免疫调节特异性嵌合抗原受体细胞及制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种免疫调节特异性嵌合抗原受体细胞及制备方法和应用。本发明专利技术通过免疫检查点调节（PD1或TIGIT）联合特异性靶向人NKG2DL的嵌合抗原受体的重组载体，并用其修饰免疫应答细胞的方法；获得的新型功能化免疫应答细胞能有效地靶向攻击多种肿瘤，及制备的用于治疗恶性肿瘤的制剂。本发明专利技术的免疫检查点调节（PD1或TIGIT）联合特异性靶向人NKG2DL的嵌合抗原受体修饰的工程免疫细胞，遏制抑制因子诱导免疫细胞的失活，并阻止肿瘤细胞的免疫逃逸，能够明显提高抗肿瘤活性。

【技术实现步骤摘要】
免疫调节特异性嵌合抗原受体细胞及制备方法和应用
本专利技术属于免疫治疗生物医药
，涉及一种免疫检查点调节联合特异性靶向人NKG2DL的嵌合抗原受体的氨基酸编码序列、及其修饰的免疫应答细胞，以及它们的制备方法和在药物制备中的应用。
技术介绍
随着生物技术的飞速发展，免疫细胞治疗已成为癌症治疗领域的第四大疗法。癌症免疫疗法主要包括过继性细胞治疗、免疫调节剂、肿瘤疫苗以及免疫结合点阻断治疗等。其中，在细胞治疗领域，CAR-T疗法无疑已成为研究机构和制药公司争相“追捧”的明星。CAR-T(ChimericAntigenReceptorT-Cell，嵌合抗原受体修饰的T细胞)为代表的免疫疗法，其原理主要是通过基因工程手段对病人自身提取的T细胞进行嵌合抗原受体的修饰形成CAR-T细胞，该T细胞能特异性地识别肿瘤表面相关抗原(肿瘤细胞标志物)，从而靶向杀伤肿瘤。近年研究表明，NKG2DL蛋白的表达是细胞处于“应激状态”的一个指标，其在健康组织中很少有表达或仅短暂地表达，而通常在不同来源的各种肿瘤细胞表面有较高水平的表达。NKG2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.人免疫检查点调节联合特异性靶向人NKG2DL的嵌合抗原受体，其特征在于：/n所述的嵌合抗原受体包括：/n靶向人NKG2DL蛋白的胞外识别结构域氨基酸序列：SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ IDNo.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6或SEQ ID No.7所示的靶向结合人NKG2DL蛋白的人NKG2D的氨基酸序列；或与上述氨基酸序列具有80~99％同源性的经过氨基酸修饰产生的变体；/n免疫检查点调节PD1的氨基酸序列为：SEQ ID No.16、SEQ ID No.17或SEQ ID No.18所示的结合PD-L1分子的免疫检查点PD1氨基酸序列；或与...

【技术特征摘要】
1.人免疫检查点调节联合特异性靶向人NKG2DL的嵌合抗原受体，其特征在于：
所述的嵌合抗原受体包括：
靶向人NKG2DL蛋白的胞外识别结构域氨基酸序列：SEQIDNo.2、SEQIDNo.3、SEQIDNo.4、SEQIDNo.5、SEQIDNo.6或SEQIDNo.7所示的靶向结合人NKG2DL蛋白的人NKG2D的氨基酸序列；或与上述氨基酸序列具有80~99％同源性的经过氨基酸修饰产生的变体；
免疫检查点调节PD1的氨基酸序列为：SEQIDNo.16、SEQIDNo.17或SEQIDNo.18所示的结合PD-L1分子的免疫检查点PD1氨基酸序列；或与上述氨基酸序列具有80~99％同源性的经过氨基酸修饰产生的变体；
或免疫检查点调节TIGIT的氨基酸序列为：SEQIDNo.19、SEQIDNo.20或SEQIDNo.21所示的结合CD155分子的免疫检查点TIGIT氨基酸序列；或与上述氨基酸序列具有80~99％同源性的经过氨基酸修饰产生的变体。


2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于：所述的嵌合抗原受体的氨基酸序列为：
从氨基端到羧基端顺次连接的引导序列的氨基酸序列、靶向结合人NKG2DL蛋白的胞外识别结构域氨基酸序列、铰链区氨基酸序列、跨膜结构域氨基酸序列、胞内信号结构域氨基酸序列和免疫检查点调节PD1或TIGIT组件的氨基酸序列；
所述跨膜结构域包含CD8跨膜结构区、或CD28跨膜结构区、或4-1BB跨膜结构区、或OX40跨膜结构区、或ICOS跨膜结构区；
其中所述胞内信号结构域包括免疫受体酪氨酸活化基序和共刺激信号域；
所述免疫受体酪氨酸活化基序包含CD3ζ链的胞内信号结构域或FcεRIγ胞内信号结构；
所述共刺激信号域包含CD28胞内信号结构域、4-1BB胞内信号结构域、OX4...

【专利技术属性】
技术研发人员：代红久，徐慧，李晓宇，朱靓婧，
申请(专利权)人：南京凯地生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32