【技术实现步骤摘要】
植物瞬时表达载体的构建及应用
本专利技术涉及生物
领域,特别涉及植物瞬时表达载体的构建及应用。
技术介绍
植物表达系统与哺乳动物细胞表达系统、微生物发酵系统一样,是一个具有广阔应用前景的生物蛋白表达反应器。哺乳动物细胞表达系统具有产量高、体系成熟、与人类细胞相近等优势而被普遍推广,但运行价格相对昂贵;微生物发酵系统技术也相当完备,同时产量高、价格低廉,但由于细胞种类的差异,微生物发酵系统并不能很好地表达需要特定蛋白修饰的目的蛋白。植物表达系统具有先天的优势,比如植物的生物量限制少、生长快、成本低与哺乳动物表达系统,同时植物细胞能够对蛋白进行各种翻译后修饰,可以弥补微生物发酵系统及昆虫表达系统的不足,具有良好的生产前景,是商业应用是一个比较热门的研究方向。在植物内进行目标蛋白表达,一个有效的植物外源蛋白表达载体是至关重要的。当前阶段,国内植物外源蛋白表达载体主要的应用在处于基础科研领域,对于能够进行高效商业生产的应用载体的探索还很少。国际上植物重组蛋白表达企业Medicago和IconGenetic都根据基础研究 ...
【技术保护点】
1.植物瞬时表达载体,其特征在于,包括5’UTR区域、MCS区域和SEKDEL序列。/n
【技术特征摘要】
1.植物瞬时表达载体,其特征在于,包括5’UTR区域、MCS区域和SEKDEL序列。
2.如权利要求1所述的植物瞬时表达载体,其特征在于,所述5’UTR区域、MCS区域和SEKDEL序列的序列如SEQIDNo.1所示。
3.如权利要求1或2所述的植物瞬时表达载体,其特征在于,其以植物表达载体pEAQ为基本骨架。
4.如权利要求1至3任一项所述的植物瞬时表达载体,其特征在于,还包括目的基因,所述目的基因的N端增加PacI酶切位点,C端增加XhoI酶切位点。
5.如权利要求2至4任一项所述的植物瞬时表达载体,其特征在于,其构建方法中,采用如SEQIDNo.2所示的上游引物和如SEQIDNo.3所示的下游引物扩增如SEQIDNo.1所示的序列。
6.如权利要求5所述的植物瞬时表达载体,其特征在于,所述扩增的扩增体系包括22μlddH2O、25μlKODOneTMPCRMast...
【专利技术属性】
技术研发人员:周昕,郑蔚,翟璐,赵启超,濮云飞,
申请(专利权)人:浙江华缔药业集团医药开发有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江;33
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