一种测定细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物的方法技术

技术编号:2620866 阅读:437 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种测定细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物的方法,它涉及了一种测定细菌产酶诱导物的方法。本发明专利技术解决了目前缺乏一个有效的测定细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物的方法。本发明专利技术测定细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物的方法按照如下步骤进行:一、各种碳源对纤维素酶产生的诱导作用;二、在菌株的对数生长期内获得菌体;三、细菌胞内酶和胞膜酶的制备;四、各酶制备物与底物的反应;五、高效液相色谱;与标准品的保留时间相同的即为细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物。本发明专利技术的方法可明确细菌胞内产纤维素酶的胞内碳源诱导物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种测定细菌产酶诱导物的方法。技术背景纤维素酶是多酶体系,受着复杂的代谢调控。酶产量及酶的比活力低一直 是影响纤维素酶实际应用的一个重要原因,阐明纤维素酶诱导形成的机制和调 节控制的原理,不仅有着理论上的意义,而且将为改变培养条件提高纤维素酶 产量,设计筛选模型选育高产菌种提供新的线索和手段。过去人们对纤维素酶的诱导调节机制的研究多集中于木霉(rn'c/20&rmfl)等少数真菌菌株,有关 细菌产生纤维素酶的机制了解得非常少。在真菌纤维素酶的研究中,虽发现了 几种可诱导菌体产生纤维素酶的诱导物,但难以用真菌的诱导机理来解释细菌 的诱导现象。因为, 一方面目前人们对什么是纤维素酶合成的真正诱导物仍然 存有争议,在以往所报道的文献中出现了很多有关何种物质是诱导物的报道; 另一方面不能够确定胞外可诱导产酶的碳源在进入到细胞后,是否被胞壁酶或 胞内酶转化为其它物质而起诱导作用或胞外诱导物不经任何转化而直接进入 胞内起诱导作用。目前缺乏一个有效的测定细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物 的方法。
技术实现思路
本专利技术是为了解决目前缺乏一个有效的测定细菌产纤维素酶的胞内碳源本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物的方法,其特征在于测定细菌产纤维素酶的胞内碳源诱导物的方法按照如下步骤进行:一、各种碳源对纤维素酶产生的诱导作用:在待测细菌的诱导产酶无机盐培养基中分别添加不同的碳源,使碳源的体积浓度均为0.5%,用4mL无菌水将菌体斜面培养物制成菌悬液,然后取0.3mL菌悬液平行接入装有30mL发酵培养基的两个150mL三角瓶中,在30℃的条件下,以170r/min的速度进行振荡培养,每隔24h取样,将样品以4000r/min的速度离心15min,沉淀即为菌体,称量湿菌体的重量,并同时测定上清液对CMC、滤纸、微晶纤维素、棉花的活力及β-葡萄糖苷的酶活,连续测定5天,每...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:燕红杨谦
申请(专利权)人:哈尔滨工业大学
类型:发明
国别省市:93[中国|哈尔滨]

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