一种双特异性嵌合抗原受体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种双特异性嵌合抗原受体及其应用

【技术实现步骤摘要】
一种双特异性嵌合抗原受体及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，涉及一种双特异性嵌合抗原受体及其应用
。

技术介绍

[0002]肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一
。
目前，肝细胞肝癌
(HCC)
的传统治疗方法有外科手术治疗
、
化疗
、
放疗
、
肝移植
、
射频消融
、
肝动脉化疗栓塞术和中医治疗等，但这些治疗方法对晚期肝癌
、
转移或复发患者疗效均较差
。
此外，目前也有多种免疫疗法针对肝癌，包括免疫检查点抑制剂
、
过继细胞疗法
(ACT)、
肿瘤疫苗以及细胞因子治疗等
。
针对肝癌的过继细胞疗法主要为以磷脂酰肌醇聚糖
(GPC3)
为靶点的
CAR
‑
T
细胞疗法，目前已经证实能清除
GPC3
高表达的肝癌
。
此外，
GPC3
也在其他肿瘤中高表达，如卵巢透明细胞癌
、
黑色素瘤
、
肺鳞状细胞癌
、
肝母细胞瘤等
。
[0003]成纤维细胞活化蛋白，
FibroblastActivation Protein
，简称
FAP
，它在肿瘤，纤维化，动脉粥样硬化以及关节炎等疾病中独特表达，是潜在的疾病生物标志物和药物治疗靶点，它还是成纤维细胞和部分肿瘤细胞的表面标志物，并且在健康组织器官表达量较低
。
调研数据库
(GEPIA)
的数据发现，病人肝癌的成纤维细胞活化蛋白
(FAP)
表达量是明显高于其正常组织的
。
研究发现
FAP
在
90
％以上的上皮瘤中表达阳性；在胚胎期
、
伤口愈合的肉芽组织
、
慢性炎症肉芽肿及肝硬化星形细胞中少量表达，但是不在正常的发育成熟组织中表达
。
目前已有以
FAP
为靶点的肿瘤治疗药物
(
如
Talabostat)
的报道，也有靶向
FAP
的
CAR
‑
T
细胞用于治疗恶性胸膜间皮瘤的报道
。
同时本专利技术人已证明靶向
FAP
的
CAR
‑
T
细胞可用于治疗肝癌
。
另外，
FAP
也被证明在其他肿瘤中高表达，如结直肠癌
、
胰腺癌和卵巢癌等
。
[0004]嵌合抗原受体
(CAR)T
细胞是指表面表达识别特定抗原并能传递信号的嵌合型受体的
T
细胞
。CAR
‑
T
细胞可以识别并杀伤表达特定抗原的细胞，目前
CAR
‑
T
细胞疗法主要用于癌症治疗，在血液瘤和部分实体肿瘤中展现出一定疗效，但大部分实体瘤临床效果均不明显
。
主要是因为实体瘤普遍存在异质性，容易造成免疫逃逸，导致免疫治疗效果不佳
。
[0005]因此，亟需提供一种具有更强的肿瘤杀伤活性和
T
细胞活化增殖能力的双特异性嵌合抗原受体及
CAR
‑
T
细胞，用于开发各实体瘤的新型疗法
。

技术实现思路

[0006]针对现有技术的不足和实际需求，本专利技术提供一种双特异性嵌合抗原受体及其应用，能同时靶向
FAP
和
GPC3
，使两个抗原结构域都能很好的发挥抗肿瘤作用，且互不影响，与其他线性串联或者已报道连接环状设计的的双特异性
CAR
‑
T
细胞相比具有更强的肿瘤杀伤活性和
T
细胞活化增殖能力
。
[0007]为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0008]第一方面，本专利技术提供了一种嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体包括：抗原结合结构域
、
连接肽
、
铰链区
、
跨膜结构域和信号传导结构域；所述抗原结合结构域包括靶向
FAP
的抗原结合结构域和靶向
GPC3
的抗原结合结构域
。
[0009]本专利技术提供了一种双特异性
CAR
‑
T
细胞，能同时靶向
FAP
和
GPC3
，使两个抗原结构域都能很好的发挥抗肿瘤作用，且互不影响，与其他线性串联或者已报道连接环状设计的的双特异性
CAR
‑
T
细胞相比具有更强的肿瘤杀伤活性和
T
细胞活化增殖能力
。
[0010]优选地，所述靶向
FAP
的抗原结合结构域的重链可变区的氨基酸序列包括
SEQ ID NO:1
，轻链可变区的氨基酸序列包括
SEQ ID NO:2。
[0011]SEQ ID NO:1
：
[0012]HVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSNNYYWGWIRQTPGKGLEW IGSIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARGAR WQARPATRIDGVAFDIWGQGTMVTVSS。
[0013]SEQ ID NO:2
：
[0014]ETTLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQTVTRNYLAWYQQKPGQAPRLL MYGASNRAAGVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQFGSPYTFGQ GTKVEIK。
[0015]优选地，所述靶向
GPC3
的抗原结合结构域的重链可变区的氨基酸序列包括
SEQ ID NO:3
，轻链可变区的氨基酸序列包括
SEQ ID NO:4。
[0016]SEQ ID NO:3
：
[0017]QVQLQQSGAELVRPGASVKLSCKASGYTFTDYEMHWVKQTPVHGLK WIGALDPKTGDTAYSQKFKGKATLTADKSSSTAYMELRSLTSEDSAVYYCT RFYSYTYWGQGTLVTVSA。
[0018]SEQ ID NO:4
：
[0019]DVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSP KLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVY本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括：抗原结合结构域
、
连接肽
、
铰链区
、
跨膜结构域和信号传导结构域；所述抗原结合结构域包括靶向
FAP
的抗原结合结构域和靶向
GPC3
的抗原结合结构域
。2.
根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述靶向
FAP
的抗原结合结构域的重链可变区的氨基酸序列包括
SEQ ID NO:1
，轻链可变区的氨基酸序列包括
SEQ ID NO:2。3.
根据权利要求1或2所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述靶向
GPC3
的抗原结合结构域的重链可变区的氨基酸序列包括
SEQ ID NO:3
，轻链可变区的氨基酸序列包括
SEQ ID NO:4。4.
根据权利要求1‑3中任一项所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述连接肽包括柔性连接肽或刚性连接肽
。
优选地，所述信号传导结构域包括
CD3
ζ
信号传导结构域；优选地，所述信号传导结构域还包括共刺激分子；优选地，所述共刺激分子包括4‑
1BB、CD28、OX40、ICOS、CD40、CD27、CD134、CDS、ICAM
‑
1、LFA
‑
1、CD2
或
BTLA
中任意一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，
申请(专利权)人：深圳市体内生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：