本发明专利技术涉及来源于栖水菌属细菌的囊泡及其用途，并且本发明专利技术人已经通过实验证实了在从患有胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化和糖尿病的患者获得的临床样品中的囊泡与正常个体相比显著减少，并且当施用从菌株中分离的囊泡时，由病原囊泡(例如来源于大肠杆菌的囊泡)引起的炎性介质的分泌被显著抑制。因此，期望根据本发明专利技术的来源于栖水菌属细菌的囊泡可有效地用于诊断胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化或糖尿病的方法以及开发用于预防、减轻或治疗所述疾病的组合物。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】来源于栖水菌种细菌的纳米囊泡及其用途
本专利技术涉及来源于栖水菌属(Enhydrobacter)的细菌的纳米囊泡及其用途，更具体地，涉及通过使用来源于栖水菌属细菌的纳米囊泡来诊断胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化或糖尿病的方法，以及包含所述囊泡的用于预防、减轻或治疗所述疾病的组合物。
技术介绍
自21世纪初以来，在过去被认为是流行病的急性传染病已变得不那么重要，而由于人类与微生物群落之间的不和谐而导致的伴随免疫功能障碍的慢性炎性疾病已经改变疾病模式，成为决定生活质量和人类寿命的主要疾病。作为21世纪的顽固性慢性疾病，癌症、心血管疾病、慢性肺部疾病、代谢性疾病和神经精神疾病已成为国家公共卫生的重要问题，成为决定人类寿命和生活质量的主要疾病。众所周知，人体中共存的微生物数量已达到100万亿，是人体细胞数量的10倍，微生物基因数量是人体基因数量的100倍以上。微生物群或微生物组是指微生物群落，包括存在于给定栖息地中的细菌，古细菌和真核生物。我们体内共存的细菌和周围环境中存在的细菌会分泌纳米大小的囊泡，以便与其他细胞交换有关基因、低分子化合物、蛋白质等的信息。粘膜形成物理防御膜，尺寸为200纳米(nm)或更大的颗粒无法通过该物理防御膜，因此，共存于粘膜中的细菌不能通过粘膜，但来源于细菌的囊泡的大小为100纳米或更小并通过粘膜相对自由地穿过上皮细胞后被吸收到我们体内。由细菌局部分泌的来源于细菌的囊泡经粘膜上皮细胞吸收，从而引起局部炎症反应，而穿过上皮细胞的囊泡经淋巴管系统吸收，从而分布在各个器官中，并且免疫和炎性反应在分布有囊泡的器官中受到调节。例如，来源于诸如大肠杆菌的致病性革兰氏阴性细菌的囊泡局部引起炎性反应和癌症，并且在被吸收到血管中时，通过血管内皮炎症反应促进全身性炎症反应和血液凝固，以及在被吸收到胰岛素作用肌细胞中时引起胰岛素耐受性和糖尿病。另一方面，来源于有益细菌的囊泡可通过控制由致病性囊泡引起的免疫功能障碍和代谢功能障碍来控制疾病。作为对来源于细菌的囊泡等因子的免疫应答，以白介素(以下称IL)-17细胞因子的分泌为特征的Th17免疫应答发生，并且在暴露于来源于细菌的囊泡时分泌IL-6，从而诱导Th17免疫应答。由Th17免疫应答引起的炎症的特征在于嗜中性粒细胞浸润，并且在发生炎症的过程中，从炎症细胞(如巨噬细胞)分泌的肿瘤坏死因子-α(以下称为TNF-α)起着重要的作用。栖水菌属细菌是革兰氏阴性细菌，其属于α-变形菌纲(Alphaproteobacteria)。气囊栖水菌(Enhydrobacteraerosaccus)是唯一属于栖水菌属(genusEnhydrobacter)的种，其被称为过氧化氢酶阳性细菌和氧化酶阳性细菌。但是，尚未报道从栖水菌属细菌将囊泡分泌到细胞外的事实，并且没有将栖水菌属细菌用于诊断和治疗顽固性疾病如癌症、心血管疾病和糖尿病的情况。
技术实现思路
【技术问题】作为认真研究以解决所述常规问题的结果，专利技术人证实，通过宏基因组分析，与正常人相比，在从来源于患有胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化和糖尿病的患者获得的样品中，来源于栖水菌属细菌的囊泡的含量显著降低。此外，已经证实，当用从气囊栖水菌(Enhydrobacteraerosaccus)中分离出囊泡以处理巨噬细胞时，由致病性囊泡介导的IL-6和TNF-α分泌被显著抑制，并且基于此，完成了本专利技术。因此，本专利技术的目的是提供一种提供用于诊断胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化或糖尿病的信息的方法。此外，本专利技术的另一个目的是提供用于预防、减轻或治疗胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化或糖尿病的组合物，其包含作为活性成分的来源于栖水菌属细菌的囊泡。然而，本专利技术要实现的技术问题不限于上述问题，并且本领域技术人员根据以下描述可以清楚地理解未提及的其他问题。【技术方案】为了实现上述本专利技术的目的，本专利技术提供了一种提供用于诊断胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化或糖尿病的信息的方法，该方法包括以下步骤：(a)从分离自正常个体样品和受试者样品的细胞外囊泡中提取DNA；(b)使用基于在16SrDNA中存在的基因序列制备的成对的引物对所提取的所述DNA进行聚合酶链式反应(PCR)以获得每种PCR产物；以及(c)通过对所述PCR产物的定量分析将其中来源于所述栖水菌属细菌的细胞外囊泡的含量低于所述正常个体样品的情况分类为胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化或糖尿病。另外，本专利技术提供了一种诊断胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化或糖尿病的方法，该方法包括以下步骤：(a)从分离自正常个体样品和受试者样品的细胞外囊泡中提取DNA；(b)使用基于在16SrDNA中存在的基因序列制备的成对的引物对所提取的所述DNA进行聚合酶链式反应(PCR)以获得每种PCR产物；以及(c)通过对所述PCR产物的定量分析将其中来源于所述栖水菌属细菌的细胞外囊泡的含量低于所述正常个体样品的情况确定为胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化或糖尿病。作为本专利技术的一个示例性实施方案，步骤(a)中的样品可以是血液。作为本专利技术的另一个实施方案，步骤(b)中的成对的引物可以是SEQIDNo.1和SEQIDNo.2的引物。此外，本专利技术提供了用于预防或治疗胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、慢性肝病或糖尿病的药物组合物，其包含作为活性成分的来源于所述栖水菌属细菌的囊泡。另外，本专利技术提供了一种用于预防或减轻胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、慢性肝病或糖尿病的食品组合物，其包含作为活性成分的来源于所述栖水菌属细菌的囊泡。此外，本专利技术提供了来源于所述栖水菌属细菌的囊泡在预防或治疗胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、慢性肝病或糖尿病中的用途。此外，本专利技术提供了一种预防或治疗胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、慢性肝病或糖尿病的方法，该方法包括以下步骤：向受试者施用包含作为活性成分的来源于所述栖水菌属细菌的囊泡的药物组合物。在本专利技术的又一实施方案中，囊泡的平均直径可以为10至200nm。在本专利技术的另一个实施方案中，囊泡可以从栖水菌属细菌中天然或人工地分泌。在本专利技术的另一个实施方案中，来源于栖水菌属细菌的囊泡可以是来源于气囊栖水菌(Enhydro本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种提供用于诊断胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化或糖尿病的信息的方法，该方法包括以下步骤：/n(a)从分离自正常个体样品和受试者样品的细胞外囊泡中提取DNA；/n(b)使用基于在16S rDNA中存在的基因序列制备的成对的引物对所提取的所述DNA进行聚合酶链式反应(PCR)以获得每种PCR产物；以及/n(c)通过对所述PCR产物的定量分析将其中来源于栖水菌属细菌的细胞外囊泡的含量低于所述正常个体样品的情况分类为胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化或糖尿病。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180305 KR 10-2018-0026037;20190304 KR 10-2019-001.一种提供用于诊断胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化或糖尿病的信息的方法，该方法包括以下步骤：
(a)从分离自正常个体样品和受试者样品的细胞外囊泡中提取DNA；
(b)使用基于在16SrDNA中存在的基因序列制备的成对的引物对所提取的所述DNA进行聚合酶链式反应(PCR)以获得每种PCR产物；以及
(c)通过对所述PCR产物的定量分析将其中来源于栖水菌属细菌的细胞外囊泡的含量低于所述正常个体样品的情况分类为胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、肝硬化或糖尿病。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(a)中的所述样品是血液。
3.用于预防或治疗选自由胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、心肌病、心房颤动、变异型心绞痛、慢性肝病和糖尿病组成的群组中的一种或多种疾病的药物组合物，其包含作为活性成分的来源于所述栖水菌属细菌的囊泡。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其中，所述囊泡的平均直径为10至200nm。
5.根据权利要求3所述的药物组合物，其中，所述囊泡是从所述栖水菌属细菌天然或人工分泌的。
6.根据权利要求3所述的药物组合物，其中，所述来源于所述栖水菌属细菌的囊泡是来源于气囊栖水菌(Enhydrobacteraerosaccus)的囊泡。
7.用于预防或减轻选自由胰腺癌、胆管癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、心肌梗塞、...
【专利技术属性】
技术研发人员：金润根，
申请(专利权)人：MD保健株式会社，
类型：发明
国别省市：韩国;KR
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