一种对亲水气单胞菌血清型O抗原分子分型的检测方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种对亲水气单胞菌血清型O抗原分子分型的检测方法及应用。本发明专利技术以亲水气单胞菌O抗原基因簇特异基因为靶基因，设计并筛选了用于亲水气单胞菌的O抗原分型的引物及MGB探针，并建立了相应的实时荧光PCR（RT‑PCR）检测方法，为利用分子生物学手段对亲水气单胞菌的O抗原分型提供一条可信的途径。利用本发明专利技术的MGB探针检测水中的亲水气单胞菌，并且对其进行O抗原分型，具有高灵敏度、高特异性及快速检测等诸多优点。

【技术实现步骤摘要】
一种对亲水气单胞菌血清型O抗原分子分型的检测方法及应用
本专利技术涉及对亲水气单胞菌株O抗原分型的Taqman-MGB技术及其制备方法。本专利技术还设计利用所述的MGB探针进行检测的方法。
技术介绍
亲水气单胞菌为革兰氏阴性杆菌，是一种机会性致病菌。但近年来的研究表明在宿主全身和局部防御功能减退时可作为一重要致病菌而引致较严重的感染，甚至有可能致命。本菌属于类弧菌科，有单鞭毛，菌体两端钝圆，广泛存在于自然界，在水和土壤中、河水、湖水、海水、游泳池水和供水系统中均可分离出本菌。在鱼类等变温动物中它是最常见的机会性病原体，也是一种重要的人类病原体。已知不同菌株的亲水气单胞菌不仅会引起皮肤感染和胃肠炎，还会引起全身性问题，如脑膜炎、腹膜炎、坏死性筋膜炎和溶血性尿毒症综合征。免疫功能低下的肝病、创伤或癌症患者被认为有发生致命性亲水气单胞菌感染和脓毒症的高风险。亲水气单胞菌感染的发病机制非常复杂，有很多因素，依赖于几个毒力因子，如O抗原、荚膜、脂多糖(LPS)、S层蛋白质、外毒素、铁结合系统和分泌系统。在这些毒力因子中，细菌细胞表面存在的荚膜多糖本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种对样品中亲水气单胞菌血清型O抗原分型的Taqman特异性引物，其特征在于具有SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:16所示的核苷酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种对样品中亲水气单胞菌血清型O抗原分型的Taqman特异性引物，其特征在于具有SEQIDNO:1-SEQIDNO:16所示的核苷酸序列。


2.一种含有权利要求1所述特异性引物的MGB探针，该探针含有5'报告染料（FAM）和3'非荧光猝灭剂（NFQ），在3'末端与小沟结合物（MGB）缀合；其主要特征在于具有SEQIDNO:17-...

【专利技术属性】
技术研发人员：王磊，鲁阁阁，王敏，刘斌，郭玺，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：天津;12