双重实时荧光定量PCR鉴定布鲁氏菌S2疫苗株的方法及其使用的成套试剂技术

技术编号:26218015 阅读:93 留言:0更新日期:2020-11-04 10:20
本发明专利技术公开了双重实时荧光定量PCR鉴定布鲁氏菌S2疫苗株的方法及其使用的成套试剂。成套试剂由引物Bru‑F1、引物Bru‑R1、探针Bru‑Probe1、引物S2‑F2、引物S2‑R2和探针S2‑Probe2组成,核苷酸序列依次如SEQ ID NO:1—SEQ ID NO:6所示。与其他布鲁氏菌核酸检测方法相比,本发明专利技术建立的方法是直接通过荧光信息对布鲁氏菌S2疫苗株进行定性、定量,且同时进行分析鉴定,具有便捷、准确、灵敏、特异等优点,大大缩短了检测时间,对于布鲁氏菌病的防控具有重大的应用价值,有助于从源头控制疫情、有效预防布病疫情的大规模爆发,保障畜牧业的发展和公共卫生安全。

【技术实现步骤摘要】
双重实时荧光定量PCR鉴定布鲁氏菌S2疫苗株的方法及其使用的成套试剂
本专利技术属于生物
,具体涉及双重实时荧光定量PCR鉴定布鲁氏菌S2疫苗株的方法及其使用的成套试剂。
技术介绍
布鲁氏菌病(简称布病)是由布鲁氏菌(Brucellaspp.)引起的一种重要的人畜共患传染病。布病在畜群和人间布病感染率逐年上升,并在维持在较高水平,持续对公共卫生安全和畜牧业的发展构成危害。疫苗免疫是流行率较高的地区控制布鲁氏菌病的最有效的方法之一。根据原农业部和卫计委印发的《国家布鲁氏菌病防治计划(2016-2020年)》的相关规定,对一类地区的牛羊场群采取全面免疫,奶畜原则上不免疫的措施。我国目前使用的布病疫苗主要有布鲁氏菌A19疫苗、布鲁氏菌S2疫苗和布鲁氏菌M5疫苗。其中布鲁氏菌S2疫苗是使用最多的布病疫苗,同时也是唯一一种可以对怀孕动物进行免疫的疫苗。动物布病的检测主要以血清学检测方法为主,但是现有血清学检测方法与大肠杆菌、耶尔森菌的部分血清型存在交叉反应,同时我国所使用的布病疫苗产生的免疫抗体和野毒株自然感染抗体无法进行区本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.鉴定布鲁氏菌S2疫苗株的成套试剂,为成套试剂2和/或成套试剂1;/n所述成套试剂2包括引物Bru-F1、引物Bru-R1、探针Bru-Probe1、引物S2-F2、引物S2-R2和探针S2-Probe2;/n所述成套试剂1包括所述引物Bru-F1、所述引物Bru-R1、所述探针Bru-Probe1、引物S2-F1、引物S2-R1和探针S2-Probe1;/n所述引物Bru-F1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;/n所述引物Bru-R1的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;/n所述探针Bru-Probe1的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;/n所述引物S2-F2的核苷酸序列...

【技术特征摘要】
1.鉴定布鲁氏菌S2疫苗株的成套试剂,为成套试剂2和/或成套试剂1;
所述成套试剂2包括引物Bru-F1、引物Bru-R1、探针Bru-Probe1、引物S2-F2、引物S2-R2和探针S2-Probe2;
所述成套试剂1包括所述引物Bru-F1、所述引物Bru-R1、所述探针Bru-Probe1、引物S2-F1、引物S2-R1和探针S2-Probe1;
所述引物Bru-F1的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示;
所述引物Bru-R1的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示;
所述探针Bru-Probe1的核苷酸序列如SEQIDNO:3所示;
所述引物S2-F2的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示;
所述引物S2-R2的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示;
所述探针S2-Probe2的核苷酸序列如SEQIDNO:6所示;
所述引物S2-F1的核苷酸序列如SEQIDNO:7所示;
所述引物S2-R1的核苷酸序列如SEQIDNO:8所示;
所述探针S2-Probe1的核苷酸序列如SEQIDNO:9所示。


2.如权利要求1所述的成套试剂,其特征在于:
所述探针Bru-Probe1的5′末端具有荧光报告基团甲,3′末端具有荧光淬灭基团甲;
所述探针S2-Probe2的5′末端具有荧光报告基团乙,3′末端具有荧光淬灭基团乙;
所述探针S2-Probe1的5′末端具有荧光报告基团丙,3′末端具有荧光淬灭基团丙。


3.如权利要求1或2所述的成套试剂,其特征在于:
所述成套试剂2由所述引物Bru-F1、所述引物Bru-R1、所述探针Bru-Probe1、所述引物S2-F2、所述引物S2-R2和所述探针S2-Probe2组成;
所述成套试剂1由所述引物Bru-F1、所述引物Bru-R1、所述探针Bru-Probe1、所述引物S2-F1、所述引物S2-R1和所述探针S2-Probe1组成。


4.权利要求1至3任一所述的成套试剂的应用,为e1)-e3)中的至少一种:
e1)制备用于鉴定或辅助鉴定布鲁氏菌S2疫苗株的试剂盒;
e2)鉴定或辅助鉴定待测样品中是否含有或疑似含有布鲁氏菌S2疫苗株;<...

【专利技术属性】
技术研发人员:董浩原霖王传彬顾小雪魏巍韩焘赵柏林毕一鸣徐琦
申请(专利权)人:中国动物疫病预防控制中心农业农村部屠宰技术中心
类型:发明
国别省市:北京;11

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