一种沙门氏菌核酸检测质粒DNA参考样品、制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种沙门氏菌核酸检测质粒DNA参考样品、制备方法及其应用，属于微生物检测领域，该参考样品采用包含来源于沙门氏菌的肠伤寒特异性序列se、鼠伤寒特异性序列st以及共有的aceA基因的片段插入质粒中形成，各基因以1:1:1比例串联，基因间以不相关的基因片段进行隔开；本参考品包含明确的se、st、aceA三种检测基因片段，序列来源清晰，而且均按照单拷贝方式保存于质粒中，不仅可以用于定性检测，还可以作为量值可溯源的参考品进行试剂性能鉴定和实验室之间能力评价。

【技术实现步骤摘要】
一种沙门氏菌核酸检测质粒DNA参考样品、制备方法及其应用
本专利技术涉及微生物检测领域，特别是涉及一种沙门氏菌核酸检测质粒DNA参考样品、制备方法及其应用。
技术介绍
沙门菌(salmonella,Sa)属于肠杆菌科，是威胁人类及动物健康的食源性致病微生物，能够引起伤寒、副伤寒、肠胃炎及败血症等严重疾病。在世界各国细菌性食物中毒病例中，其引起的食物中毒常居榜首或第二位。沙门氏菌在日常生活中非常常见，如在生鸡蛋壳、家禽，红肉中，除此之外，被污染的水是全世界沙门氏菌的主要来源。有数据已经证实在发展中国家约有2000万人感染沙门氏菌，同样的在美国，德国等国家也是沙门氏菌的多发地。沙门氏菌的血清型有超过2500种，但是英国的一项调查表明，肠炎沙门菌(salmonellaenteritidis,SE)和鼠伤寒沙门菌(salmonellatyphimurium,ST)感染占到人类Sa感染患者的75％以上。因此，快速鉴定并确定沙门氏菌的型别，对食品安全具有重要的意义。目前沙门氏菌的检测方法在不断的快速发展中，聚合酶链式反应(PCR)等核酸检测技术的不本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种沙门氏菌核酸检测质粒DNA参考样品，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示；/n其采用包含来源于不同沙门氏菌菌株的肠伤寒特异性序列se、鼠伤寒特异性序列st以及共有的aceA基因的片段插入质粒中形成；/n所述se、st、aceA基因以1:1:1比例串联；/n所述se、st、aceA基因间以不相关的基因片段进行隔开。/n

【技术特征摘要】
1.一种沙门氏菌核酸检测质粒DNA参考样品，其特征在于，其核苷酸序列如SEQIDNo.1所示；
其采用包含来源于不同沙门氏菌菌株的肠伤寒特异性序列se、鼠伤寒特异性序列st以及共有的aceA基因的片段插入质粒中形成；
所述se、st、aceA基因以1:1:1比例串联；
所述se、st、aceA基因间以不相关的基因片段进行隔开。


2.根据权利要求1所述的沙门氏菌核酸检测质粒DNA参考样品，其特征在于，在260nm和280nm处的光密度值比值在1.8-2.0之间。


3.根据权利要求1所述的沙门氏菌核酸检测质粒DNA参考样品，其特征在于，所述不相关的基因片段的核苷酸序列为aagtcg。


4.一种权利要求1-3任一项所述的沙门氏菌核酸检测质粒DNA参考样品的制备方法，其特征在于，包括：
人工合成沙门氏菌基因s...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁慕云，许龙岩，陈瑶，郝文波，刘二龙，
申请(专利权)人：广州海关技术中心，
类型：发明
国别省市：广东;44