前列腺素E受体2基因与原发性高血压的相关性制造技术

本发明专利技术公开了一种检测原发性高血压易感性的方法，它包括检测个体的前列腺素Ｅ受体２基因ＰＴＧＥＲ２、转录本和／或蛋白与正常相比是否存在变异，存在变异就表明该个体患原发性高血压的可能性大于正常人群。本发明专利技术还公开了相应的检测试剂盒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学和医学领域。更具体地涉及前列腺素E受体2基因(Prostaglandin E Receptor 2，PTGER2)的单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphism，SNP)及其与原发性高血压的相关性。本专利技术还涉及检测这些SNP的方法和试剂盒。
技术介绍
高血压是指收缩压或舒张压升高的一组临床症侯群。血压的升高与冠心病、肾功能障碍、高血压心脏病及高血压并发脑卒中的发生存在明显的因果关系。高血压最新的诊断标准是收缩压≥19kpa(140mmHg)或舒张压≥12kpa(90mmHg)，符合其中一项者可确诊为高血压。大多数的高血压患者在血压升高早期仅有轻微的自觉症状，如头痛、头晕、失眠、耳鸣、烦燥、工作和学习精力不易集中并容易出现疲劳等。随着病情的发展，特别是出现并发症时，症状逐渐增多并明显，如手指麻木和僵硬、多走路时出现下肢疼痛，或出现颈背部肌肉酸痛紧张感。当出现心慌、气促、胸闷、心前区疼痛时表明心脏已受累，出现夜间尿频、多尿、尿液清淡时表明肾脏受累、肾小动脉发生硬化。如果高血压患者突然出现神志不清、呼吸深沉不规则、大小便失禁等提示可能发生脑出血，如果是逐渐出现一侧肢体活动不便、麻木甚至麻痹，应当怀疑是否有脑血栓的形成。高血压早期无明显异常体征出现。当脑、心、肾等重要器官出现轻度损害时可有异常的体征出现。常见的心脏异常表现有心尖搏动左移、心前区有抬举样搏动感，听诊心尖区第一心音增强、主动脉瓣区第二心音增强且有收缩期杂音和舒张期杂音，表明已发生动脉硬化和左心室肥厚，如果在心尖区听及奔马样心律可能表明有心力衰竭的出现。另外还常见耳垂出现折痕、毛细血管搏动、桡动脉出现硬脉或无脉及下肢间歇性跛行等。此外，由于某些诱发因素或高血压本身的发展，可导致一些高血压患者血压显著或急骤升高，同时伴有脑、心、肾、视网膜等重要器官功能损害，严重危及生命，出现一系列临床特殊征象，称为高血压急症。高血压急症的发病率占高血压人群的5％，常见有高血压脑病、脑出血、急性左心衰竭、可乐宁急性停药综合征、急性心肌梗塞、急进型恶性高血压等。高血压患者中约5％左右无自觉症状，也不知道血压何时升高，更不知道什么时候已产生了血管和器官损害的并发症，有些患者甚至在发生了心血管意外之后才知道自己患有高血压。所以，找出高血压发病的遗传原因，及早的进行预防以及检测，可以有效控制高血压的发病，将疾病对人体的伤害减到最小。原发性高血压(essential hypertension，EH)也叫高血压病，是一种独立的疾病，有着自己的病因、发生发展转归的规律和临床表现。临床上主要表现为动脉血压的升高。占人群高血压患者的90％以上，目前发病机理尚未完全明了，主要依据排除了其他疾病导致的高血压后才能诊断为原发性高血压(高血压病)。动脉血压的升高主要是因外周小动脉阻力增高所致，同时有不同程度的血容量和心输出量的增加。晚期常导致心、脑、肾等脏器受累发生高血压心脏病、心力衰竭、肾功能障碍、脑出血等严重并发症。原发性高血压的治疗主要是降低血压同时防止并发症的发生。原发性高血压患者致死原因为脑血管意外、心血管意外和肾功能不全，我国以脑血管意外为多见，心力衰竭和尿毒症次之，而欧美国家以心力衰竭多见，脑血管意外和尿毒症次之。原发性高血压作为最常见的心血管疾病，其发病率逐年上升，并可引起严重的心、脑、肾并发症，是脑卒中和冠心病的主要危险因素。EH是一种由遗传因素和环境因素相互作用而发病的多基因病，寻找EH相关基因进而阐明高血压发病的遗传机制已经成为目前研究的热点。虽然已有许多关于各种基因多态性与原发性高血压的研究，但没有证实PTGER2基因与原发性高血压相关性的报道，更没有证实PTGER2基因的SNP与原发性高血压相关性的报道。综上所述，为了最终实现治疗高血压，本领域迫切需要寻找原发性高血压易感基因，并开发检测原发性高血压的方法、试剂盒，以及相关的治疗药物。
技术实现思路
本专利技术的目的就是提供一种诊断(尤其是早期诊断)高血压的方法及检测试剂盒。本专利技术的另一目的是提供一种新的治疗高血压的方法。本专利技术的再一目的是提供一种治疗高血压的药物组合物。在本专利技术的第一方面，提供了一种对个体的高血压易感性进行诊断的方法，它包括步骤检测该个体的PTGER2基因、转录本和/或蛋白，并与正常的PTGER2基因、转录本和/或蛋白相比较，存在差异就表明该个体患高血压的可能性高于正常人群。在另一优选例中，所述的方法中检测的是PTGER2的基因或转录本，并与正常PTGER2核苷酸序列比较差异。在另一优选例中，所述的差异是以下的单核苷酸多态性2461位A→G；其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO1。在本专利技术的第二方面，提供了一种检测样品是否存在前列腺素E受体2基因PTGER2的单核苷酸多态性的方法，包括步骤(a)用PTGER2基因特异性引物扩增样品的PTGER2基因，得到扩增产物；和(b)检测扩增产物中是否存在以下单核苷酸多态性2461位A→G；其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO1。在另一优选例中，所述的基因特异性引物具有SEQ ID NO2和3的序列。在另一优选例中，所述的扩增产物的长度为100-3000bp，且含有SEQID NO1中第2461位。在本专利技术的第三方面，提供了一种检测高血压的试剂盒，它包括特异性扩增PTGER2基因或转录本的引物，更佳地，所述的引物扩增出长度为100-3000bp，且含有SEQ ID NO1中第2461位的扩增产物。在另一优选例中，所述试剂盒还含有选自下组的试剂 (a)与SEQ ID NO1中第2461位的突变结合的探针；(b)识别SEQ ID NO1中第2461位的突变限制性内切酶。在另一优选例中，所述的突变选自以下单核苷酸多态性2461位A→G；其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO1。在本专利技术的第四方面，提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的PTGER2蛋白以及药学上可接受的载体。具体实施例方式本专利技术人经过深入而广泛的研究，对大量候选基因的SNP进行了测定和分析。首次发现和证明了PTGER2基因与高血压密切相关，而且发现了它的新功能PTGER2的改变将导致高血压，其中关联研究结果显示，在PTGER2第2461位的SNP(2461位A→G)在病例和对照组中的分布存在显著性差异(P＜0.05)，因此可作为检测高血压的特异性SNP。在此基础上完成了本专利技术。PTGER2基因前列腺素E受体2基因(Prostaglandin E Receptor 2，PTGER2)的详细序列可参见登录号为AF134201的核苷酸序列(可参见网址http//www.ncbi.nlm.nih.gov/)，如SEQ ID NO1所示。前列腺素是存在于动物和人体中的一类不饱和脂肪酸组成的具有多种生理作用的活性物质。最早发现存在于人的精液中，当时以为这一物质是由前列腺释放的，因而定名为前列腺素。现已证明精液中的前列腺素主要来自精囊，除之全身许多组织细胞都能产生前列腺素。前列腺素的化学本质是由一个五元环和两条侧链构成的20碳不饱和脂肪酸。按其结构，前列腺素分为A、B、C、D、E、F、G、H、I等类型。前列腺素的半衰期极短(1～2分钟)，除本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种体外检测样品是否存在前列腺素Ｅ受体２基因ＰＴＧＥＲ２的单核苷酸多态性的方法，其特征在于，包括步骤：（ａ）用ＰＴＧＥＲ２基因特异性引物扩增样品的ＰＴＧＥＲ２基因，得到扩增产物；和（ｂ）检测扩增产物中是否存在以下单核苷酸多态 性：２４６１位Ａ→Ｇ；其中，核苷酸位置编号基于ＳＥＱＩＤＮＯ：１。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：金力，黄薇，姜正文，王颖，张晨辉，李艳平，王志敏，肖君华，卢大儒，
申请(专利权)人：复旦大学，上海人类基因组研究中心，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]