一种基因修饰的免疫细胞及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种基因修饰的免疫细胞及其制备方法和应用，所述免疫细胞表达嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体包括DAP10和信号传导结构域，所述信号传导结构域连接在所述DAP10的C端；所述DAP10为所述嵌合抗原受体的胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域；所述嵌合抗原受体还包括抗原结合结构域，所述抗原结合结构域连接在所述DAP10的N端。本发明专利技术的嵌合抗原受体对特异性肿瘤细胞和异质性肿瘤细胞均具有靶向作用，构建的表达嵌合抗原受体的免疫细胞在靶向表达特异性抗原的肿瘤细胞的同时，还调动内源NKG2D的功能，靶向具有异质性的肿瘤细胞，实现对特异性肿瘤细胞和异质性肿瘤细胞的清除杀伤作用。

【技术实现步骤摘要】
一种基因修饰的免疫细胞及其制备方法和应用
本专利技术属于细胞免疫治疗
，涉及一种基因修饰的免疫细胞及其制备方法和应用。
技术介绍
嵌合抗原受体T细胞亦称为CAR-T细胞，是利用基因工程技术将特异性识别抗原的单链可变区(scFv)与T细胞共刺激和激活信号(如CD28、4-1BB、OX40、CD3ζ等)相串联，表达于T细胞上，从而赋予T细胞特异性识别靶标蛋白的功能，并针对表达靶标蛋白的细胞产生杀伤作用。将制备好的CAR-T细胞回输到肿瘤患者体内，通过发挥CAR-T细胞靶向特定肿瘤抗原的功效，从而达到消除肿瘤细胞的目的。目前，使用靶向CD19的CAR-T细胞治疗白血病已经获得了良好的疗效，细胞疗法在肿瘤治疗领域展现出广阔的前景。针对实体瘤GPC3、Mesothelin和Muc1等靶标，研究人员设计了相应的CAR-T细胞，以期望将CAR-T细胞疗法应用于实体肿瘤治疗。尽管CAR-T细胞可以靶向表达特异性抗原的肿瘤细胞，但是很多肿瘤细胞并不表达专一、特异的肿瘤抗原，肿瘤异质性是细胞疗法治疗实体肿瘤面临的一大障碍。增加嵌合抗原受体分子识别不同本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括DAP10蛋白和信号传导结构域，所述信号传导结构域连接在所述DAP10蛋白的C端；/n所述DAP10蛋白为胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域。/n

【技术特征摘要】
1.一种嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括DAP10蛋白和信号传导结构域，所述信号传导结构域连接在所述DAP10蛋白的C端；
所述DAP10蛋白为胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域。


2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述信号传导结构域包括CD3ζ；
优选地，所述信号传导结构域还包括4-1BB、CD28、TLR1、TLR2或OX40中的任意一种或至少两种的组合，优选为4-1BB；
优选地，所述DAP10蛋白包括SEQIDNO:1所示的氨基酸序列；
优选地，所述嵌合抗原受体由DAP10蛋白、4-1BB和CD3ζ串联组成；
优选地，所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。


3.根据权利要求1或2所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体还包括抗原结合结构域，所述抗原结合结构域连接在所述DAP10蛋白的N端；
优选地，所述抗原结合结构域包括靶向肿瘤表面抗原的单链可变区；
优选地，所述肿瘤表面抗原包括CD19、CD20、CD22、CD30、CEA、EGFR、BRAF、HER-2、Mesothelin、MUC1、PSCA、GPC3、TERT、PTEN、PD-1、PD-L1或VEGF中的任意一种或至少两种的组合，优选为GPC3或Mesothelin；
优选地，所述嵌合抗原受体由靶向肿瘤表面抗原的单链可变区、DAP10蛋白、4-1BB和CD3ζ串联组成；
优选地，所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQIDNO:3或SEQIDNO:4所示。


4.一种编码基因，其特征在于，所述编码基因编码权利要求1-3任一项所述的嵌合抗原受体。


5.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包括权利要求4所述的编码基因；
优选地，所述表达载体为含有权利要求4所述的编码基因的病毒载体；
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【专利技术属性】
技术研发人员：李鹏，李尚霖，汤朝阳，赵若聪，姚瑶，胡朵，
申请(专利权)人：深圳市体内生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44