一种鸭圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测的引物和探针制造技术

本发明专利技术涉及一种鸭圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测的引物和探针，所述引物序列为：上游引物DuCV‑F：5’‑CAGTTTGTKGCTAARACVTTG‑3’，下游引物DuCV‑R：5’‑AGTTTATTGGRAASGGGAGG‑3’；所述探针的序列为：探针DuCV‑2‑probe：5’‑TTTGATTTGTCCGCCTTAT‑3’，且其5’‑端标记荧光报告基团FAM，3’‑端标记MGB。利用所述引物和探针进行鸭圆环病毒2型检测的方法灵敏度高、稳定性好、特异性强、重复性好，可用于特异性检测鸭圆环病毒2型感染，为后续科学研究鸭圆环病毒致病机理和开展分子流行病学奠定基础。

【技术实现步骤摘要】
一种鸭圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测的引物和探针
本专利技术属于禽病学领域，具体涉及一种鸭圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测的引物和探针。
技术介绍
实时荧光定量PCR方法(Real-timePCR)是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质检测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。实时荧光定量PCR在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系。荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物，探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交探针(荧光共振能量传递探针)和分子信标(molecularBeacon)。TaqMan探针法是指Real-timePCR扩增时在加入一对引物时，还同时另外加入一个特异性的荧光探针，该探针只与模板特异性地结合，其结合位点在两条引物之间。探针的5′端标记有荧光报告基团(Reporter，R)，如FAM、Cy5、JOE等，3′端标记有荧光淬灭基团，如Ec本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鸭圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测的引物和探针，其特征在于：所述引物序列如下：/n上游引物DuCV-F：5’-CAGTTTGTKGCTAARACVTTG-3’，/n下游引物DuCV-R：5’-AGTTTATTGGRAASGGGAGG-3’；/n所述探针的序列为：/n探针DuCV-2-probe：5’-TTTGATTTGTCCGCCTTAT-3’，且其5’-端标记荧光报告基团FAM，3’-端标记MGB。/n

【技术特征摘要】
1.一种鸭圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测的引物和探针，其特征在于：所述引物序列如下：
上游引物DuCV-F：5’-CAGTTTGTKGCTAARACVTTG-3’，
下游引物DuCV-R：5’-AGTTTATTGGRAASGGGAGG-3’；
所述探针的序列为：
探针DuCV-2-probe：5’-TTTGATTTGTCCGCCTTAT-3’，且其5’-端标记荧光报告基团FAM，3’-端标记MGB。


2.如权利要求1所述的引物和探针用于鸭圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测的检测方法，其特征在于：以待检样品的核酸DNA为模板，用优化后的反应体系以及反应条件进行实时荧光定量PCR反应，根据扩增曲线有无出现阳性扩增信号，特异性的对鸭圆环病毒2型进行检测；
其中，优化后的反应体系为：在20μL体系中含有以下成分：








组分名称
体积(μL)


ProbeqPCRMix(2×)混合液
10


上游引物DuCV-F(10μmol/L)
0.4


下游引物DuCV-R(10μmol/L)
0.4


探针DuCV-2-probe(10μmol/L)
0.8


DNA模板
...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈翠腾，万春和，傅光华，黄瑜，程龙飞，施少华，陈红梅，傅秋玲，刘荣昌，陈珍，朱春华，
申请(专利权)人：福建省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：福建;35