畜禽疫病快速诊断试纸条制造技术

本发明专利技术涉及畜禽疫病诊断器具，特别涉及一种畜禽疫病快速诊断试纸条，含有支撑层，反应试剂载体吸附层，支撑层为不吸水薄片条，反应试剂载体吸附层粘贴在支撑层上，从样品端起依次为纤维层、吸附待测某种畜禽疫病相应的金标抗体Ｗｉ纤维层，纤维素膜层，手柄端为吸水材料层，用某种待测畜禽疫病标准抗原溶液Ｘｉ和用相应的某种畜禽疫病包被抗体溶液Ｙｉ分别在纤维素膜层上印制出阴性显示印迹“－”或“丨”，和阳性显示印迹“丨”或“－”。本试纸条特异性和敏感性好，操作简便，快速，大大降低劳动强度，缩短检测时间，显示判断检测结果形象、直观、准确，不会发生假阳性或假阴性误判，投资小，成本低，容易推广应用。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及畜禽疫病诊断器具，特别是涉及一种畜禽疫病快速诊断试纸条。众所周知，随着科学技术的不断发展和人民物质生活水平的不断提高，畜牧业的集约化经营、工厂化养殖蓬勃发展，大批的畜禽集中饲养，一旦传染病爆发和蔓延，将给养殖企业或公司造成巨大的危害和经济损失，轻者造成畜禽免疫力和生产性能(产蛋、产肉和产奶)下降及饲料报酬降低，重则大批畜禽死亡，造成养殖企业和公司的破产倒闭。我国每年因畜禽疫病造成的经济损失以百亿元计。对畜禽疫病的发生若不能及时确诊，采取控制和治疗措施，后果不堪设想，将严重影响畜牧业发展。当前由于有关畜禽疫病病原高度变异，血清型众多，使许多疫病呈现新的流行特点，其症状及病理变化逐渐趋向非典型化，给疫病临床诊断带来较大困难，根据临床症状及病理变化难以进行确诊。目前，国内外采用的畜禽疫病诊断技术主要有琼脂扩散试验(AGP)，对流免疫电泳，病毒血清中和试验(VN)，酶联免疫吸附试验(ELISA)，免疫荧光抗体技术(IF)，SPA协同凝集试验，聚合酶链反应(PCR)和核酸探针等等。上述这些方法和技术虽然可以定性诊断畜禽疫病，但试验操作时间长、复杂，且需有关特定仪器设备及技能，有的甚至需要较昂贵的设备，如荧光显微镜、酶标仪及PCR仪等，常限于实验室内进行，很难在基层普及和推广，无法及时迅速做到确诊，有效控制疫病发展。事实上，我国目前对畜禽疫病临床诊断仍旧以临床症状及病理变化为主，很少人采用上述方法进行诊断或确诊，因需要相当的经验和技能，有时还不能确诊。抗体水平监测则仅在一些大型养殖场(厂)开展，并且仅能监控有限几种疫病，如鸡新城疫、鸡传染性法氏囊病等。国内已研制成功旋毛虫病、鸡新城疫、鸡传染性法氏囊病等畜禽疫病ELISA快速诊断盒，用于检测上述有关疫病病原和其抗血清，其灵敏度分别比AGP高数十倍。这种诊断盒外包装一般为长方形纸盒，内装4-8条反应板，4种试剂及取样用的小塑料管。检测时需将待检样品用小塑料管加入反应板的各孔中，然后顺序以1、2、3、4号液进行反应，各反应程序需充分洗涤，显色反应需在2-3分钟内完成，并依显示颜色的深浅程度判定阴性或阳性结果，整个操作需10分钟。这种诊断盒对常规的ELISA检测规程作了一定的简化，具有相对简便，快速的特点，但尚未达到“一步法”的简便、快捷，且用颜色深浅判定阴、阳性结果，不够准确可靠，有时会出现假阴性和假阳性的错判结果。本专利技术的目的是研制出适用于各种畜禽疫病快速诊断的系列试纸条，简便快捷，准确诊断各种畜禽疫病，成本低，操作简单，容易在临床推广应用。本专利技术是这样实现的一种畜禽疫病快速诊断试纸条，含有支撑层，反应试剂载体吸附层，支撑层为不吸水薄片条，反应试剂载体吸附层粘贴在支撑层上，从样品端起依次为纤维层、吸附待测某种畜禽疫病相应的金标抗体(Wi)纤维层，纤维素膜层，手柄端为吸水材料层，用某种待测畜禽疫病标准抗原溶液(Xi)和用相应的某种畜禽疫病包被抗体溶液(Yi)分别在纤维素膜层上印制出阴性显示印迹“-”或“|”，和阳性显示印迹“|”或“-”。不吸水支撑层薄片条可用硬质塑胶片条，或不吸水硬纸片条、纤维层可用玻璃棉，吸水材料层可用吸水纸，纤维素膜层可用硝酸纤维素膜，金标抗体纤维层可用金标抗体(Wi)玻璃棉，在玻璃棉，金标抗体玻璃棉及吸水纸层上覆盖有保护膜，阴性显示印迹和阳性显示印迹其组合可为“+”、“‖”、“＝”、 “”、 印迹，选用“+”、“‖”这两种组合印迹较好，在玻璃棉和金标抗体(Wi)玻璃棉交界处对应的保护膜偏向玻璃棉一侧约0.5cm处印制出标记线。吸附有待测某种畜禽疫病金标抗体(Wi)玻璃棉，用某种畜禽疫病标准抗原(Xi)印制阴性显示印迹和用某种相应畜禽疫病包被抗体(Yi)印制的阳性显示印迹可为下列畜禽疫病中的一种口蹄疫(FMD)金标抗体玻璃棉，FMD标准抗原印迹和相应FMD包被抗体印迹，狂犬病金标抗体玻璃棉，狂犬病标准抗原印迹和相应的狂犬病包被抗体印迹，伪狂犬病金标抗体玻璃棉，伪狂犬病标准抗原印迹和相应伪狂犬病包被抗体印迹，猪瘟(SF)金标抗体玻璃棉，SF标准抗原印迹和相应SF包被抗体印迹，猪生殖和呼吸系统综合症(PRRS)金标抗体玻璃棉，PRRS标准抗原印迹和相应PRRS包被抗体印迹，马传染性贫血(EIA)金标抗体玻璃棉，EIA标准抗原印迹和相应EIA包被抗体印迹，牛病毒性腹泻—粘膜病(BVD-MD)金标抗体玻璃棉，BVD-MD标准抗原印迹和相应的BVD-MD包被抗体印迹，羊蓝舌病(BT)金标抗体玻璃棉，BT标准抗原印迹和相应的BT包被抗体印迹，鸡传染性法氏囊病(IBD)金标抗体玻璃棉，IBD标准抗原印迹和相应IBD包被抗体印迹，鸡新城疫病(ND)金标抗体玻璃棉，ND标准抗原印迹和相应ND包被抗体印迹，鸡马立克氏病(MD)金标抗体玻璃棉，MD标准抗原印迹和相应MD包被抗体印迹，鸡减蛋综合症(EDS)金标抗体玻璃棉，EDS标准抗原印迹和相应EDS包被抗体印迹，鸡传染性支气管炎(IB)金标抗体玻璃棉，IB标准抗原印迹和相应IB包被抗体印迹，鸡传染性喉气管炎(ILT)金标抗体玻璃棉，ILT标准抗原印迹和相应ILT包被抗体印迹，鸭病毒性肝炎(DVH)金标抗体棉，DVH标准抗原印迹和相应DVH包被抗体印迹，小鹅瘟(GP)金标抗体玻璃棉，GP标准抗原印迹和相应GP包被抗体印迹，禽流感(AI)金标抗体玻璃棉，AI标准抗原印迹和相应AI包被抗体印迹，炭疽金标抗体玻璃棉，炭疽标准抗原印迹和相应炭疽包被抗体印迹，大肠杆菌病金标抗体玻璃棉，大肠杆菌病标准抗原印迹和相应的大肠杆菌病包被抗体印迹，沙门氏菌病金标抗体玻璃棉，沙门氏菌病标准抗原印迹和沙门氏菌病包被抗体印迹，巴氏杆菌病金标抗体玻璃棉，巴氏杆菌病标准抗原印迹和相应巴氏杆菌病包被抗体印迹，布氏杆菌病金标抗玻璃棉，布氏杆菌病标准抗原印迹和相应布氏杆菌包被抗体印迹。本专利技术的积极效果1、畜禽疫病快速诊断试纸条具有下列各项优点(1)特异性和敏感性好。快速诊断试纸条是以胶体金标记高亲和力的单克隆抗体为基础制备出来的，金标抗体中金颗粒与抗体分子之间无共价键形成，二者通过异性电荷的范德华力相结合，胶体金标记对单克隆抗体的特异性和亲和力影响很小，且具有较高的标记率。因此，快速诊断试纸条具有较高的特异性和敏感性。(2)操作简便、快速。使用快速诊断试纸条无需其它任何试剂，只要将试纸条样品端插入待检样品5秒左右，在2分钟内即可检测出结果。(3)显示判断结果形象、直观、准确。快速诊断试纸条以显“-”、“+”或“ |”、“‖”分别表示疫病阴性及阳性结果，这样显示与人们平常思维判断习惯相同，形象、逼真、直观、简单明了，准确，不会出现假阴性和假阳性错判。(4)成本低，投资少。使用快速诊断试纸条，不需另配仪器设备，节约大量投资，成本低，操作极为简单，不需培训，人人都可操作使用。(5)容易推广应用。易于在疫病发生地现场检测。快速诊断试纸条，广泛适用于农村畜禽养殖个体户，大、中、小型养殖厂(或公司)，兽医站、防疫站及专业化化验室等各层次的需求，具有广阔的市场前景和较大经济、社会效益。附图说明图1畜禽疫病快速诊断试纸条结构示意图(侧视结构)图2畜禽疫病快速诊断试纸条俯视结构示意图之一；图3畜禽疫病快速诊断试纸条俯视结构示意图之二。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种畜禽疫病快速诊断试纸条，含有支撑层，反应试剂载体吸附层，本专利技术的特征是：支撑层为不吸水薄片条，反应试剂载体吸附层粘贴在支撑层上，从样品端起依次为纤维层，吸附待测某种畜禽疫病相应的金标抗体（Ｗｉ）纤维层，纤维素膜层，手柄端为吸水材料层，用某种待测畜禽疫病标准抗原溶液（Ｘｉ）和用相应的某种畜禽疫病包被抗体溶液（Ｙｉ）分别在纤维素膜层上印制出阴性显示印迹“－”或“丨”，和阳性显示印迹“丨”或“－”。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张改平，郭军庆，杨艳艳，王爱萍，闫玉河，李学伍，邓瑞广，李青梅，李灵霞，闫红良，
申请(专利权)人：河南省农业科学院生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]