一种基因抑制剂在制备乳腺癌血管生成抑制药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种基因抑制剂在制备乳腺癌血管生成抑制药物中的应用，属于乳腺癌治疗技术领域。本发明专利技术所提供的基因抑制剂为linc02258的shRNA。通过实验发现linc02258

【技术实现步骤摘要】
一种基因抑制剂在制备乳腺癌血管生成抑制药物中的应用
[0001]本案为分案申请，原申请的专利技术名称为：一种降低乳腺癌转移的抑制剂，原申请的申请日为：2022
‑
06
‑
06，原申请的申请号为：CN202210627256.X。


[0002]本专利技术属于乳腺癌治疗
，尤其涉及一种基因抑制剂在制备乳腺癌血管生成抑制药物中的应用。

技术介绍

[0003]恶性肿瘤是人类健康和生活质量的主要威胁之一。在恶性肿瘤中，乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤，其发病率呈现出逐年上升的趋势，而且，乳腺癌的发病呈现出年轻化的趋势，严重的危害着女性的健康。尽管医疗条件在近几年有了显著的改善，但是乳腺癌的发病率并没有得到有效的控制，因此，对于乳腺癌的研究是十分必要的。
[0004]长期以来，基因组上不编码蛋白质的非编码区域被认为是“垃圾区域”，但是随着高通量测序技术的发展，研究发现这些非编码RNA能够转录产生大量的非编码RNA。长链非编码RNA是指缺乏开放阅读框架，长度大约200nt的非编码RNA。目前的研究表明，lncRNA可以与DNA，RNA或蛋白质分子相互作用，调节基因表达，涉及免疫学，神经生物学，癌症和应激等生物学发展过程。
[0005]linc02258是长链非编码RNA中的一种，目前尚无文献报道linc02258在乳腺癌中功能。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种降低乳腺癌转移的抑制剂。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术提供了一种降低乳腺癌细胞迁移的抑制剂，所述shRNA包括Top Strand和Bottom Strand，所述Top Strand的序列如SEQ ID NO.2所示，所述Bottom Strand的序列如SEQ ID NO.3所示。
[0008]优选地，如权利要求1所述的shRNA在制备乳腺癌细胞迁移抑制药物中的用途。
[0009]优选地，如权利要求1所述的shRNA在制备乳腺癌细胞上皮间质转化抑制药物中的用途。
[0010]其次，本专利技术提供了linc02258的靶向抑制剂在制备乳腺癌转移抑制药物中的用途。
[0011]优选地，所述linc02258的靶向抑制剂为linc02258的shRNA。
[0012]优选地，所述shRNA包括Top Strand和Bottom Strand，所述Top Strand的序列如SEQ ID NO.2所示，所述Bottom Strand的序列如SEQ ID NO.3所示。
[0013]优选地，所述药物还可以包含润滑剂、湿润剂、甜味剂、香味剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂等。
[0014]优选地，所述药物可以通过口服或非口服进行给药，作为非口服给药方式可以包
括静脉内注射、鼻腔内注射、局部注射、脑室内注射、脊髓腔注射，皮下注射，腹腔注射等。
[0015]进一步，本专利技术提供了linc02258的靶向抑制剂在制备乳腺癌上皮间质转化抑制药物中的用途。
[0016]优选地，所述linc02258的靶向抑制剂为linc02258的shRNA。
[0017]优选地，所述shRNA包括Top Strand和Bottom Strand，所述Top Strand的序列如SEQ ID NO.2所示，所述Bottom Strand的序列如SEQ ID NO.3所示。
[0018]优选地，所述药物还可以包含润滑剂、湿润剂、甜味剂、香味剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂等。
[0019]优选地，所述药物可以通过口服或非口服进行给药，作为非口服给药方式可以包括静脉内注射、鼻腔内注射、局部注射、脑室内注射、脊髓腔注射，皮下注射，腹腔注射等。
[0020]本专利技术有益效果在于：
[0021]本专利技术发现本专利技术所提供的linc02258
‑
shRNA能够有效的抑制乳腺癌细胞的迁移能力，并且linc02258
‑
shRNA能够有效的促进E
‑
cadherin的蛋白表达，并且抑制N
‑
cadherin的蛋白表达，说明linc02258
‑
shRNA能够通过抑制EMT来抑制乳腺癌细胞的迁移。因此，可将linc02258的抑制剂用于制备乳腺癌细胞转移抑制剂。
附图说明
[0022]图1为linc02258
‑
shRNA的抑制效果检测结果；
[0023]图2为linc02258
‑
shRNA对于乳腺癌血管生成影响的检测结果；
[0024]图3为linc02258
‑
shRNA对于血管内皮生长因子A蛋白表达影响的检测结果；
[0025]图4为linc02258
‑
shRNA对于乳腺癌细胞细胞迁移能力影响的检测结果；
[0026]图5为linc02258
‑
shRNA对于乳腺癌细胞EMT转化影响的检测结果。
具体实施方式
[0027]为能清楚说明本方案的技术特点，下面通过具体实施方式，对本方案进行阐述。
[0028]实施例1靶向linc02258的shRNA的抑制效果检测
[0029](1)根据linc02258的序列SEQ ID NO.1设计linc02258的shRNA(质粒为pENTR
TM
/U6)，本专利技术所设计的linc02258
‑
shRNA由如下所示的序列构建得到:
[0030]Top Strand:
[0031]5'
‑
CACCGCTAATTTCTCTACCCTACTGCGAACAGTAGGGTAGAGAAAT TAGC
‑
3',SEQ ID NO.2；
[0032]Bottom Strand:
[0033]5'
‑
AAAAGCTAATTTCTCTACCCTACTGTTCGCAGTAGGGTAGAGAAAT TAGC
‑
3',SEQ ID NO.3；
[0034](2)将乳腺癌细胞MDA
‑
MB
‑
231接种6孔细胞培养板中，空白对照组不进行转染，NC对照组转染NC
‑
shRNA，实验组转染linc02258
‑
shRNA，转染完后，将细胞置于细胞培养箱中，6小时去除转染培养基，添加含10％ FBS的完全培养基，置于细胞培养箱中继续培养；
[0035](3)继续培养48h之后，将细胞取出，提取RNA，进行荧光定量PCR检测；
[0036](4)LINC02258的引物序列如下所示：
[0037]5’‑
ACCACCACCAACGTTCACAT
‑3’
，SEQ ID NO.4；
[0038]5’‑
TGCTGGA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基因抑制剂在制备乳腺癌血管生成抑制药物中的用途，其特征在于，所述基因抑制剂为linc02258抑制剂，所述linc02258的碱基序列如SEQ ID NO.1所示；所述linc02258抑制剂为linc02258的shRNA，所述shRNA的Top Strand如SEQ ID NO.2所示，所述shRNA的Bottom Strand如SEQ ID NO.3所示。2.linc02258抑制剂用于制备乳腺癌血管内皮生长因子A表达抑制药物的用途，其特征在于，所述linc02258的碱基序列如SEQ ID NO.1所示；所述linc02258...

【专利技术属性】
技术研发人员：请求不公布姓名，
申请(专利权)人：青岛思拓新源细胞医学有限公司，
类型：发明
国别省市：