伯氏疏螺旋体核酸检测用引物、试剂盒、应用及其检测方法技术

本发明专利技术公开一种伯氏疏螺旋体核酸检测用引物、试剂盒、应用及其检测方法，其特征在于：包括一组特定引物和一条探针，其中一组特定引物的序列分别为：引物1：5’‑TCTTTTCTCTGGTGAGGGAGCT‑3’；引物2：5’‑CCTTCCTGTTGAACACCCTCT‑3’；探针序列为：5’‑FAM‑AAACTGCTCAGGCTGCACCGGTTC‑BHQ1‑3’。本发明专利技术利用特定的一组引物和探针即可检测伯氏疏螺旋体多种亚型，具有简单、方便、快速、准确、高效的优点。

【技术实现步骤摘要】
伯氏疏螺旋体核酸检测用引物、试剂盒、应用及其检测方法
本专利技术涉及一种伯氏疏螺旋体核酸检测用引物、试剂盒、应用及其检测方法，样本封闭，避免交叉污染；本试剂盒具有抗干扰作用强，特异性、专一性强，避免假阳性结果；本专利技术最低检出限原虫率可达1％，扩增过程采用人源管家基因做内标质控品，避免核酸提取额外添加，降低人为操作干扰风险。
技术介绍
莱姆病是一种以蜱为媒介的螺旋体感染性疾病，是由伯氏疏螺旋体所致的自然疫源性疾病。我国于1985年首次在黑龙江省林区发现本病病例，以神经系统损害为该病最主要的临床表现。其神经系统损害以脑膜炎、脑炎、颅神经炎、运动和感觉神经炎最为常见。其中一期莱姆病仅用抗生素即可奏效，至二期、三期用抗生素无济于事，特别是神经系统损害更乏特效疗法。早期以皮肤慢性游走性红斑为特点，以后出现神经、心脏或关节病变，通常在夏季和早秋发病，可发生于任何年龄，男性略多于女性。发病以青壮年居多，与职业相关密切。以野外工作者、林业工人感染率较高。伯氏疏螺旋体，螺旋体科疏螺旋体属的一种病原体，与梅毒同属于螺旋体科(梅毒螺旋体是密螺旋体属)，有本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种伯氏疏螺旋体核酸检测用引物，其特征在于：包括一组特定引物和一条探针，其中一组特定引物的序列分别为：/n引物1：5’-TCTTTTCTCTGGTGAGGGAGCT-3’；/n引物2：5’-CCTTCCTGTTGAACACCCTCT-3’；/n探针序列为：5’-FAM-AAACTGCTCAGGCTGCACCGGTTC-BHQ1-3’。/n

【技术特征摘要】
1.一种伯氏疏螺旋体核酸检测用引物，其特征在于：包括一组特定引物和一条探针，其中一组特定引物的序列分别为：
引物1：5’-TCTTTTCTCTGGTGAGGGAGCT-3’；
引物2：5’-CCTTCCTGTTGAACACCCTCT-3’；
探针序列为：5’-FAM-AAACTGCTCAGGCTGCACCGGTTC-BHQ1-3’。


2.根据权利要求1所述的伯氏疏螺旋体核酸检测用引物，其特征在于：利用人HAPB管家基因序列设计引物探针，作为试剂盒内标，检测核酸提取过程，内标探针采用CY5荧光基团标记。


3.一种以权利要求1所述的引物和探针作为内标的试剂盒。


4.一种权利要求1所述的引物和探针在伯氏疏螺旋体核酸检测试剂盒中的应用。


5.一种伯氏疏螺旋体核酸的检测方法，其特征在于：具体的包括：
(1)提取样品核酸；
(2)加样：将样品核酸、阳性对照或阴性对照分别加入装有PCR反应体系的PCR管中，获得对应的样品反应管、阳性反应管或阴性反应管，所述PCR反应体系中含有前述伯氏疏螺旋体检测引物及探针；
(3)...

【专利技术属性】
技术研发人员：金永楠，肖兰，刘阳，
申请(专利权)人：杭州美康盛德医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33