VIPERIN功能缺失的细胞系的构建方法及其应用技术

本发明专利技术公开了用于特异性靶向DF‑1细胞VIPERIN基因的sgRNA、用于CRISPR/Cas9编辑DF‑1细胞VIPERIN基因的质粒，以及VIPERIN功能缺失的细胞系的构建方法，成功构建得到了VIPERIN功能缺失的DF‑1细胞系，为VIPERIN的分子生物学功能研究、VIPERIN抗病毒机制研究、和/或抗病毒药方面研发提供了基础。

【技术实现步骤摘要】
VIPERIN功能缺失的细胞系的构建方法及其应用
本专利技术涉及VIPERIN功能缺失的细胞系的构建方法及其应用，更具体地，涉及利用CRISPR/Cas9技术构建VIPERIN功能缺失的DF-1细胞系的方法，构建得到的DF-1细胞系，以及该细胞系的应用。
技术介绍
VIPERIN是一种与内质网相关的干扰素(IFN)诱导型病毒抑制蛋白，该蛋白基因又称之为RSAD2(含自由基SAM结构域2)。据报道，VIPERIN可以通过IFN依赖性或非IFN依赖性途径来诱导。VIPERIN受干扰素调控，其蛋白的功能表现在对多种DNA和RNA病毒的抑制，包括CHIKV，HCMV，HCV，DENV，WNV，SINV，流感和HIV。VIPERIN最初在人巨细胞病毒(HCMV)感染的巨噬细胞中被鉴定为IFN-γ诱导的抗病毒蛋白，据报道，VIPERIN可以由成纤维细胞中的HCMV糖蛋白B诱导表达。VIPERIN通过下调病毒结构蛋白表达来抑制HCMV病毒复制。VIPERIN也可与HCMV病毒蛋白相互作用，并重新定位到HCMV病毒感染细胞的线粒体中，从而通过破坏细胞代本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于特异性靶向DF-1细胞VIPERIN基因的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA序列如SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示。/n

【技术特征摘要】
1.用于特异性靶向DF-1细胞VIPERIN基因的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。


2.用于CRISPR/Cas9编辑DF-1细胞VIPERIN基因的质粒，其特征在于，所述质粒含有sgRNA，所述如sgRNA的序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。


3.根据权利要求2所述的质粒，其特征在于，所述质粒由所述sgRNA和PX459载体连接得到。


4.一种VIPERIN功能缺失的细胞系的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)构建用于编辑VIPERIN基因的质粒；
2)将用于编辑VIPERIN基因的质粒转染至DF-1宿主细胞，得到转染细胞；
3)将转染细胞培养筛选得到VIPERIN功能缺失的细胞系；
其中，所述用于编辑VIPERIN基因的质粒中含有如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示的sgRNA。...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈瑞爱，黄梅，刘定祥，向程威，叶俊贤，董楠，杨小云，
申请(专利权)人：华农肇庆生物产业技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44