一种从酸橙幼果中提取新橙皮苷的方法技术

一种从酸橙幼果中提取新橙皮苷的方法，包括以下步骤：（1）破碎；（2）抗氧化提取；（3）浓缩与低温盐析；（4）过滤、热溶、澄清：过滤，收集沉淀；（5）保温脱盐与分子分离、脱色、浓缩；（6）热脱色；（7）盐辅助分步结晶；（8）脱盐与过滤；（9）干燥。本发明专利技术所得新橙皮苷的纯度可达99.21%，纯白色，1%水溶液425nm处吸光度≦0.2%，灰分≦0.3%；整个工艺过程仅使用水为溶剂，降低了生产成本，也提高了生产安全性和产品使用的安全性；本发明专利技术以干燥的酸橙幼果作为原料，保证了原料不易变质且含量相对稳定；不使用昂贵的提取分离设备，简化了生产操作，减少资金投入，缩短生产周期；制备方法简单，实用，周期短，适合工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种从酸橙幼果中提取新橙皮苷的方法
本专利技术涉及一种提取新橙皮苷的方法，具体涉及一种从酸橙中提取新橙皮苷的方法。
技术介绍
新橙皮苷主要存在于一些芸香科植物，如酸橙、甜橙、枳壳、枳实以及毛两面针等，尚存在于茜草科植物毛钩藤中，天然植物中的含量普遍较低。酸橙（学名：CitrusaurantiumL.）是芸香科柑橘属小乔木，枝叶密茂，刺多，原产于中国秦岭南坡以南各地，主要分布于中国长江流域及以南各省区。酸橙幼果是中药枳实的一个品种，与同样来自芸香科的其他枳实主要含有大量橙皮苷、柚皮苷等成分不同，其主要含有较高含量的新橙皮苷以及少量柚皮苷，是提取新橙皮苷的理想原料，一些酸橙幼果中新橙皮苷的含量可达16%。新橙皮苷（Neohesperidin）为白色针状晶体(由稀乙醇或稀醋酸重结晶)，是一种二氢黄酮类化合物，熔点236～237℃；易溶于热水，溶于热乙醇，不溶于乙醚；遇三氯化铁呈棕色；由镁及盐酸还原，呈红色；在碱溶液中通入二氧化碳，也不析出；加2%盐酸或硫酸进行水解时，产生橘皮素、葡萄糖、鼠李糖各1分子。CAS号：13241-33-3分子式：C28H34O15分子量：610.56结构式：EINECS号：236-216-9新橙皮苷具有化痰消积、破气除痞的功效，被广泛应用在胃肠类药物中；另具有清除自由基、促进胃动力、降血糖、降血脂、抗动脉粥样硬化、保护神经系统、抑制皮炎和抗过敏、抗癌、预防或治疗抑郁状态等活性，在医学方面有着广泛的用途。新橙皮苷也是一种重要的中间体，能在一定条件下转化为其衍生物-新橙皮苷二氢查耳酮，而此化合物是一种高甜度低热量甜味剂（甜度为蔗糖的1500~1800倍）、苦味抑制剂和风味调节剂，热稳定性好，应用pH范围广，在食品、饮料、制药和动物饲料行业广泛使用。目前国内对新橙皮苷的研究主要围绕新橙皮苷的理化性质、植物分布及含量、质量标准、提取分离、半合成、微生物转化工艺等方向展开，重点是研究新橙皮苷合成其衍生物-新橙皮苷二氢查耳酮。关于新橙皮苷的提取分离工艺，也有一定数量的相关技术进行了专利申请，但仍有其不足之处。现有公开植物来源的提取分离新橙皮苷的技术主要列述如下：CN201910192047.5公开了一种从枳壳中同时制备高纯度柚皮苷与新橙皮苷的方法。首先采用超临界CO2萃取技术提取枳壳中的挥发油，然后采用超临界CO2萃取技术提取柚皮苷和新橙皮粗提混合物。粗提混合物经大孔吸附树脂分离纯化后得到柚皮苷和新橙皮苷。该申请主要采用超临界CO2技术以及树脂分离工艺，但设备投入大，需要用到高压压力容器，操作风险较高，生产成本高；新橙皮苷为热水溶解物质，非脂溶性成分，用超临界技术的可行性有待进一步研究；通过树脂工艺难以将理化性质相似的新橙皮苷与柚皮苷分离。CN201811430330.9公开了一种醇/盐双水相体系制备柚子生理落果中新橙皮苷的方法，包括以下步骤：收集干燥柚子生理落果；破碎；粉碎；配制构建双水相体系；热浸渍提取；液液固三相碟片分离机分离分相；浓缩；水沉析晶、过滤；超滤膜辅助热水重结晶提纯；冷却析晶；干燥包装。该申请采用异丙醇/NaH2PO4无机盐双水相体系浸渍提取，超滤膜辅助热水重结晶提纯等工艺，但柚子生理落果中新橙皮苷的含量很低，生产成本极高，没有商业价值，目前无企业用此原料生产；异丙醇具有一定毒性，在提取行业的生产中很少用；异丙醇提取液中含有较多脂溶性杂质，通过水沉以及水重结晶能否完全去除，需要进一步研究；异丙醇与水互溶，最终产品中的溶剂残留仍然是重点。CN201611160032.3公开了一种从枳实中提取新橙皮苷及对枳实综合利用的方法。所述综合利用的方法包括：1)对枳实进行破碎，过筛；2)使用温度为55-60℃的水对过筛后的物质进行浸提，分别收集浸提液和滤渣；3)对所述滤渣进行提纯得到橙皮苷；和/或，对所述浸提液进行分离，得到果胶粉、柚皮苷、新橙皮苷中的一种或多种。本申请的论述较为简单，提取的物质也看似全面，但因不同植物来源的成分区别大，目前尚无任何一种原料中同时含有丰富的橙皮苷、新橙皮苷等多种有效成分，该方法需要进一步论证。CN201610567977.0公开了一种从枳实中分离高纯度橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷和辛弗林的方法，涉及一种中药有效成分的提取方法。依次包括以下步骤：（1）酶解、（2）提取、（3）膜分离、（4）辛弗林的分离、（5）柚皮苷的分离、（6）新橙皮苷的分离、（7）橙皮苷的分离。本申请的论述较为简单，提取的物质也看似全面，但因不同植物来源的成分区别大，目前尚无任何一种原料中同时含有丰富的橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷、辛弗林等多种有效成分，该方法需要进一步论证。CN201610539313.3公开了一种从枳实中提取高纯度新橙皮苷的方法，包括以下步骤：（1）将枳实原料粉碎后浸泡于水中，加入复合植物水解酶制剂进行酶解，得酶解枳实；（2）将酶解枳实加热浸提，冷却，离心，过滤，得枳实加酶浸提液；（3）将枳实加酶浸提液水浴保温，加入絮凝剂，絮凝处理，离心，过滤，得枳实絮凝液；（4）将枳实絮凝液纳滤、浓缩，真空干燥，得新橙皮苷粗品；（5）将新橙皮苷粗品用乙醇溶液充分溶解并严密过滤，然后重复进行冷却结晶和洗涤，真空干燥，得高纯度新橙皮苷产品。本申请的工艺简单，经酶解、絮凝、乙醇结晶等工艺即可制备高纯度新橙皮苷，但未有脱色步骤，而枳实化学成分复杂，最终产品的颜色仍然是一个关键指标。CN201510893207.0、CN201510892989.6、CN201510892977.3、CN201510893062.4以相同或基本相似的方法公开了一种从柑橘小果、皮中提取橙皮苷和新橙皮苷的方法，步骤：柑橘皮和枳实小果经干燥、粉碎，按2:1的比例混合、渗漉提取。药渣用碱液提取，酸调提取液、沉淀、洗涤，用70%乙醇溶解，重结晶后得到橙皮苷产品。取渗漉液过强酸性苯乙烯型阳离子柱层析、水洗、进大孔树脂；水洗、30%低碳醇洗涤、70%低碳醇洗涤，取洗脱液浓缩，用5.0%（NH4）2SO4/NaCl助析，得粗晶，再重结晶，得到新橙皮苷产品。该申请经大孔树脂梯度洗脱和结晶工艺即制备得到新橙皮苷，但原料化学成分复杂，此法所得新橙皮苷的纯度和颜色均难以达标，且梯度洗脱导致产品收率低，混杂在不同梯度中，增加了分离难度，显著提高了生产成本。CN201210045574.1公开了一种从胡柚白皮层分离纯化柚皮苷和新橙皮苷的方法，用大孔树脂和高速逆流色谱的联用技术，以胡柚白皮层烘干粉末为原料，先制备大孔树脂粗提物粉末；再通过高速逆流色谱进一步分离、纯化得到高纯度的柚皮苷和新橙皮苷。本申请的高速逆流色谱分离技术目前仅为实验技术，尚未在规模生产中应用，且生产成本高，设备投入高，该技术适用性极有限。CN201010557834.4公开了一种新橙皮苷的提纯方法。方法步骤是取干燥枳实原料粉碎，加10-15倍量水回流提取2-3次，提取液滤过加入大孔树脂柱吸附，水洗树脂柱至无糖色，再用4-6倍量50-70％乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液，加入超本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从酸橙幼果中提取新橙皮苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n（1）破碎：将干燥的酸橙幼果破碎成粗粉；/n（2）抗氧化提取：向粗粉中加入抗氧化保护剂，以自来水或纯化水为溶剂进行提取，得提取液；/n（3）浓缩与低温盐析：对提取液真空减压浓缩，得浓缩液；加入芒硝，搅拌溶解，冷藏，使沉淀充分析出；/n（4）过滤、热溶、澄清：过滤，收集沉淀；加入纯化水，加热搅拌溶解，过微滤膜系统并水洗微滤膜，得澄清透明的微滤膜滤液；/n（5）保温脱盐与分子分离、脱色、浓缩：将微滤膜滤液通过第一超滤膜并水洗超滤膜，收集膜下游液；再将膜下游液通过第二超滤膜并水洗超滤膜，收集膜上游液，得膜浓缩液；/n（6）热脱色：向膜浓缩液中加入粉末活性炭和抗氧化保护剂，搅拌脱色，过滤，得脱色液；/n（7）盐辅助分步结晶：将脱色液真空减压浓缩，加入芒硝，搅拌溶解，冷藏，使结晶充分析出，离心收集沉淀，得结晶1；离心所得清液继续真空减压浓缩，加入芒硝，搅拌溶解，冷藏，使结晶充分析出，离心收集沉淀，得结晶2；合并结晶1与结晶2，得新橙皮苷结晶；/n（8）脱盐与过滤：向所述新橙皮苷结晶中加常温纯化水，搅拌均匀，离心；用水洗涤离心沉淀，至流出液无味道止，得脱盐新橙皮苷；/n（9）干燥：将脱盐新橙皮苷干燥，得新橙皮苷。/n...

【技术特征摘要】
1.一种从酸橙幼果中提取新橙皮苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）破碎：将干燥的酸橙幼果破碎成粗粉；
（2）抗氧化提取：向粗粉中加入抗氧化保护剂，以自来水或纯化水为溶剂进行提取，得提取液；
（3）浓缩与低温盐析：对提取液真空减压浓缩，得浓缩液；加入芒硝，搅拌溶解，冷藏，使沉淀充分析出；
（4）过滤、热溶、澄清：过滤，收集沉淀；加入纯化水，加热搅拌溶解，过微滤膜系统并水洗微滤膜，得澄清透明的微滤膜滤液；
（5）保温脱盐与分子分离、脱色、浓缩：将微滤膜滤液通过第一超滤膜并水洗超滤膜，收集膜下游液；再将膜下游液通过第二超滤膜并水洗超滤膜，收集膜上游液，得膜浓缩液；
（6）热脱色：向膜浓缩液中加入粉末活性炭和抗氧化保护剂，搅拌脱色，过滤，得脱色液；
（7）盐辅助分步结晶：将脱色液真空减压浓缩，加入芒硝，搅拌溶解，冷藏，使结晶充分析出，离心收集沉淀，得结晶1；离心所得清液继续真空减压浓缩，加入芒硝，搅拌溶解，冷藏，使结晶充分析出，离心收集沉淀，得结晶2；合并结晶1与结晶2，得新橙皮苷结晶；
（8）脱盐与过滤：向所述新橙皮苷结晶中加常温纯化水，搅拌均匀，离心；用水洗涤离心沉淀，至流出液无味道止，得脱盐新橙皮苷；
（9）干燥：将脱盐新橙皮苷干燥，得新橙皮苷。


2.根据权利要求1所述的从酸橙幼果中提取新橙皮苷的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述干燥的酸橙幼果中，新橙皮苷的含量为8~16%；所述粗粉的粒径为3~8mm。


3.根据权利要求1或2所述的从酸橙幼果中提取新橙皮苷的方法，其特征在于，步骤（2）中，抗氧化提取采用提取罐提取；所述提取罐提取共进行3次提取，前两次提取完后过滤，滤渣进入下一次提取，第三次提取液作为下一批物料的提取溶剂，合并第一次、第二次提取液，得提取液；3次提取的时间分别为1.5~2.5、1.0~2.0、0.5~1.5h，水加入量分别为粗粉质量的8~10、7~9、6~8倍；提取罐提取的温度为50℃~90℃，混合方式为搅拌或空压反冲；提取罐提取的抗氧化保护剂总用量为粗粉的1.0%~4.0wt%，3次提取时的加入量之比为1...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘庚贵，黄华学，何安乐，黄俊，
申请(专利权)人：江西海富生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：江西;36