一种CD4联合CD8双特异性CAR-T细胞组合物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种CD4联合CD8双特异性CAR

【技术实现步骤摘要】
一种CD4联合CD8双特异性CAR
‑
T细胞组合物及其应用


[0001]本专利技术属于细胞免疫治疗
，具体涉及一种CD4联合CD8双特异性CAR
‑
T细胞组合物及其应用。

技术介绍

[0002]嵌合抗原受体T(Chimeric antigen receptor T，CAR
‑
T)细胞疗法在对抗B细胞来源的白血病和淋巴瘤中取得了理想的疗效，但复发率高。另外，CAR
‑
T细胞疗法在肺癌、肝癌等实体肿瘤患者中的疗效仍不理想。CAR
‑
T细胞抗肿瘤活性不足，以及未能在患者体内长期维持是导致这些问题的重要原因。
[0003]CD8 T细胞是体内重要杀伤型T细胞，经抗原激活后能够迅速激活，分泌颗粒酶和穿孔素等杀伤因子，及时的清除体内抗原，但其的扩增和维持需要IL2、IL7等细胞因子的支持，否则会在体内迅速凋亡。而CD4 T细胞在获得性免疫反应中扮演重要角色，在CD8
+
杀伤T细胞功能的发挥和抗体介导的免疫应答中均担任必要辅助作用。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种CD4联合CD8双特异性CAR
‑
T细胞组合物，其特征在于，所述组合物中包括含有嵌合抗原受体的CD4
+
T细胞和含有嵌合抗原受体的CD8
+
T细胞；所述CD4
+
T细胞中含有靶向TGFβ的嵌合抗原受体；所述CD8
+
T细胞中含有靶向MSLN、GPC3或PSCA中任意一种的嵌合抗原受体。2.根据权利要求1所述的CD4联合CD8双特异性CAR
‑
T细胞组合物，其特征在于，所述CD4
+
T细胞和/或CD8
+
T细胞的PD
‑
1、REGNASE
‑
1、CISH或HPK1中任意一种基因或者至少两种基因被敲除。3.根据权利要求1或2所述的CD4联合CD8双特异性CAR
‑
T细胞组合物，其特征在于，所述CD4
+
T细胞与CD8
+
T细胞的细胞数目比为1:(1
‑
10)。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的CD4联合CD8双特异性CAR
‑
T细胞组合物，其特征在于，所述靶向TGFβ的嵌合抗原受体包括依次串联的GM
‑
CSF信号肽或CD8α信号肽、靶向TGFβ的scFv、CD8跨膜序列或CD28跨膜序列、CD28共刺激分子和/或4
‑
1BB共刺激分子、TLR2胞内段和CD3ζ链；优选地，所述GM
‑
CSF信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；优选地，所述CD8α信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；优选地，所述靶向TGFβ的scFv的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；优选地，所述CD8跨膜序列的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；优选地，所述CD28跨膜序列的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示；优选地，所述CD28共刺激分子的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示；优选地，所述4
‑
1BB共刺激分子的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示；优选地，所述TLR2胞内段的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示；优选地，所述CD3ζ链的氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示；优选地，所述靶向TGFβ的嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO:17所示；优选地，所述靶向TGFβ的嵌合抗原受体还包括GFP标签蛋白或CD19标签蛋白；优选地，所述GFP标签蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示；优选地，所述CD19标签蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的CD4联合CD8双特异性CAR
‑
T细胞组合物，其特征在于，所述含有靶向MSLN的嵌合抗原受体包括依次串联的GM
‑
CSF信号肽或CD8α信号肽、靶向MSLN的scFv、CD8跨膜序列或CD28跨膜序列、CD28共刺激分子和/或4
‑
1BB共刺激分子、TLR2胞内段和CD3ζ链；优选地，所述靶向MSLN的scFv的氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示；优选地，所述靶向MSLN的嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示；优选地，所述含有靶向GPC3的嵌合抗原受体包括依次串联的GM
‑
CSF信号肽或CD8α信号肽、靶向GPC3的scFv、CD8跨膜序列或CD28跨膜序列、CD28...

【专利技术属性】
技术研发人员：请求不公布姓名，
申请(专利权)人：深圳市体内生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：