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一种易分割的人鼠卵透明带融合蛋白及其制备方法和应用技术

技术编号:26884808 阅读:46 留言:0更新日期:2020-12-29 15:40
本发明专利技术提供了一种易分割的人鼠卵透明带融合蛋白及其制备方法和应用。所述易分割的人鼠卵透明带融合蛋白,由人类卵透明带肽段和小鼠卵透明带肽段通过带有切割位点的连接肽连接而成,得到兼有两个物种的卵透明带蛋白,可以表达产生人透明带和小鼠透明带的融合蛋白,可以一次性表达,用于同时制备抗人卵透明带和小鼠卵透明带的抗体,也可以通过特定的蛋白酶切割该融合蛋白的连接肽,分离出小鼠透明带肽段和人卵透明带肽段,分别制备纯人透明带蛋白或纯小鼠透明带蛋白。

【技术实现步骤摘要】
一种易分割的人鼠卵透明带融合蛋白及其制备方法和应用
本专利技术涉及基因工程
,更具体地,涉及一种易分割的人鼠卵透明带融合蛋白及其制备方法和应用。
技术介绍
透明带是卵细胞外的一层细胞外壳,在卵子发育和受精中有重要作用,是受精研究的重要靶标分子,是发展避孕疫苗的候选抗原。因此抗透明带抗体是受精和发育研究中的重要工具。但由于天然来源很有限,传统制备抗透明带抗体的方法受到很大的制约,现在制备抗体主要通过基因表达获得透明带抗原,由于透明带分子结构的特殊性,给透明带的制备带来一些实际困难,因此目前市场上的抗透明带抗体较昂贵。透明带是高度特异的蛋白质,既有组织特异性,分布于卵巢组织中,又有种族特异性,不同种动物的透明带有免疫特异性。因此要分别制备各自的抗体,然而目前抗体造价较高。由于人类透明带和小鼠透明带是当今实验研究使用很多的实验材料,不同物种间的卵透明带有明显的种族特异性。实际上,不同动物的研究在不同体系中进行,用于不同动物的抗透明带抗体在不同的研究体系不存在干扰现象,而实验研究中,往往不会几物种材料同时做实验,尤其是人源实验材料不会与其本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种易分割的人鼠卵透明带融合蛋白,其特征在于,由人类卵透明带蛋白成分和小鼠的透明带蛋白成分组成,两者之间通过带有切割位点的连接肽连接。/n

【技术特征摘要】
1.一种易分割的人鼠卵透明带融合蛋白,其特征在于,由人类卵透明带蛋白成分和小鼠的透明带蛋白成分组成,两者之间通过带有切割位点的连接肽连接。


2.根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,包含hZP323~231肽段和mZP2192~505肽段,两者通过短肽链DDDDK连接而成,其氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。


3.根据权利要求2所述的融合蛋白,其特征在于,编码SEQIDNO:1所示融合蛋白的融合基因的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示。


4.根据权利要求2所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白的C端连接有6×His标签肽。


5.权利要求1所述融合蛋白的制备方法,其特征在于,先构建体外表达所述融合蛋白的表达载体,再转化宿主菌,诱导表达产生融合蛋白。


6.权利要求2所述融合蛋白的制备方法,其特征在于,将pGEM-hZP3载体上的编码人ZP3的23~231肽段的DNA序列连接短...

【专利技术属性】
技术研发人员:曹佐武
申请(专利权)人:暨南大学
类型:发明
国别省市:广东;44

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