一种氨基酸稳定氮同位素的测量方法及其应用技术

本发明专利技术属于氨基酸稳定氮同位素的测定技术领域，公开了一种氨基酸稳定氮同位素的测量方法及其应用，该方法是将氨基酸溶解于碱性无机溶液中涡旋震荡，再加入醇类有机溶液和氯甲酸异丁酯、有碱性有机溶液进行衍生化反应，得到衍生化的氨基酸粗品，然后加入饱和氯化钠溶液和二氯甲烷进行萃取分离得到上层溶液，氮气吹干，加入二氯甲烷进行定容，制得衍生化的氨基酸溶液，将其通过自动进样器进入气相色谱分离、进入燃烧还原管转化形成N

【技术实现步骤摘要】
一种氨基酸稳定氮同位素的测量方法及其应用
本专利技术属于稳定氮同位素的测定
，更具体地，涉及一种氨基酸稳定氮同位素的测量方法及其应用。
技术介绍
氨基酸是微生物和动植物所需的基本营养物质，其代谢过程会使氨基酸氮同位素发生分馏现象，因而通过测定氨基酸稳定氮同位素值可以了解氨基酸代谢组学过程和溯源分析。由于氨基酸含有羧基、羟基和氨基等极性较大基团，使其挥发性相对较弱，需要衍生化后的氨基酸才通过气相色谱-燃烧-同位素比值质谱仪测定氨基酸稳定氮同位素。过去测定氨基酸稳定氮同位素的衍生化方法通常使用硅烷化法和酰基化等，衍生化的氨基酸再通过气相色谱-燃烧-同位素比值质谱仪测定氨基酸稳定氮同位素比值(刘瑀等，2018，环境化学,037,239-248；徐春英等，2009，中国农业科学，02,77-84)。但由于这些衍生化所需反应温度到达110℃或者反应时间需要1～2h。一种在常温条件下、反应迅速、操作简单的衍生化方法能够实现快速分析需求，通过有机溶剂快速萃取氨基酸衍生化产物，吸取氨基酸衍生化产物通过气相色谱-燃烧-同位素比值质谱仪测定氨基酸稳定本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种氨基酸稳定氮同位素的测量方法，其特征在于，包括如下具体步骤：/nS1.将粉末状氨基酸样品溶解于碱性无机溶液中涡旋震荡，得到溶液A，再将醇类有机溶液和氯甲酸异丁酯加入溶液A中涡旋震荡，得到溶液B，然后加入碱性有机溶液和氯甲酸异丁酯后涡旋震荡，得到衍生化的氨基酸粗品；/nS2.在衍生化的氨基酸粗品中加入饱和NaCl溶液和二氯甲烷充分混合后静置，将上层溶液分离后40～50℃用氮气吹干，制得衍生化的氨基酸；/nS3.将二氯甲烷加入至衍生化的氨基酸中，移至顶空瓶中，制得衍生化的氨基酸溶液；/nS4.将衍生化的氨基酸溶液通过自动进样器进入气相色谱分离、进入燃烧还原管转化形成N

【技术特征摘要】
1.一种氨基酸稳定氮同位素的测量方法，其特征在于，包括如下具体步骤：
S1.将粉末状氨基酸样品溶解于碱性无机溶液中涡旋震荡，得到溶液A，再将醇类有机溶液和氯甲酸异丁酯加入溶液A中涡旋震荡，得到溶液B，然后加入碱性有机溶液和氯甲酸异丁酯后涡旋震荡，得到衍生化的氨基酸粗品；
S2.在衍生化的氨基酸粗品中加入饱和NaCl溶液和二氯甲烷充分混合后静置，将上层溶液分离后40～50℃用氮气吹干，制得衍生化的氨基酸；
S3.将二氯甲烷加入至衍生化的氨基酸中，移至顶空瓶中，制得衍生化的氨基酸溶液；
S4.将衍生化的氨基酸溶液通过自动进样器进入气相色谱分离、进入燃烧还原管转化形成N2，经过液氮冷肼装置去除水分，进入Isoprime100稳定同位素比质谱仪，测定氨基酸稳定氮同位素的比值。


2.根据权利要求1所述的氨基酸稳定氮同位素的测定方法，其特征在于，步骤S1中所述的溶液A中粉末状氨基酸的质量和碱性无机溶液的体积比为(1～5)mg：(100～200)μL；所述碱性无机溶液的浓度为5～12mol/L。


3.根据权利要求1所述的氨基酸稳定氮同位素的测定方法，其特征在于，步骤S1中所述醇类有机溶液、氯甲酸异丁酯和溶液A的体积比为(2～4)：(1～2)：(2～4)。
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【专利技术属性】
技术研发人员：林钦浩，安太成，李桂英，熊举坤，梁志梳，
申请(专利权)人：广东工业大学，
类型：发明
国别省市：广东;44