用于抗朊病毒活性的体外模型制造技术

已经发现一种蛋白质性质的材料对由朊病毒引起的疾病如ＣＪＤ显示出类似的活性及治疗反应。与该蛋白质性质的材料相结合的朊病毒模型具有多种用途。该模型在体内或体外均能够进行培养，对用于治疗动物体或人体的潜在药物、或对食物制品的处理方法或对可能与朊病毒接触的物品，如医学或牙科设备的快速筛查提供了可能性。利用该模型已经开发出多种治疗方法及材料。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及感染性疾病的领域。本专利技术找到了一种用于评价朊病毒(蛋白质性质的传染因子)对于多种治疗的反应的特殊应用，并将参照相关文献进行详细描述。而且，本专利技术也同样可应用于有关朊病毒活性的其它研究。
技术介绍
术语“朊病毒(prion)”用于描述能导致人类和/或动物产生类似的脑部疾病的蛋白质性质的传染因子，这些疾病常常是致命性的。这些疾病通常指传染性海绵状脑病(TSEs)。TSEs包括人类克雅病(CJD)、以及变异性CJD(vCJD)、牛海绵状脑病(BSE)(还被称为“疯牛病”)、羊的瘙痒病、和麋鹿的消耗性疾病。这类疾病都侵袭易感染上述特定疾病的一个动物或多个动物的神经组织。它们的特征是在较长的潜伏期后出现短期的神经系统症状，包括痴呆和共济失调，最终导致死亡。这些疾病的传染因子被认为是一种没有相应核酸的简单蛋白质。这些朊病毒疾病的病理机制则被认为包括一种初始正常的宿主编码蛋白。该种蛋白经过构象改变成为异常蛋白(朊病毒)，后者具有自身增殖能力。引起这种改变的具体原因至今未知。这种异常形式的蛋白不能在体内被有效清除，它在特定组织(特别是神经组织)内的蓄积最终导致组织损伤，例如细胞死亡。一旦发生明显的神经组织损伤，就会出现临床症状。朊病毒疾病可以归类为蛋白质凝聚疾病，其还包括其它几种致命性疾病，如阿尔茨海默病和淀粉样变性。就CJD而言，人类发病最高的朊病毒疾病(发病率大约为1∶1,000,000)，大约85％被认为是散发病例，大约10％被认为与遗传有关，而大约5％为医源性的。其还包括其它几种致命性疾病，如Alzheimer病和淀粉样变性。目前尚无针对人类或动物的朊病毒疾病的有效药物，神经症状产生之后就会导致死亡。由于不能进行体外实验，对该类治疗药物的鉴别进展缓慢。迄今为止，还没有建立一种在实验室中培养朊病毒的方法。体内研究包括给实验动物接种朊病毒并观察该动物对预期治疗方案的反应。因为病程进展缓慢，这些体内实验不可避免地会比较冗长，因而不适合对大量潜在药物进行筛查工作。小鼠和大鼠的体内模型已被处理得对朊病毒更为敏感，并且通常用于评价。另外，因为这类疾病倾向于动物特异性，这些用在动物身上的试验可否简单地应用于人类尚不可知。某些研究机构建议利用酵母朊病毒模型进行药物评价，并且已有一些采用体外模型来研究朊病毒的报导。然而，还没有确定这些预选模型的行为表现和朊病毒活性之间的相关性的研究。在20世纪80年代初期，从人类肠道分离出新型可复制因子。(Burdon，J.Med.Micro.，29145-157(1989)及Burdon；The Lancet，Vol.353；April 10(1999))。这种因子从两位患有克罗恩病的患者的回肠造口术的流体中分离而得(用0.2μ过滤器过滤)，可进行体外培养。这种因子被命名为回肠液依赖生物(IFDO)，尽管之后发现这种因子还可以在其它培养介质中存活(例如在胰酶存在的条件下)。在特异性的选择培养基上可见不连续的棕色菌落。对这种因子的检测发现，它实际上并非是病毒性的、细菌性的、或真菌类，但是可呈对数扩增并且对多种抗生素和物理及化学条件具有高抵抗力。该种因子还被发现对湿热具有强抵抗力。最初并未将这种因子与朊病毒联系起来，也未将其用于朊病毒研究。尽管朊病毒疾病尚未被认为具有强传染性，它们仍可在物种内进行传染，并且在一定条件下还可以发生物种间的传染。近来发现朊病毒疾病可通过高危组织(包括脑、脊髓、和眼睛)进行传染。医源性传播也有报导，包括通过硬脑膜移植、角膜移植、同种心包移植、人促性腺激素、和人生长激素的污染。还有经医用装置造成传染的报导，包括通过神经外科手术设备、深部电极、以及其它靠近中枢神经系统的外科手术装置的重复使用。目前对于采用传统的去污和消毒方法破坏朊病毒的有效性有很多疑虑。众所周知，朊病毒是非常顽固的并且对常规去污和消毒方法具有抵抗力。某些预选的方法包括焚烧、延长高压灭菌时间、高浓度氢氧化钠和次氯酸钠处理(例如，1M NaOH或NaHClO3，置于含2％氯离子的溶液中1小时)。这些破坏性的处理方法通常不适用于医学设备，尤其是柔性内窥镜和其它带有塑料、黄铜、或铝制部件的设备。许多设备可被高温损害。化学处理，如强碱，一般会对医用装置材料或表面造成损伤。戊二醛、甲醛、环氧乙烷、液体过氧化氢、大多数酚类、醇类，以及诸如干热、煮沸、冷冻、紫外线、电离、以及微波辐射等方法已通常被报道为是无效的。因而，显然需要制品和方法，其能有效地对抗朊病毒又与表面相容。已发现的能对抗朊病毒的侵害性较小的处理方法是由俄亥俄州门托市的STERIS公司合成的商品名为STERIS 20TM的过乙酸配方。这种配方为含有过氧乙酸的混合物，其中含有缓冲剂、防腐剂、表面活性剂、和螯合剂，制备成稀释液用于高于室温条件下的消毒程序中。然而，目前没有现成的方法用于评价抗朊病毒(“priocidal”)治疗。在采用预选的抗病毒处理之后，对用朊病毒处理过的设备进行培养的方法包括用清洗该设备洗液接种动物并且观察病情进展状况，以判断该种抗朊病毒方法是否有效。这是一个冗长的过程而且易产生误差，这是因为残留在设备上的朊病毒数量可能太少了。另外，有一种危险因素，那些没有被抗朊病毒治疗破坏掉的朊病毒有可能对工作人员造成危害。因此，在那些专职照料确诊的朊病毒疾病患者的医务工作者中，这种担忧日益增加。另外还有这样的担忧，由于在感染患者死亡之前未能检测出疾病的状态，通过仪器设备等物品的重复利用而可能导致疾病的传播。另外，有关高、中、低危险组织的危险度尚未明确。例如，扁桃体切除术和牙科操作曾被认为是感染朊病毒的低危操作。然而，近期证据提示其危险性可能要更高，因为已经发现有脑外组织感染朊病毒。而且还提示在朊病毒相关疾病和类似疾病状态(例如帕金森病和阿尔茨海默病)之间可能存在某种关联。本专利技术提供了一种新型和改善方法，用于评价抗朊病毒活性，其克服了包括上述涉及问题在内的许多问题。
技术实现思路
根据本专利技术涉及的一个方面是提供了一种方法，用于评价可能的对抗朊病毒或朊病毒相关疾病的治疗的效能。这种方法包括为治疗提供朊病毒模型，该模型在对抗朊病毒的治疗方法下可表现出与朊病毒相类似的反应，评价治疗作用于该模型的效果，以此作为该模型对抗朊病毒或朊病毒相关疾病的效果的指示器(indicator)。根据本专利技术涉及的另一方面是，提供了一种对被朊病毒污染的物品的处理方法。该方法包括用包括乳酸链球菌肽、锰、和硝酸银中的至少一种的组合物处理该物品，来减少该物品上残留的朊病毒的数量。根据本专利技术涉及的另一方面是，提供了这样一种方法，用来筛选那些对抗朊病毒相关疾病的预选药物、治疗过程、或抗朊病毒化学制剂的效能。该方法包括用预选的药物、化学制剂或治疗过程来处理朊病毒模型，并在体外对所有残留的朊病毒模型进行培养，该朊病毒模型对这种药物、化学制剂或治疗过程显示出与朊病毒相类似的反应。根据本专利技术涉及的另一方面是，提供了一种治疗被朊病毒感染或患有朊病毒相关疾病的受治疗者(subject)的方法。该方法包括用预选的药物来治疗被IFDO污染的样本，该种IFDO对其它治疗药物的反应与朊病毒相似。如果该治疗药物对抗这种IFDO有效，就用有效剂量的该种药物来治疗该受治疗者。本专利技术的一个优点是可本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于评价具潜在抗朊病毒或朊病毒相关疾病治疗的方法，其特点在于：将朊病毒模型进行所述治疗，所述朊病毒模型对破坏朊病毒的治疗能表现出与所述朊病毒类似的反应；以及评价所述治疗对所述朊病毒模型的治疗效果，以此作为所述治疗对所述朊病毒或所述朊病毒相关疾病的治疗效果的指示器。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：凯瑟琳M安特洛加，杰拉尔德E麦克唐奈，
申请(专利权)人：斯特里斯公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]