一种GBS DNA核酸检测方法技术

本发明专利技术公开了一种GBS DNA核酸检测方法，包括以下步骤：在无菌涤纶拭子管中加入生理盐水，混匀制成标本悬浮液；13000rpm离心10min弃上清；沉淀加无水乙醇，混匀，10000‑13000rpm离心5‑10min弃上清；沉淀加无菌生理盐水，混匀，13000rpm离心5min弃上清；沉淀加入DNA提取液，混匀，加热处理；13000rpm离心10min，取上清；向PCR反应管中加入待测样品后瞬时离心；将PCR反应管置于实时荧光定量PCR仪中，进行扩增反应，根据扩增曲线进行结果判读。本发明专利技术步骤简单，且易于推广，使用本发明专利技术方法后提高了2.4%左右的检出率，更有利于临床指导用药，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种GBSDNA核酸检测方法
本专利技术涉及核酸检测方法领域，具体是一种GBSDNA核酸检测方法。
技术介绍
B族链球菌为兼性厌氧的革兰氏阳性链球菌，正常寄居于阴道和直肠，正常妇女带菌率达30%左右，属于条件致病菌，孕妇可感染并通过产道传播给新生儿，引起新生儿败血症、脑膜炎、肺炎等，死亡率极高，是目前引发新生儿感染最主要的致病菌之一。患者会采集两个采样部位的标本送检，采取部位有直肠和阴道，往往会采集到较多的粪便/分泌物，会导致实验结果受到抑制，无扩增曲线。
技术实现思路
本专利技术就是为了解决上述技术问题，所提供了一种GBSDNA核酸检测方法。本专利技术是按照以下技术方案实现的。一种GBSDNA核酸检测方法，包括以下步骤：a.在无菌涤纶拭子管中加入生理盐水，混匀制成标本悬浮液；b.取出全部样品，13000rpm离心10min弃上清；c.步骤b中获得的沉淀加无水乙醇，混匀，10000-13000rpm离心5-10min弃上清；d.步骤c中获得的沉淀加无菌生理盐水，混匀，13000本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种GBS DNA核酸检测方法，其特征在于：包括以下步骤：/na.在无菌涤纶拭子管中加入生理盐水，混匀制成标本悬浮液；/nb.取出全部样品，13000rpm离心10min弃上清；/nc.步骤b中获得的沉淀加无水乙醇，混匀，10000-13000rpm离心5-10min弃上清；/nd.步骤c中获得的沉淀加无菌生理盐水，混匀，13000rpm离心5-10min弃上清；/ne.步骤d中获得的沉淀加入DNA提取液，混匀，加热处理；/nf.13000rpm离心10min，吸取上清保存；/ng.向PCR反应管中加入步骤f中获得的待测样品后瞬时离心；/nh.将PCR反应管置于实时荧光定量PCR仪中，进行...

【技术特征摘要】
1.一种GBSDNA核酸检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
a.在无菌涤纶拭子管中加入生理盐水，混匀制成标本悬浮液；
b.取出全部样品，13000rpm离心10min弃上清；
c.步骤b中获得的沉淀加无水乙醇，混匀，10000-13000rpm离心5-10min弃上清；
d.步骤c中获得的沉淀加无菌生理盐水，混匀，13000rpm离心5-10min弃上清；
e.步骤d中获得的沉淀加入DNA提取液，混匀，加热处理；
f.13000rpm离心10min，吸取上清保存；
g.向PCR反应管中加入步骤f中获得的待测样品后瞬时离心；
h.将PCR反应管置于实时荧光定量PCR仪中，进行扩增反应，根据扩增曲线进行结果判读。


2.根据权利要求1所述的一种GBSDNA核酸检测方法，其特征在于：步骤c中，离心条件为13000rpm离心5min。


3.根据权利要求1所述的一种GBSDNA核酸检测方法，其特征在于：步骤e...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯利花，陈建春，周剑峰，李行，贾晓冬，郑宏刚，王超，
申请(专利权)人：天津金域医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12