长链非编码RNA LINC01141在制备治疗肝癌药物组合物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了长链非编码RNA LINC01141在制备治疗肝癌药物组合物中的应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术通过实验发现通过siRNA抑制LINC01141能够显著的抑制肝癌细胞的细胞增殖，因此该siRNA可以用作制备新的治疗肝癌患者的治疗药物，并且具有重要的临床价值和应用前景。

【技术实现步骤摘要】
长链非编码RNALINC01141在制备治疗肝癌药物组合物中的应用本案为分案申请，原申请的专利技术名称为：一种用于检测肝癌的长非编码RNA基因标志物及其应用，原申请的申请日为：2020-03-20，原申请的申请号为：202010200141.3。
本专利技术属于生物医学
，尤其涉及长链非编码RNALINC01141在制备治疗肝癌药物组合物中的应用。
技术介绍
肝癌是目前临床上最为常见的癌症之一。肝癌每年的死亡率居全世界恶性肿瘤中的第三位，新发病率居全世界恶性肿瘤中的第五位，且肝癌的发生呈现出迅猛增加的趋势。肝癌的发病与病毒感染、非酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、遗传和环境因素等有关。大多数的肝癌患者是在晚期阶段被确诊治疗，所以患者的生存率较低。早诊断、早治疗是提高肝癌患者生存率的关键。人类基因组中只有少量的基因能够编码蛋白质，而98%的基因虽然可以转录形成RNA，但是这些RNA无法进一步的最终形成蛋白质，这些基因转录所形成的RNA被称之为非编码RNA.之前，人们将这些非编码RNA视为转录噪音，并没有实际的具体功能。但是，最新的研究显示这些非编码RNA具有基因调控功能。长链非编码RNA是指长度大于200个碱基的非编码RNA，而且其广泛存在于多种组织中，长非编码RNA能够参与到细胞发育和代谢等多种生命功能调控途径中，包括基因重组、基因印记、细胞周期调控、染色质修饰、转录、翻译、mRNA降解等。现有的研究表明，长链非编码RNA的表达差异通常与癌症的发生、发展以及患者的术后恢复有着紧密的联系。一些异常表达的长链非编码RNA能够作为癌症的基因诊断靶标，并且可以作为癌症患者早期诊断以及为判断癌症类型提供新的依据。因此，寻找新的肝癌相关LncRNA基因标志物，对于实现肝癌患者的早期诊断和治疗具有重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供长链非编码RNALINC01141在制备治疗肝癌药物组合物中的应用。为实现上述目的本专利技术提供了一种长链非编码RNA，所述长链非编码RNA为LINC01141，LINC01141的转录本Genbank登录号为NR_033887.1。优选地，所述LINC01141的序列如SEQIDNO.1所示。优选地，所述LINC01141在肝癌中高表达。此外，本专利技术提供了长链非编码RNALINC01141在制备用于诊断肝癌的试剂盒或芯片中的应用。此外，本专利技术提供了长链非编码RNALINC01141在制备用于诊断肝癌的实时荧光定量PCR试剂盒中的应用。优选地，所述试剂盒包括利用实时荧光定量PCR检测LINC01141表达量时使用的引物。优选地，所述引物的正向序列如SEQIDNO.2所示，所述引物的反向序列如SEQIDNO.3所示。除此之外，本专利技术提供了长链非编码RNALINC01141在制备治疗肝癌药物组合物中的应用。优选地，所述药物组合包含抑制长链非编码RNALINC01141基因表达的siRNA。优选地，所述siRNA的正义链如SEQIDNO.6所示，所述siRNA的反义链如SEQIDNO.7所示。优选地，所述药物组合物还包括与所述siRNA相配伍的其他药学上可接受的载体和/或辅料，所述药学上可接受的载体和/或包括但不限于粘合剂、稀释剂、表面活性剂、填充剂。优选地，所述药物组合物的使用途径包括但不限于静脉内、口服、肌肉内和皮下。本专利技术的有益效果在于：本专利技术提供了一种诊断肝癌的分子标志物LINC01141，通过检测发现LINC01141在肝癌患者肿瘤中高表达，因此通过检测肝癌患者中的LINC01141表达能够实现肝癌的早期诊断从而提高肝癌患者生存率，而且本专利技术所提供的LINC01441基因标志物具有优异的诊断价值。其次，本专利技术提供一种LINC01141的siRNA在制备肝癌药物组合物中的应用，该药物组合物可以用作新的治疗肝癌患者的治疗药物，具有重要的临床价值和应用前景。附图说明图1LINC01141在肝癌组织和癌旁组织中的表达情况。图2LINC01141在肝癌组织和癌旁组织中表达情况的ROC曲线。图3转染LINC01141的siRNA对于肝癌HepG2细胞中LINC01141的表达影响情况。图4干扰LINC01141对于肝癌细胞HepG2细胞增殖的影响情况。图5干扰LINC1141对于肝癌细胞增殖相关蛋白Cyclin-D1和C-myc的影响情况。具体实施方法下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步详细的说明。以下实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。如无特别说明，本专利技术所涉及的技术均为分子生物学或细胞生物学常规技术手段，其中涉及的酶、试剂以及反应条件均可根据本领域技术人员的经验进行合理选择，其中涉及试剂耗材属于市售的普通产品，其中涉及的检测手段以及仪器也均为本领域技术人员所熟知并熟练掌握。实施例1检测LINC01141在肝癌组织和癌旁组织中的表达情况1.研究对象选取20例肝癌组织以及相应的癌旁组织进行实验，组织来源于青岛市肿瘤医院，所有组织标本均通过医院伦理委员会审查和批准，所有组织标本来源患者均签署知情同意书。肝癌组织经病理检测证实为肝癌（肝癌组织切除时，患者尚未进行化疗，放疗等治疗）。具体标本如下：2.组织RNA提取（1）从-80℃冰箱中取出组织标本，取约50mg组织标本放入到研钵中，加入少量的液氮，迅速的进行研磨，待组织变软后，再次加入少量液氮进行研磨，重复三次；（2）加入1mlTrizol，使用自动匀浆器匀浆2分钟，匀浆结束后，将组织标本转移至离心管中，室温放置5min；（3）12000rpm离心5min，取上清，去除沉淀；（4）加入0.2mL氯仿，震荡混匀后，室温放置15分钟；（5）4℃12000rpm离心15min；（6）取上清转移至另一个离心管中，加入等体积预冷的异丙醇混匀，混匀后冰上静置8分钟；（7）4℃12000rpm离心10分钟，去除上清，保留沉淀；（8）在沉淀中加入1ml75%乙醇，温和震荡离心管，悬浮沉淀；（9）4℃8000rpm离心5分钟，使用移液器小心的去除上清；（10）室温静置10分钟干燥RNA，之后使用50μlDEPC水溶解沉淀；（11）使用微量紫外分光光度计测定组织总RNA的纯度和浓度。3.逆转录获取cDNA（1）去除基因组DNA反应试剂：5×gDNAEraserBuffer2.0μl，gDNAEraser1.0μl，TotalRNA1.0μg，RNaseFreedH2Oupto10.0μl。反应条件：42℃2分钟，4℃。（2）逆转录反应反应试剂：步骤（1）的反应液10.0μl，PrimeScriptRTEnzymeMixI1.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种长链非编码RNA，其特征在于，所述长链非编码RNA为LINC01141。/n

【技术特征摘要】
1.一种长链非编码RNA，其特征在于，所述长链非编码RNA为LINC01141。


2.根据权利要求1所述的长链非编码RNA，其特征在于，所述LINC01141的序列如SEQIDNO.1所示。


3.根据权利要求1所述的长链非编码RNA，其特征在于，所述LINC01141在肝癌中高表达。


4.长链非编...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹爱华，
申请(专利权)人：青岛思拓新源细胞医学有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37