用于检测新型冠状病毒的引物探针组合、试剂盒和方法技术

本发明专利技术涉及一种用于检测新型冠状病毒的引物探针组合、试剂盒和方法，包含两组用于检测新型冠状病毒核酸的引物和探针和一组内控引物和探针，所述探针I和引物对I的检测通道为FAM，所述探针II和引物对II的检测通道为VIC，所述内控引物和探针的检测通道为CY5。本发明专利技术所述试剂盒通过在检测体系中引入多个标记位点进行多重荧光标记，多重数字PCR体系同时检测多个新型冠状病毒位点，提高检测精准度。本发明专利技术所述试剂盒具有高灵敏性和特异性，能够检测到低至5copies/反应的阳性，避免了荧光定量可能出现的假阴性；同时设置两个检测通道和一个内控通道，避免了加样过程中可能造成的污染。

【技术实现步骤摘要】
用于检测新型冠状病毒的引物探针组合、试剂盒和方法
本专利技术涉及生物医学
，具体涉及一种用于检测新型冠状病毒的引物探针组合、试剂盒、方法和应用。
技术介绍
2019新型冠状病毒(COVID-19)于2020年1月12日被世界卫生组织命名。人感染了冠状病毒后常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在较严重病例中，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。开发检测新冠病毒的试剂盒所需要的分子诊断技术相对成熟，但是现在市场上试剂盒的检测高灵敏度、高特异性是需要进行改进和提升的。现有的核酸检测方法，通常是提取RNA后，采用一步法荧光定量PCR技术检测单个基因位点，这样就会造成平台检测的灵敏度不高，容易造成漏检，出现假阴性，且现有荧光定量检测通常只能做到两个荧光通道同时检测，无法兼顾内控通道；或者检测两份，即分别采用两个基因和一个内控基因构成检测体系。
技术实现思路
针对现有技术的不足之处，本专利技术旨在开发一种用于检测新型冠状病毒的引物探针组合、试剂盒、方法和应用，所述试剂盒能够保证检测的高灵敏本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测新型冠状病毒的引物探针组合，其特征在于，包含两组用于检测新型冠状病毒核酸的引物和探针：探针I的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，引物对I的序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示；探针II的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示，引物对II的序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示；/n还包含一组内控引物和探针：内控探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示，内控引物对的序列如SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测新型冠状病毒的引物探针组合，其特征在于，包含两组用于检测新型冠状病毒核酸的引物和探针：探针I的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示，引物对I的序列如SEQIDNO:2和SEQIDNO:3所示；探针II的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示，引物对II的序列如SEQIDNO:5和SEQIDNO:6所示；
还包含一组内控引物和探针：内控探针的核苷酸序列如SEQIDNO:7所示，内控引物对的序列如SEQIDNO:8和SEQIDNO:9所示。


2.根据权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于，所述探针I和引物对I的检测通道为FAM，所述探针II和引物对II的检测通道为VIC，所述内控引物和探针的检测通道为CY5。


3.根据权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于，两组用于检测新型冠状病毒核酸的引物和探针用于检测新型冠状病毒核酸的2个保守区M基因片段和Rdrp基因片段。


4.一种用于检测新型冠状病毒的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的用于检测新型冠状病毒的引物探针组合。


5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述引物探针组合中引物的工作浓度为800-1200nM，探针的工作浓度为150-250nM。


6.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：应斌武，刘堂喻亨，赵珍珍，王旻晋，陆小军，宋兴勃，
申请(专利权)人：四川大学华西医院，
类型：发明
国别省市：四川;51