阻断或减弱水稻OsMIR394基因表达以改良水稻籽粒性状的方法技术

本发明专利技术属于植物生物技术领域，具体涉及阻断或减弱水稻OsMIR394基因表达以改良水稻籽粒性状的方法。本发明专利技术要解决的技术问题是，改良水稻籽粒性状。为了解决该技术问题，提供的技术方案是通过阻断或者减弱水稻中OsMIR394的表达，提高水稻籽粒性状的方法。本发明专利技术方法能得到籽粒千粒重、粒长或粒宽增加的水稻突变体，表明其籽粒性状得到了很大的改良，在水稻的品质改良以及基因组功能研究和应用方面具有很好的前景。

【技术实现步骤摘要】
阻断或减弱水稻OsMIR394基因表达以改良水稻籽粒性状的方法
本专利技术属于植物生物
，具体涉及阻断或减弱水稻OsMIR394基因表达以改良水稻籽粒性状的方法。
技术介绍
MicroRNAs(miRNAs)是真核生物中一类非编码内源小分子RNA长度约为20-24个核苷酸的非编码单链RNA分子(大多为21个核苷酸)。大多数miRNA基因以单拷贝、多拷贝或基因簇的形式存在于基因组中，经RNA聚合酶II转录为长约300-1000个碱基的初级miRNA(primarymiRNA，pri-miRNA)，接着加工为长约70-90个碱基含茎环结构的前体miRNA(pre-miRNA)，然后再经过Dicer酶酶切，成为长约20-24个碱基的成熟miRNA。成熟的miRNA随后组装进RNA诱导沉默复合体(RNA-inducedsilencingcomplex，RISC)，通过碱基互补配对的方式识别并集合靶基因mRNA，根据互补程度的不同指导RISC降解靶mRNA(完全互补)或者阻遏靶mRNA翻译(不完全互补)，从而参与真核生物的转录后基因表达调控本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.改良水稻籽粒性状的方法，其特征在于：阻断或者减弱水稻中OsMIR394基因的表达，提高水稻籽粒性状。/n

【技术特征摘要】
1.改良水稻籽粒性状的方法，其特征在于：阻断或者减弱水稻中OsMIR394基因的表达，提高水稻籽粒性状。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的阻断或者减弱水稻中OsMIR394基因的表达通过敲除水稻OsMIR394基因或者干扰OsMIR394基因表达产物的作用进行；优选的，敲除水稻基因组中的OsMIR394基因的方法为基因组编辑法、同源重组法或随机插入突变法中的至少一种进行；更优选的，所述的基因组编辑法包括巨大核酸酶(Meganuclease)法、ZFN法、TALEN法或CRISPR-Cas法中的至少一种。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：当使用CRISPR-Cas法敲除水稻基因组中的OsMIR394基因时，包括以下步骤：
a、设计针对水稻OsMIR394基因的向导RNA；
b、构建可表达该向导RNA的Cas编辑表达载体；
c、用步骤a的得到的表达载体转化水稻，利用CRISPR-Cas基因编辑体系得到转化植株；
d、收集转化植株的种子，筛选出水稻OsMIR394基因定向编辑突变体种子，即得提高籽粒性状的水稻突变体；
优选的，所述的CRISPR-Cas法包括CRISPR-Cas9、CRISPR-Cas12a或CRISPR-Cas12b中的至少一种。


4.根据权利要求3所述的方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：周建平，张勇，郑雪莲，祁彩燕，
申请(专利权)人：成都极谷基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51