一种狂犬病毒表面的亚单位融合蛋白tG及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种狂犬病毒表面的亚单位融合蛋白tG及其制备方法和应用，所述制备方法包括：1)将如SEQ ID NO.4所示的基因序列克隆到真核表达载体中，得到含有融合蛋白tG编码基因的重组质粒；2)再将含有融合蛋白tG编码基因的重组质粒转染至表达细胞中；3)通过培养、筛选、驯化步骤2)中所述表达细胞，得到高度表达的细胞株；4)发酵培养步骤3)中所述细胞株，纯化后，得到亚单位融合蛋白tG。本发明专利技术能够在大量可溶性表达tG，蛋白稳定，克服了现有技术中狂犬病毒表面G蛋白不能大规模表达等诸多问题，且制备方法简单、成本低。

【技术实现步骤摘要】
一种狂犬病毒表面的亚单位融合蛋白tG及其制备方法和应用
本专利技术属于生物制品重组蛋白表达纯化
，涉及一种狂犬病毒表面的亚单位融合蛋白tG及其制备方法和应用。
技术介绍
狂犬病是由狂犬病毒(Rabiesvirus，RV)引起的一种人兽共患传染病，死亡率高达100％。临床表现为恐水、畏光、狂躁等症状。犬是狂犬病的主要宿主和传染源。狂犬病呈世界性分布。全球每年大约因狂犬病导致的死亡人数为4-7万人，但每年狂犬病的发生大多数在发展中国家，其中98％在亚洲。我国是仅次于印度年狂犬病发生率全球第二高的国家。狂犬病已成为危我国公共卫生安全的重要疫病。狂犬病毒属于弹状病毒科(Rhabdovirdae)狂犬病毒属(Lyssavirus)成员，病毒形态呈子弹状，其头部为半球形，末端较为平整，长约180nm，直径75nm。病毒颗粒是由外壳和核心两部分组成。其中外壳是由一个紧密而完整的脂蛋白双层包膜和一个纤突组成。纤突的主要成分是糖蛋白(glycoprotein，G)，简称G蛋白，呈同源三聚体形式，具有头和茎结构，是病毒唯一的糖基化蛋白，也是主要表面抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种狂犬病毒表面的亚单位融合蛋白tG，其特征在于，所述亚单位融合蛋白tG含有狂犬病毒表面囊膜蛋白G蛋白的胞外区及一段亮氨酸拉链肽；其中，所述狂犬病毒表面囊膜蛋白G的胞外区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；其中，所述亮氨酸拉链肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种狂犬病毒表面的亚单位融合蛋白tG，其特征在于，所述亚单位融合蛋白tG含有狂犬病毒表面囊膜蛋白G蛋白的胞外区及一段亮氨酸拉链肽；其中，所述狂犬病毒表面囊膜蛋白G的胞外区的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示；其中，所述亮氨酸拉链肽的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示。


2.根据权利要求1所述的亚单位融合蛋白tG，其特征在于，在狂犬病毒表面囊膜蛋白G蛋白和亮氨酸拉链肽之间还含有柔性连接肽。


3.根据权利要求2所述的亚单位融合蛋白tG，其特征在于，所述柔性连接肽的氨基酸序列为GGGGSGGGGS。


4.根据权利要求3所述的亚单位融合蛋白tG，其特征在于，所述亚单位融合蛋白tG的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。


5.根据权利要求4所述的亚单位融合蛋白tG，其特征在于，所述亚单位融合蛋白tG包括在如SEQIDNO.1所示中的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个氨基酸或几个氨基酸且具有免疫原性的衍生的蛋白质。


6.根据权利要求5所述的亚单位融合蛋白tG，其特征在于，在如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列的氨基末端或羧基末端连接有检测或纯化标签，其中，所述标签选自poly-Arg、poly-His、flag、c-myc、HA中的一种。


7.根据权利要求4～6任一所述的狂犬病毒...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱泓，吴有强，卞广林，张强，徐玉兰，吴素芳，车影，蔡灵芝，贾宝琴，屠莉洁，
申请(专利权)人：浙江海隆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33