一种β-羟丁酸试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种β‑羟丁酸试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂包括：第一缓冲液50‑100mmol/L；黄递酶1‑5KU/L；β‑羟丁酸脱氢酶10‑20KU/L；TW‑80 2‑20mL/L；Brij‑35 5‑10g/L；甘露醇1‑100mmol/L；NaN

【技术实现步骤摘要】
一种β-羟丁酸试剂盒
本专利技术涉及D3H试剂盒
，更具体地说，是涉及一种β-羟丁酸试剂盒。
技术介绍
β-羟丁酸(β-HB)分子式为C4H8O3，分子量104.1。当人的体内葡萄糖含量不足或人体内代谢紊乱不能对葡萄糖进行有效的利用时，人体内会分解甘油三酯产生甘油和脂肪酸，而脂肪酸会在肝脏内氧化生成酮体，其酮体会包括2％的丙酮，23％的乙酰乙酸和75％的β-羟丁酸。因为酮体中主要成分为β-羟丁酸，所以检测β-羟丁酸是酮症酸中毒较明显的指标。β-羟丁酸的正常水平为0.3mmol/L以下，>1mmol/L为高酮血症患者，>3mmol/L则为酮症酸中毒。目前临床对β-羟丁酸的诊断主要有气相色谱法、毛细管电泳法、放射化学法、免疫比浊法及酶法等。气相色谱法操作复杂，时间较长；毛细管电泳法仪器昂贵，操作费时费力；放射化学法有辐射，副作用较大；免疫比浊法对抗体要求较高；而酶法相对来说，灵敏度较高，操作简单，成本较低等明显优点，其中酶法的发展由一步酶检测NADH发展到酶循环法检测INT生成物，灵敏度又进一步提高，而被人们普遍接受。现有技术中的D3H试剂盒检测普遍是由一步酶检测法变成了酶循环法的检测，普遍的D3H试剂盒的R1和R2组成成分为：R1试剂：Tris缓冲液(pH8.5)50-100mmol/L；黄递酶1-5KU/L；β-羟丁酸脱氢酶10-20KU/L；NaN31-2g/L；R2试剂：柠檬酸缓冲液(pH3.0)50-100mmol/L；NAD+1-10mmol/L；INT1-10mmol/L；NaN31-2g/L。但是，现有的酶循环法检测试剂为酶循环法，存在机型差异明显，反应速度慢，抗乳糜，肝素钠等效果不明显等问题。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种β-羟丁酸试剂盒，本专利技术提供的β-羟丁酸试剂盒反应速度快，抗干扰能力强且机型差异小。本专利技术提供了一种β-羟丁酸试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂包括：第一缓冲液50-100mmol/L；黄递酶1-5KU/L；β-羟丁酸脱氢酶10-20KU/L；TW-802-20mL/L；Brij-355-10g/L；甘露醇1-100mmol/L；NaN31-2g/L；牛血清0.2-10ml/L；所述R2试剂包括：第二缓冲液50-100mmol/L；NAD+1-10mmol/L；INT1-10mmol/L；NaN31-2g/L。优选的，所述R1试剂中所述第一缓冲液为Tris缓冲液。优选的，所述Tris缓冲液的pH值为8～9。优选的，所述R1试剂包括TW-805-10mL/L。优选的，所述R1试剂包括Brij-356g/L。优选的，所述R1试剂包括牛血清0.5-5ml/L。优选的，所述R2试剂中所述第二缓冲液为柠檬酸缓冲液。优选的，所述柠檬酸缓冲液的pH值为2～4。本专利技术提供了一种β-羟丁酸试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂包括：第一缓冲液50-100mmol/L；黄递酶1-5KU/L；β-羟丁酸脱氢酶10-20KU/L；TW-802-20mL/L；Brij-355-10g/L；甘露醇1-100mmol/L；NaN31-2g/L；牛血清0.2-10ml/L；所述R2试剂包括：第二缓冲液50-100mmol/L；NAD+1-10mmol/L；INT1-10mmol/L；NaN31-2g/L。与现有技术相比，本专利技术选用双合适表活来改善反应速度慢、抗干扰效果差的问题，并通过添加牛血清协同双表活的添加，共同作用下改善机型差异大的问题。实验结果表明，本专利技术提供的β-羟丁酸试剂盒中，R1试剂增加的TW-80表面活性剂和Brij-35表面活性剂，双表活的添加协同作用既提高了反应速度，又提高了抗干扰能力；并且，R1试剂中还添加了牛血清，和上述双表活实现协同作用，能明显改善机型差异，从而实现反应速度快，抗干扰能力强且机型差异小。附图说明图1为实施例1提供的D3H试剂盒的反应曲线图；图2为对比例1提供的D3H试剂盒的反应曲线图；图3为对比例2提供的D3H试剂盒的反应曲线图；图4为对比例3提供的D3H试剂盒的反应曲线图；图5为对比例4提供的D3H试剂盒的反应曲线图；图6为对比例5提供的D3H试剂盒的反应曲线图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供了一种β-羟丁酸试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂包括：第一缓冲液50-100mmol/L；黄递酶1-5KU/L；β-羟丁酸脱氢酶10-20KU/L；TW-802-20mL/L；Brij-355-10g/L；甘露醇1-100mmol/L；NaN31-2g/L；牛血清0.2-10ml/L；所述R2试剂包括：第二缓冲液50-100mmol/L；NAD+1-10mmol/L；INT1-10mmol/L；NaN31-2g/L。在本专利技术中，所述β-羟丁酸试剂盒包括R1试剂和R2试剂，优选由R1试剂和R2试剂组成。在本专利技术中，所述R1试剂包括：第一缓冲液50-100mmol/L；黄递酶1-5KU/L；β-羟丁酸脱氢酶10-20KU/L；TW-802-20mL/L；Brij-355-10g/L；甘露醇1-100mmol/L；NaN31-2g/L；牛血清0.2-10ml/L。在本专利技术中，所述R1试剂中所述第一缓冲液优选为Tris缓冲液。本专利技术对所述第一缓冲液的来源没有特殊限制，采用本领域技术人员熟知的市售商品即可。在本专利技术中，所述Tris缓冲液的pH值优选为8～9，更优选为8.5。本专利技术对所述黄递酶、β-羟丁酸脱氢酶、TW-80、Brij-35、甘露醇和NaN3的来源没有特殊限制，采用本领域技术人员熟知的市售商品即可。在本专利技术中，所述R1试剂包括TW-802-20mL/L，优选包括TW-805-10mL/L。在本专利技术中，所述R1试剂包括Brij-355-10g/L，优选包括Brij-356g/L。在本专利技术中，所述R1试剂包括牛血清0.2-10ml/L，优选包括牛血清0.5-5ml/L。在本专利技术中，所述R2试剂包括：第二缓冲液50-100mmol/L；NAD+1-10mmol/L；INT1-10mm本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种β-羟丁酸试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，其特征在于，所述R1试剂包括：/n第一缓冲液50-100mmol/L；/n黄递酶1-5KU/L；/nβ-羟丁酸脱氢酶10-20KU/L；/nTW-80 2-20mL/L；/nBrij-35 5-10g/L；/n甘露醇1-100mmol/L；/nNaN

【技术特征摘要】
1.一种β-羟丁酸试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，其特征在于，所述R1试剂包括：
第一缓冲液50-100mmol/L；
黄递酶1-5KU/L；
β-羟丁酸脱氢酶10-20KU/L；
TW-802-20mL/L；
Brij-355-10g/L；
甘露醇1-100mmol/L；
NaN31-2g/L；
牛血清0.2-10ml/L；
所述R2试剂包括：
第二缓冲液50-100mmol/L；
NAD+1-10mmol/L；
INT1-10mmol/L；
NaN31-2g/L。


2.根据权利要求1所述的β-羟丁酸试剂盒，其特征在于，所述R1试剂中所述第一缓冲液为Tris缓冲液。

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【专利技术属性】
技术研发人员：杨康，
申请(专利权)人：北京安图生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11