一种多肽--钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－钠／葡萄糖协同转运蛋白家族－７２．０５，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于诊治多种疾病的方法，如心律失常、肾功能衰竭、代谢性白内障、周围神经病、感染等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其诊治作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的钠／葡萄糖协同转运蛋白家族－７２．０５的多核苷酸的用途。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种多肽——钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。葡萄糖在哺乳动物细胞中的跨膜运输扩散是由一个在结构上相关的葡萄糖转运蛋白家族蛋白调控的。该家族蛋白在生物体内催化将葡萄糖从UDP-葡萄糖转运至各种细胞外基质中的糖蛋白，以完成对这些蛋白的修饰，并使之形成特定的空间构型，以发挥其生理学功能。它们有不同的组织分布，生化特征以及调节机制，它们在不同的生理条件下由不同的家族蛋白控制不同的葡萄糖的吸收。例如，红血球/GLUT1，肝脏/GLUT2，大脑/GLUT3，肌肉-脂肪/GLUT4。其中，红血球/GLUT1和大脑/GLUT3在许多人类组织中的不同表达水平表明它们是葡萄糖吸收的主力军。生物学家随后又发现了葡萄糖转运蛋白家族的一个新成员，GLUT5。该蛋白发现于人的小肠和胎儿的骨骼肌，与人葡萄糖转运蛋白家族中其他成员有40％的相同性，是一个细胞松弛素敏感型葡萄糖转运蛋白。小肠是食物中葡萄糖吸收场所，钠离子/葡萄糖共转运蛋白以及促葡萄糖转运蛋白共同调节这一重要营养的吸收和转膜运输。钠离子/葡萄糖共转运蛋白位于小肠吸收表皮细胞的腔/纹缘表面，负责驱动钠离子同时吸收食物葡萄糖从它的集聚成分脱离。在纹缘细胞膜上除此以外还有第二个葡萄糖吸收系统，即纹缘细胞膜转运系统2，而GLUT5蛋白就负责该系统的正常运作。与葡萄糖转运蛋白家族其他成员一样，GLUT5也具有该家族蛋白特有的结构特征。各种糖蛋白葡萄糖基转运蛋白的序列中含有许多相似的序列片段，其中一些是高度保守的、不变的区域，如有三个疏水性区域、(K/R)X(I/L)(Y/F)XDAD及DQDXXN，这些序列片段在该酶家族的成员中均是高度保守的，在蛋白活性构型的形成过程及作用过程中均起着重要的作用。这些位点的突变将直接导致蛋白的表达异常及其相关的蛋白修饰及合成过程的异常，从而引发各种相关的疾病。分泌糖蛋白在生物体内有着各种重要的作用，其通常调节着生物体内各种蛋白及物质的转运，其表达异常通常与一些相关的物质代谢紊乱性疾病、蛋白代谢紊乱性疾病及相关组织的肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。分泌糖蛋白的多肽合成由以下两个修饰步骤组成蛋白多聚肽链的折叠与聚集及低聚糖N端修饰与空间构型的组成。其中，蛋白多聚肽链的折叠与聚集由糖蛋白葡萄糖基转运蛋白催化来完成，在这些蛋白的催化作用下，形成了具有正常空间构型的分泌糖蛋白，为糖蛋白发挥正常的生物学功能提供了前提条件。本专利技术的人的多肽与钠/葡萄糖协同转运蛋白家族在氨基酸水平上分别有90％的相同性和96％的相似性，且亦含有钠/葡萄糖协同转运蛋白家族其它成员所共有的各种特征性序列片段，两者均为钠/葡萄糖协同转运蛋白家族的成员，同时推测其具有相似的生物学功能。由于如上所述钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少91％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中251-2218位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-2346位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于钠/葡萄糖协同转运蛋白家族-72.05表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－钠／葡萄糖协同转运蛋白家族－７２．０５，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]