用于充气微泡的冻干制剂制造技术

包含磷脂和聚乙二醇的冻干粉末组合物，所述聚乙二醇的折叠聚合物链百分比高于预定限度。所述组合物适于制备充气微泡。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于充气微泡的冻干制剂
本专利技术涉及制备用于超声造影成像的充气微泡制剂。
技术介绍
近年来造影剂的迅速发展产生了许多不同的组合物和制剂，它们可用于人体或动物器官和组织的造影增强成像和治疗中。一类特别适用于造影增强超声成像(“CEUS”成像)的造影剂包括在含水介质中分散的纳米和/或微米尺寸气泡的悬浮液。所述气体通常被夹带或包封在膜层中，所述膜层包括例如乳化剂、油、增稠剂或糖。这些稳定的气泡(分散在合适的生理溶液中)在本领域中通常用各种术语称呼，这通常取决于用于其制备的稳定材料,这些术语包括例如“微球”、“微气泡”、“微胶囊”或“微气球”，但在本文中其统称为“充气微泡”(或“微泡”)。超声造影剂(“USCA”)按各种制造方法来生产。其中一种方法，例如参见WO94/09829(i),需要在有机溶剂中溶解成膜组分(如磷脂和/或脂肪酸)的混合物和亲水性稳定化合物(如聚乙二醇)；将由此得到的混合物填充到小瓶中经冷冻干燥(冻干)。然后将底部含有固态冻干固体残余物(干饼)的小瓶装满合适的气体(如氟化气体)，最终密封储存。在使用前，通过向小瓶中注入合适的液体(如生理盐水)并摇动小瓶溶解固体残留物，可轻松制备微泡的含水悬浮液。可按上述方法制备的可商购USCA有购自Bracco的(或美国的)。目前本申请人已观察到，在制备冻干“干饼”中采用的聚乙二醇的性能变化可能对冻干粉末重组获得的充气微泡数产生负面影响。具体地，本申请人观察到，不同批次的商购PEG4000(即使来自同一制造商)在聚合物材料中可能具有不同数量的折叠聚合物链。如本申请人所观察到的，如果聚合物材料中所述折叠链的百分比太低，可能会导致太多数量的小瓶无法通过生产批次中的可接受性测试。由于工业规模下一个生产批次可能包含几千个小瓶，此时即使废弃相对少量的小瓶也是非常不可取的。基于以上观察，本申请人确定，用于制备充气微泡的冻干粉末制剂中使用的聚乙二醇应具有高于预定值的折叠聚合物链百分比。
技术实现思路
本专利技术的一方面涉及用于制备充气微泡的冻干粉末组合物，所述组合物包含磷脂和聚乙二醇，其中所述聚乙二醇的折叠聚合物链百分比大于34％，优选大于35％。所述折叠链的百分比优选为至少40％，更优选为至少42％，甚至更优选为至少44％。在一个特别优选的实施方案中，所述折叠链的百分比为至少48％。在一个优选的实施方案中，所述聚乙二醇的平均分子量(或数均分子量，Mn)为至少4000g/mol(或道尔顿，Da)，更优选为至少4025g/mol和甚至更优选为至少4050g/mol。在另一个优选的实施方案中，所述磷脂为DSPC、DPPG-Na或(优选为)它们的混合物。所述组合物优选还包含脂肪酸，优选为棕榈酸。在本专利技术的另一方面，本专利技术涉及包含与生理上可接受气体接触的上述组合物的密封小瓶。所述气体优选为氟化气，更优选为六氟化硫。按照另一方面，本专利技术涉及通过在气体的存在下将所述冻干粉末组合物分散于生理上可接受液体(优选为0.9％w/v的NaCl溶液)而获得的充气微泡悬浮液。按照另一方面，本专利技术涉及包含磷脂、聚乙二醇和任选的脂肪酸的冻干组合物的制备方法，所述方法包括：在溶剂中溶解所述磷脂、任选的脂肪酸和聚乙二醇；冷冻所述溶液，和通过冻干脱除所述溶剂；其中所述聚乙二醇的折叠聚合物链的百分比为40％或更高。按照另一方面，本专利技术涉及一种超声成像方法，包括：向患者施用有效量的上述充气微泡的悬浮液；向所述患者的身体部位发送超声信号；从所述身体部位收集回声信号。附图说明图1给出了“光滑”冻干饼(1a)和“粗糙”冻干饼(1b)的实例；图2的图线描述了折叠聚合物链百分比与每生产批次的不合格小瓶数之间的关系；图3给出了聚乙二醇样品第二个加热循环的描述性MDSC温谱图。具体实施方式(或)是储存在隔膜小瓶中的无菌、无热原冻干粉末制剂。所述冻干粉末含有聚乙二醇4000(PEG4000，24.56mg)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC，0.19mg)、二棕榈酰磷脂酰甘油钠(DPPG-Na,0.19mg)和棕榈酸(0.04mg)。每个小瓶的顶部空间用六氟化硫(SF6)填充。用5mL无菌生理盐水重组后，SonoVue/Lumason成为一种乳白色的均质悬浮液,其中包含填充有六氟化硫的微泡(也称为“微球”或“微气泡”)。按上述专利申请WO94/09829中描述的过程可以制备冻干粉末。通常，该方法需要在合适的溶剂(如二氧杂环乙烷、环己醇、2-甲基-2-丁醇、四氯二氟乙烷或叔丁醇)中以基本对应于其在最终冻干产品中的相应重量比溶解PEG4000、磷脂和棕榈酸。例如，所述溶液可以包含22-28重量份的聚乙二醇、0.15-0.25重量份的DSPC、0.15-0.25重量份的DPPG-Na和0.02-0.06重量份的棕榈酸。然后将所得溶液装入玻璃瓶中,所述玻璃瓶被迅速冷冻(例如在-45℃下)和然后送至冻干过程。工业规模下，每个生产批次通常包括几千个小瓶。冷冻干燥步骤结束时，装有冻干残余物(呈固体饼状)的小瓶的上部空间用SF6气体饱和，和小瓶用橡胶塞密封。这样获得的小瓶可保存至少两年。但正如本申请人所观察到的，使用折叠链含量低于预定限度的PEG，可能会对生产批次的小瓶中冻干饼的质量产生负面影响。例如，如Ginés等人2所述，聚乙二醇(PEG)是半结晶的亲水性聚合物，取决于其合成和热历程，其在固态时含有不同比例的非晶态和有序结晶相。在结晶区，聚合物链以延伸链和折叠链两种形式存在，特别是分子量约4000-6000g/mol的PEG中。如Ginés等人所观察到的，相比于使熔融样品在冰浴中或浸在液氮中淬冷，使相同熔融样品在室温下冷却时，PEG4000中的折叠链含量通常更高。如本申请人所观察到的，对于具有相同标称分子量(即4000g/mol)的材料，即使来自同一制造商，制备充气微泡的制剂中用作稳定化合物的PEG材料(通常为PEG4000)的折叠链含量也可能由于不种工业批次而明显不同。本申请人目前意外地发现，如果使用折叠聚合物链百分比过低的PEG，可能会对使用这种PEG制造的批次小瓶中包含的冻干饼的质量产生负面影响。具体地，如果PEG中折叠聚合物链的百分比低于预定限度，则该批次中不合格小瓶(即冻干饼不符合预定规格的小瓶)数将变得过高。在确定冻干饼质量的各种标准中，一个重要的标准是所述干饼的物理性质。具体地，本申请人已确认干饼的物理性质与该干饼利用生理上可接受液体重组产生的充气微泡悬浮液质量间有相对好的相关性。正如本申请人所观察到的，具有相对光滑表面外观(例如参见图1a)的干饼通常在重组时提供更较多微泡，而那些具有相对粗糙表面外观的干饼(例如参见图1b)在重组时形成明显较少微泡。另外，正如本申请人所观察到的，具有相对光滑表面的干饼形成的微泡悬浮液具有更高的MVC(微泡体积浓度，即每mL悬浮液重组微泡中所含气体总量)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于制备充气微泡的冻干粉末组合物，所述组合物包含磷脂和聚乙二醇，其中所述聚乙二醇的折叠聚合物链百分比大于34％。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180706 US 16/028,536;20190129 US 16/260,8941.用于制备充气微泡的冻干粉末组合物，所述组合物包含磷脂和聚乙二醇，其中所述聚乙二醇的折叠聚合物链百分比大于34％。


2.权利要求1的组合物，其中所述折叠链的百分比为至少40％。


3.权利要求1的组合物，其中所述折叠链的百分比为至少42％。


4.权利要求1、2或3的组合物，其中所述聚乙二醇为数均分子量(Mn)为至少4000g/mol的PEG4000。


5.权利要求4的组合物，其中所述Mn为至少4025g/mol。


6.权利要求1-5任一项的组合物，其中所述磷脂为DSPC、DPPG-Na或它们的混合物。


7.权利要求1-6任一项的组合物，其中所述组合物还包含脂肪酸。


8.权利要求7的组合物，其中所述脂肪酸为棕榈酸。


9.权利要求8的组合物，包含2...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·拉苏斯，S·格戈拉特，闫锋，C·圭罗特，J·布罗绍特，
申请(专利权)人：博莱科瑞士股份有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH