一种重组的伪狂犬病病毒及其疫苗和构建方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种重组的伪狂犬病病毒及其疫苗和构建方法及应用，所述重组的伪狂犬病病毒的基因组含有密码子优化后的猪流行性腹泻病毒S蛋白基因，所述优化后的猪流行性腹泻病毒S蛋白基因的核苷酸序列A如SEQ NO.1所示。本发明专利技术的重组的伪狂犬病病毒免疫兔子，能够检测出S蛋白的IgG抗体和IgA抗体，不仅能产生IgG抗体而且能产生针对S蛋白的IgA抗体，为研制PRV

【技术实现步骤摘要】
一种重组的伪狂犬病病毒及其疫苗和构建方法及应用


[0001]本专利技术涉及生物技术和免疫学领域。具体而言，本专利技术涉及一种重组的伪狂犬病病毒及其疫苗和构建方法及应用。

技术介绍

[0002]猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea，PED)是猪的一种高度接触性肠道传染性疾病。临床以呕吐、腹泻和脱水为主要特征。该病对各种年龄阶段的猪均易感，尤其是7日龄以内的哺育仔猪，感染后死亡率可达100％。
[0003]猪流行性腹泻主要是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemicdiarrhea virus，PEDV)造成的，该病毒属于尼多病毒目(Nidovirales)、冠状病毒科(Coronaviridae)、冠状病毒属(Coronavirus)当中的冠状病毒I群成员，具有与冠状病毒科其它成员相似的病毒粒子形态。PEDV基因组核酸类型为线性、单股的正链RNA，全长约28,000nt，5'和3'端分别有帽子结构(cap)和Poly(A)尾。其编码的结构蛋白包括4种：纤突蛋白 (Spike,S)、膜蛋白(Membra本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组的伪狂犬病病毒，其特征在于，所述重组的伪狂犬病病毒的基因组含有密码子优化后的猪流行性腹泻病毒S蛋白基因，所述优化后的猪流行性腹泻病毒S蛋白基因的核苷酸序列A如SEQ NO.1所示。2.如权利要求1所述的重组的伪狂犬病病毒，其特征在于，所述核苷酸序列A为密码子优化后的猪流行性腹泻病毒来源的糖基化纤突蛋白S或其变体的核苷酸序列，所述变体是糖基化纤突蛋白S氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，且具有糖基化纤突蛋白S的功能。3.如权利要求1所述的重组的伪狂犬病病毒，其特征在于，所述核苷酸序列A与SEQ ID NO:1的同源性≥90％，优选地≥95％，更优选地≥98％。4.如权利要求1
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3任一项所述的重组的伪狂犬病病毒，其特征在于，所述重组的伪狂犬病病毒的基因组包含密码子优化后的猪流行性腹泻病毒来源的糖基化纤突蛋白S或其变体的核苷酸序列的表达框CMV
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A
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bGH，所述表达框CMV
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A
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bGH中，A为密码子优化后的猪流行性腹泻病毒来源的糖基化纤突蛋白S或其变体的核苷酸序列，CMV是CMV启动子，bGH是牛生长激素终止子。5.如权利要求4所述的重组的伪狂犬病病毒，其特征在于，所述密码子优化后的猪流行性腹泻病毒来源的糖基化纤突蛋白S或其变体的核苷酸序列的目标蛋白糖基化纤突蛋白S或其变体的3端加入His标签。6.一种如权利要求1
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5任一所述重组的伪狂犬病病毒的构建方法，其包含如下步骤：(1)将密码子优化后的猪流行性腹泻病毒S基因插入到pEE12.4
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kan上，得到pEE12.4
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S
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kan，其中，所述密码子优化后的猪流...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘小晓，钱泓，吴有强，张强，夏青，
申请(专利权)人：浙江海隆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：