柱的填料以硅胶为基质，表面键合疏水性基团，所述疏水性基团为苯基基团。


4.根据权利要求3所述的高效液相色谱法制备高纯度重组表皮生长因子的工艺，其特征在于，所述疏水高效液相色谱柱的填料的颗粒度为4～6μm。


5.根据权利要求1所述的高效液相色谱法制备高纯度重组表皮生长因子...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱文瑾，李浛民，陈平，李浛君，
申请(专利权)人：宁波博睿瀚达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33