肺炎链球菌的荚膜多糖以及其免疫原性缀合物制造技术

本发明专利技术提供一种包含肺炎链球菌多糖‑蛋白质缀合物的免疫原性组合物及其制备方法，该缀合物包含：源自选自由肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)血清型1、2、3、4、5、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F和33F构成的组中的任一个以上的荚膜多糖；及缀合至所述荚膜多糖中每个的一种或两种以上的载体蛋白。通过本发明专利技术的一实施例，可提供用于预防或治疗肺炎球菌感染的免疫原性组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】肺炎链球菌的荚膜多糖以及其免疫原性缀合物
本申请请求于2018年4月18日提交的韩国专利申请第10-2018-0045245号、2018年4月18日提交的韩国专利申请第10-2018-0045246号、2018年4月18日提交的韩国专利申请第10-2018-0045247号、及2018年4月18日提交的韩国专利申请第10-2018-0045248号的优先权，并且申请的说明书及附图中揭示的全部内容以引用方式并入本文。本专利技术是关于肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)的免疫原性组合物及疫苗，并且更具体而言，本专利技术是关于包含肺炎链球菌的荚膜多糖-载体蛋白缀合物的免疫原性组合物及疫苗。
技术介绍
肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)是肺炎的主要致病细菌。另外，肺炎链球菌引起侵袭性疾病诸如败血症、菌血症、脑膜炎等。根据统计局[2014年死亡原因统计]，2014年肺炎死亡率为每10万人中有23.7人，并且此死亡率比2013年增加11％，比2015年增加2.8倍，可以看出由肺炎引起的死亡率一直在不断增加。此外，根据2012年WHO，在2008年，全球476,000名HIV阴性的5岁以下婴儿死于肺炎链球菌感染，占5岁以下婴儿死亡原因的5％。取决于荚膜多糖的结构及免疫学特征，肺炎球菌被分类为超过约90种血清型(serotype)，荚膜多糖是围绕肺炎球菌外部(细胞膜)的主要毒力因子(virulencefactor)。为了预防肺炎链球菌引起的疾病，RobertAustrian博士于1977年开发了一种14-价多糖疫苗，之后，该疫苗被开发成一种23-价多糖疫苗。已经证明，多价肺炎球菌多糖疫苗可用于在老年人及高危患者中预防肺炎链球菌疾病。然而，婴儿及儿童对大多数肺炎链球菌多糖没有免疫反应，这归因于与T细胞非依赖性免疫反应。因此，已经开发了肺炎链球菌荚膜多糖与载体蛋白的缀合疫苗，该疫苗可以引起T细胞依赖性反应。7-价肺炎链球菌结合疫苗包含源自7种最常见血清型4、6B、9V、14、18C、19F及23F的荚膜多糖。自从该疫苗最初在2000年在美国获得批准以来，已经证明该疫苗具有高度免疫原性，可有效抵抗婴儿及儿童的侵袭性肺炎球菌疾病及中耳炎。之后，依序开发了13-价缀合疫苗其中添加了6种血清型1、3、5、6A、7F、19A，以及10-价缀合疫苗Synflorix，其中添加了3种血清型1、5、7F，进一步减少了肺炎链球菌引起的侵袭性疾病数量。然而，在由于引入Prevnar、Prevnar13及Synflorix而导致出现血清型改变，并且由疫苗中包含的血清型引起的疾病的数量总体上减少，重要性相对较低的非疫苗血清型的重要性却受到重视。尤其，在北美及巴西发生由肺炎链球菌血清型20引起的侵袭性肺炎球菌疾病的发病率的增加(例如，参见[KendallB.等人,Vaccine.34:474-478,2016]、[YildirimI.等人,PediatrInfectDisJ.31(10):1016-1021,2012]或[CaierγoJ.等人,PLoSONE9(10):e111129,2014])。此外，在加拿大进行的CASPER研究中，观察到除血清型19A外的血清型8及12F的发病率增加(incidence)(Sα-LeγoA.等人,JClinMicrobiol.,49(4):1369-75,2011)。最近发表的一项研究报告称，在挪威及以色列引入Prevnar13后，非疫苗血清型引起的疾病增加，并且例举23A、23B、12F、15A/15B/15C、31、33F、7C及8为此类非疫苗血清型(MartinJ.,PediatrInfectDisJ.,33(11):e286-90,2014)。尽管由肺炎链球菌血清型2、9N、17F和/或20引起的肺炎球菌疾病的发病率稳步增加，但缺乏能够有效预防或治疗血清型感染的研究。因此，越来越需要针对非疫苗血清型的免疫原性缀合物及免疫原性组合物以提供更广泛的保护范围，该血清型具有在多价多糖疫苗中包含但在缀合疫苗中不包含的血清型。
技术实现思路
专利技术要解决的问题因此，本专利技术要解决的问题是提供一种能够提供广泛保护范围的多价疫苗。此外，还提供包含先前未包含在缀合疫苗中的新血清型的免疫原性组合物。另外，本专利技术要解决的问题是提供具有优异抗体效价的肺炎球菌缀合疫苗。用于解决问题的手段本专利技术的一实施例提供包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，该缀合物包含：源自选自肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)血清型1、2、3、4、5、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F和33F中的任一个以上的荚膜多糖；及缀合至所述荚膜多糖中每个的载体蛋白。一个实施例提供包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，当所述免疫原性组合物包含源自血清型2的多糖时，所述多糖经活化并且以100至400kDa的分子量结合至所述载体蛋白以形成缀合物，或当所述免疫原性组合物包含源自血清型17F的多糖时，所述多糖经活化并且以400至900kDa的分子量结合至所述载体蛋白以形成缀合物，或当所述免疫原性组合物包含源自血清型20的多糖时，所述多糖经活化并且以400至800kDa的分子量结合至所述载体蛋白以形成缀合物。本专利技术的一实施例提供包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，当所述免疫原性组合物包含源自血清型2的多糖时，包含所述源自血清型2的多糖的免疫原性缀合物具有1,000至16,000kDa的分子量，或当所述免疫原性组合物包含源自血清型17F的多糖时，包含所述源自血清型17F的多糖的免疫原性缀合物具有300至4,500kDa的分子量，或当所述免疫原性组合物包含源自血清型20的多糖时，包含所述源自血清型20的多糖的免疫原性缀合物具有1,000至4,000kDa的分子量。本专利技术的一实施例提供包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，所述载体蛋白为破伤风类毒素(Tetanustoxoid，TT)或CRM197，并且优选地，仅包含一种血清型的免疫原性组合物可包含CRM197作为载体蛋白。本专利技术的一实施例提供包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，当所述免疫原性组合物包含源自血清型2的多糖时，所述免疫原性缀合物中的血清型2荚膜多糖与载体蛋白的比率(多糖/蛋白质，W/W)为0.5至2.0，或当所述免疫原性组合物包含源自血清型17F的多糖时，所述免疫原性缀合物中的血清型17F荚膜多糖与载体蛋白的比率(多糖/蛋白质，W/W)为0.5至18，或当所述免疫原性组合物包含源自血清型20的多糖时，所述免疫原性缀合物中的血清型20荚膜多糖与载体蛋白的比率(多糖/蛋白质，W/W)为1至5。本专利技术的一实施例提供包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，就包含所述源自血本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，/n该缀合物包含：/n源自选自肺炎链球菌血清型1、2、3、4、5、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F和33F中的任一个以上的荚膜多糖；以及/n缀合至所述荚膜多糖中每个的一种或两种以上的载体蛋白。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180418 KR 10-2018-0045245;20180418 KR 10-2018-001.一种包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，
该缀合物包含：
源自选自肺炎链球菌血清型1、2、3、4、5、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F和33F中的任一个以上的荚膜多糖；以及
缀合至所述荚膜多糖中每个的一种或两种以上的载体蛋白。


2.根据权利要求1所述的包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，
当所述免疫原性组合物包含源自血清型2的多糖时，所述多糖经活化并且以100至400kDa的分子量结合至所述载体蛋白以形成缀合物，或
当所述免疫原性组合物包含源自血清型17F的多糖时，所述多糖经活化并且以400至900kDa的分子量结合至所述载体蛋白以形成缀合物，或
当所述免疫原性组合物包含源自血清型20的多糖时，所述多糖经活化并且以400至800kDa的分子量结合至所述载体蛋白以形成缀合物。


3.根据权利要求1所述的包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，
当所述免疫原性组合物包含源自血清型2的多糖时，包含源自所述血清型2的多糖的免疫原性缀合物具有1,000至16,000kDa的分子量，或
当所述免疫原性组合物包含源自血清型17F的多糖时，包含源自所述血清型17F的多糖的免疫原性缀合物具有300至4,500kDa的分子量，或
当所述免疫原性组合物包含源自血清型20的多糖时，包含源自所述之血清型20的多糖的免疫原性缀合物具有1,000至4,000kDa的分子量。


4.根据权利要求1所述的包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，
所述载体蛋白为TT或CRM197。


5.根据权利要求1所述的包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，
当所述免疫原性组合物包含源自血清型2的多糖时，所述免疫原性缀合物中的血清型2荚膜多糖与该载体蛋白的比率(多糖/蛋白质，W/W)为0.5至2.0，或
当所述免疫原性组合物包含源自血清型17F的多糖时，所述免疫原性缀合物中的血清型2荚膜多糖与该载体蛋白的比率(多糖/蛋白质，W/W)为0.5至18，或
当所述免疫原性组合物包含源自血清型20的多糖时，所述免疫原性缀合物中的血清型20荚膜多糖与该载体蛋白的比率(多糖/蛋白质，W/W)为1至5。


6.根据权利要求1所述的包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，
所述免疫原性组合物，
就包含源自所述血清型2的多糖的免疫原性缀合物而言，总分子量的20至60％以CL-4B管柱中0.3Kd以内存在，或
就包含源自所述血清型17F的多糖的免疫原性缀合物而言，总分子量的15至60％以CL-4B管柱中0.3Kd以内存在，或
就包含源自血清型20的多糖的免疫原性缀合物所述，总分子量的70至90％以CL-4B管柱中0.3Kd以内存在。


7.根据权利要求1所述的包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，
所述免疫原性组合物，
就包含源自所述血清型2的多糖的免疫原性缀合物而言，缀合至所述缀合物的多糖的氧化度为2至18，或
就包含源自所述血清型17F的多糖的免疫原性缀合物而言，缀合至所述缀合物的多糖的氧化度为1至22，或
就包含源自所述血清型20的多糖的免疫原性缀合物而言，缀合至所述缀合物的多糖的氧化度为4至16。


8.根据权利要求1所述的包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，
所述免疫原性组合物是源自彼此不同的15种血清型的多糖缀合至相应载体蛋白的免疫原性组合物，
所述血清型为1、2、3、4、5、6A、6B、7F、9N、9V、14、18C、19A、19F、及23F，并且
所述血清型分别缀合至CRM197。


9.根据权利要求1所述的包含肺炎链球菌多糖-蛋白质缀合物的免疫原性组合物，其中，
所述免疫原性组合物是源自彼此不同的23种血清型的多糖缀合至相应载体蛋白的免疫原性组合物，
所述血清型为1、2、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F和33...

【专利技术属性】
技术研发人员：金勋，咸东洙，申珍焕，安京俊，金成炫，
申请(专利权)人：SK生物科学株式会社，
类型：发明
国别省市：韩国;KR