腐霉利半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了腐霉利半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和应用，本发明专利技术中，提供两种不同结构的腐霉利半抗原，其中，式(Ⅰ)所示结构的腐霉利半抗原作为腐霉利免疫用半抗原，最大程度保留了腐霉利的特征结构，使得腐霉利半抗原的免疫原性明显增强，又具有可以与载体蛋白发生偶联的羧基；用式(Ⅰ)所示结构的腐霉利半抗原与载体蛋白偶联后得到的腐霉利免疫抗原去免疫动物，更有利于刺激动物免疫应答产生特异性更强、灵敏度更高的抗体，经检测腐霉利抗体的灵敏度可达0.025μg/L，与其他有机氯类农药的交叉反应率低，为后续建立腐霉利的各种免疫分析方法提供了基础。

【技术实现步骤摘要】
腐霉利半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和应用
本专利技术属于食品安全检测领域。更具体地，本专利技术涉及腐霉利半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和应用。
技术介绍
腐霉利(procymidone)，是一种广谱内吸性低毒杀菌剂，主要用于果蔬、花卉等植物的灰霉病、菌核病、褐腐病、大斑病、黑星病的防治。腐霉利有很强的刺激作用，对皮肤和眼睛的正常合成和代谢，一旦进入人体，会干扰或抑制物质的内分泌系统，具有对人体健康的影响。我国国家标准GB2763-2019《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》中规定了蔬菜、水果中腐霉利的残留限量为0.2～10mg/kg。目前，国内外关于腐霉利残留分析检测方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法和气相色谱-质谱法等，但都存在样品前处理繁琐、检测时间长、仪器贵重等缺点，在我国无法得到广泛应用，并且不符合现场检测“在短时间内低成本对大量样品进行准确检测和筛选”的要求。而免疫学检测分析技术以其高灵敏、高特异性、快速、操作简便等优点在药物残留检测领域已被广泛应用，比起仪器等检验方法有很多优势。所以免疫分析为腐霉利残留研究本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种腐霉利半抗原，其特征在于，其具有式(Ⅰ)或式(Ⅱ)所示的结构：/n

【技术特征摘要】
1.一种腐霉利半抗原，其特征在于，其具有式(Ⅰ)或式(Ⅱ)所示的结构：



其中，n为-CH2基团数目，n为0～4的整数。


2.如权利要求1所述的腐霉利半抗原的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)在碱性条件下，将3,5-二氯-4-氟硝基苯与发生亲核取代反应，得到中间体1，所述中间体1具有结构式其中，n为-CH2基团数目，n为0～4的整数；
2)在钯碳的催化作用下，将所述中间体1进行加氢还原反应，得到中间体2，所述中间体2具有结构式
3)将所述中间体2与1,2-二甲基环丙烷-1,2二羧酸、草酰氯进行环化反应，得到式(Ⅰ)所示结构的腐霉利半抗原。


3.如权利要求2所述的腐霉利半抗原的制备方法，其特征在于，所述步骤1)包括如下步骤：取3,5-二氯-4-氟硝基苯加乙醇溶解，加入NaOH，搅拌，再加入充分搅拌，60℃反应4h，反应结束后，旋蒸除去乙醇，加入水，用乙酸乙酯萃取，收集水相，水相用盐酸调节pH到5，再用乙酸乙酯萃取，经无水硫酸钠干燥、蒸干，得到中间体1；其中，所述3,5-二氯-4-氟硝基苯、和氢氧化钠的物质的量之比为1:1:2。


4.如权利要求2所述的腐霉利半抗原的制备方法，其特征在于，所述步骤2)包括如下步骤：将中间体1加甲醇溶解澄清，缓慢加入钯碳，充分混匀后，抽取空气，通入氢气，室温搅拌6h，反应结束后，抽滤除去钯碳，旋蒸蒸干，得到中间体2。


5.如权利要求2所述的腐霉利半抗原的制备方法，其特征在于，所述步骤3)包括如下步骤：取1,2-二甲基环丙烷-1,2二羧酸加二氯甲烷溶解，0～5℃恒温30min，加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：万宇平，王兆芹，王健，朱亮亮，马玉华，冯才伟，丛倩千，崔娜，何方洋，
申请(专利权)人：北京勤邦生物技术有限公司，山东勤邦生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11