一种SARS-CoV-2假病毒小鼠体内包装系统及其制备方法技术方案

本发明专利技术提供了一种假病毒小鼠体内包装系统的制备方法，包括以下步骤：S1基于慢病毒包装质粒系统和睡美人转座子系统构建SARS‑CoV‑2假病毒包装质粒系统，S2将步骤S1中SARS‑CoV‑2假病毒包装质粒系统与睡美人转座酶表达质粒混合通过水动力注射的方式转染小鼠肝细胞，然后睡美人转座子系统将SARS‑CoV‑2假病毒包装所需序列以剪切粘贴的方式整合到小鼠肝细胞的基因组。本发明专利技术可在小鼠体内持续制造分泌SARS‑CoV‑2假病毒，可模拟靶器官被SARS‑CoV‑2病毒持续侵入攻击的过程，从而可模拟出新冠肺炎（COVID‑19）的病理特征。基于SARS‑CoV‑2假病毒小鼠体内包装系统的动物模型安全性高，不需要P3级实验室就能开展研究。利用水动力注射的方式引入SARS‑CoV‑2假病毒包装质粒系统操作简单，成本低。

An in vivo packaging system for sars-cov-2 pseudovirus in mice and its preparation method

【技术实现步骤摘要】
一种SARS-CoV-2假病毒小鼠体内包装系统及其制备方法
本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种SARS-CoV-2假病毒小鼠体内包装系统及其制备方法。
技术介绍
SARS-CoV-2假病毒是表面包裹着SARS-CoV-2Spike蛋白（S蛋白）的缺陷病毒颗粒，因而可以利用SARS-CoV-2同样的病毒侵入机制（以ACE2作为受体）将携带的DNA或RNA序列导入细胞，但其携带的是不能指导再次生成病毒的序列，所以可用于研究单次侵入过程的机制及测试药物干预效果，一般情况下实验动物和操作者没有实质性感染的风险。目前假病毒包装通常都是在体外培养的细胞系中完成，可用于SARS-CoV-2假病毒包装的体系由humanimmunodeficiencyvirus-1(HIV-1)或murineleukemiavirus(MLV)等逆转录病毒改造而成。比如常用的慢病毒包装质粒系统（由HIV-1改造而成）经改造后就可用于包装SARS-CoV-2假病毒，即将包膜蛋白质粒中的VSV-G替换成SARS-CoV-2S蛋白，转染HEK293T细胞，即可生成S本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种假病毒小鼠体内包装系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1构建SARS-CoV-2假病毒包装质粒系统：首先构建含有SARS-CoV-2 S蛋白的包膜蛋白质粒，再构建包装质粒，最后构建转移质粒，获得SARS-CoV-2假病毒包装质粒系统；/nS2将SARS-CoV-2假病毒包装质粒系统与睡美人转座酶表达质粒混合通过水动力注射的方式转染小鼠肝细胞，然后睡美人转座子系统将SARS-CoV-2假病毒包装所需序列以剪切粘贴的方式整合到小鼠肝细胞的基因组。/n

【技术特征摘要】
1.一种假病毒小鼠体内包装系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1构建SARS-CoV-2假病毒包装质粒系统：首先构建含有SARS-CoV-2S蛋白的包膜蛋白质粒，再构建包装质粒，最后构建转移质粒，获得SARS-CoV-2假病毒包装质粒系统；
S2将SARS-CoV-2假病毒包装质粒系统与睡美人转座酶表达质粒混合通过水动力注射的方式转染小鼠肝细胞，然后睡美人转座子系统将SARS-CoV-2假病毒包装所需序列以剪切粘贴的方式整合到小鼠肝细胞的基因组。


2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2具体步骤为：将睡美人转座子表达质粒与步骤S1构建的假病毒包装质粒系统按比例混合后，从尾静脉采用水动力注射进小鼠体内，获得在小鼠体内持续生产的SARS-CoV-2假病毒...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢鹏，胡策，叶钊成，
申请(专利权)人：广州吉妮欧生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44