【技术实现步骤摘要】
非洲猪瘟病毒实时荧光PCR扩增引物对、探针引物、及制备的试剂盒
本专利技术属于单个光脉冲或光脉冲序列的特性领域,具体涉及实时荧光PCR检测,特别涉及非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测引物、探针引物、试剂盒。
技术介绍
非洲猪瘟(Africanswinefever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(Africanswinefevervirus,ASFV)引起的猪的一种烈性、高度接触性传染病。非洲猪瘟病毒是一种有囊膜的单分子线状双链DNA病毒,其基因组长约170kb~193kb。ASF具有高发病率、高死亡率等特点,一旦发生,经济损失巨大;目前缺乏有效疫苗和特异性治疗手段,使ASF成为目前危害养猪业的最严重疫病之一。目前对ASF的控制只能依赖实验室的快速诊断、对发病动物的捕杀,以及采取有效的检疫措施和严格的卫生措施。目前,ASF在我国首次爆发,国内多个地区流行,疫情持续扩大。ASFV在我国缺乏有效疫苗和快速病原检测技术,是疫病精确监测和控制存在的重要问题。因此,利用新型病原学检测技术,建立快速检测方法用于ASF病原快速鉴定是有 ...
【技术保护点】
1.一种非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测试剂盒,其中,所述试剂盒包括一对扩增引物,一条探针引物;所述扩增引物的上游引物如SEQ.ID.No.1所示,所述扩增引物的下游引物如SEQ.ID.No.2所示;所述探针引物如SEQ.ID.No.3所示,其上标记有荧光素。/n
【技术特征摘要】 【专利技术属性】
1.一种非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测试剂盒,其中,所述试剂盒包括一对扩增引物,一条探针引物;所述扩增引物的上游引物如SEQ.ID.No.1所示,所述扩增引物的下游引物如SEQ.ID.No.2所示;所述探针引物如SEQ.ID.No.3所示,其上标记有荧光素。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其中,所述荧光素选自FAM(羧基荧光素)、VIC、HEX、JOE、NED、TAMRA、CY3、ROX或CY5。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其中,所述试剂盒还包括:TaqDNA聚合酶,5×反应缓冲液,dNTPs,ddH2O;优选地,TaqDNA聚合酶浓度为5U/μl,5×反应缓冲液为5×Tris-HCl(pH8.3),浓度为50mM,dNTPs浓度为2.5mM,上游引物浓度为10μM,下游引物浓度为10μM,探针引物浓度为5μM。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其中,所述试剂盒还包括酶混合液,所述酶混合液由TaqDNA聚合酶、Tris-HCl、EDTA、DTT、甘油和Tween-20组成,TaqDNA聚合酶、Tris-HCl、EDTA、DTT、甘油和Tween-20含量分别为0.5U/μl、25mM、0.05mM、0.05mM、40%V/V、0.2%V/V。
技术研发人员:田克恭,李向东,张海洋,
申请(专利权)人:洛阳普泰生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:河南;41
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