早产的检测制造技术

本发明专利技术描述一种在哺乳动物中用于诊断早产的方法，其包括测量受试者中内源大麻素，诸如花生四烯酸乙醇酰胺的水平。升高的水平为早产的征兆。所述测量典型地在妊娠晚期，诸如人类的第三个三个月进行。在特定的实施方案中，内源大麻素水平可以间接测定，例如通过测量脂肪酸酰胺水解酶（ＦＡＡＨ）水平来测定。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于在妊娠哺乳动物中检测早产(preterm labour)的方法。特别地，但不是排他性地，本专利技术涉及用于人类的这样一种方法。本专利技术的各方面涉及用于这样的方法的材料和制剂。
技术介绍
早产是新生儿中发病和死亡的重要原因。由于迅速的干预可能是有益的，所以早产的精确确定和检测对减少死亡率是关键的。精确确定还有助于确定是否有必要使母亲就医，以允许所述需要的干预。此外，早产的不准确确定能导致不必要的住院治疗，这将引起母亲的压力和不适，以及使用稀有的卫生保健资源。目前早产诊断中所用的标记包括唾液雌三醇，胎儿纤连蛋白，和胰岛素样生长因子蛋白1。唾液雌三醇检测通过ELISA(酶联免疫吸附测定)方式检测到样品中雌三醇的升高水平，据信其为早产的预示。胎儿纤连蛋白通常从子宫颈采样检测到，并且认为这种蛋白的不存在为妊娠继续的指示。然而这些方法被认为是不可靠的，并且是不令人满意的。例如，美国产科医师和妇科医师学院(American College of Obstetricians andGynecologists)并不推荐唾液雌三醇检测作为用于早产的筛选工具，原因在于其产生高百分率的假阳性结果，并且可能潜在地给产前保健增加显著的成本和不必要的干预。类似地，由于尽管认为阴性结果对于确定分娩没有开始是可靠的，但是阳性结果较不可靠，所以不推荐胎儿纤连蛋白检测用于常规筛选。因此，用于诊断早产的其它方法是期望的。专利技术概述本专利技术依赖于识别早产的新标记。按照本专利技术的第一方面，提供在哺乳动物中用于诊断早产的方法，其包括检测受试哺乳动物中内源大麻素(endocannabinoid)的水平，并且将检测到的水平与参考水平相比较，认为受试哺乳动物中上升的水平为早产的征兆。所述哺乳动物可以为灵长类，并且优选地为人类。所述检测到的水平优选地在妊娠过半时检测。更加优选地，所述水平在妊娠晚期期间，并且便利地在或者临近产期时进行检测。人的妊娠晚期可以指第三个三个月或者更晚，优选地在第三个三个月阶段后(大于35周)；更加优选地产期是指大于等于37周。优选地，所述内源大麻素为花生四烯酸乙醇酰胺(也已知为廿碳四烯酰乙醇酰胺(arachidonylethanolamide)或AEA)。在本专利技术的备选实施方案中，所述内源大麻素可以为2-花生四烯酰甘油，或棕榈酰乙醇酰胺。所述参考水平可以基于同一受试哺乳动物在妊娠早期检测到的水平，但是优选地基于该种类哺乳动物的典型非产期妊娠水平。所述典型水平可以基于产期中期的水平；例如，当所述方法用于人时，参考水平可以基于第二个或者第三个三个月的水平。所述方法还可以包括从受试哺乳动物采集用于检测的样品的步骤。所述样品可以取自血液，血浆，唾液，痰液，子宫颈或阴道涂片或拭子。所述检测可以在体内进行，或者优选地在体外进行。内源大麻素水平的检测可以以任何适当的方式进行；例如，通过HPLC，抗体，受体，结合分子等方式。在特定实施方案中，检测可以包括应用结合内源大麻素的抗体；这些抗体可以用允许检测的荧光或者放射性标记进行标记，或者它们本身可以随后用标记的二级抗体或酶检测。备选地，所述抗体可以用于将内源大麻素从溶液中沉淀出来。抗体可以在溶液中，或者黏附于固体支持物上。可以应用受体或者结合分子来检测内源大麻素；例如，已知受体CB1和CB2与AEA结合，并且可以用于检测AEA。在本专利技术的特定实施方案中，可以间接检测内源大麻素水平。例如，据信酶脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)降解AEA，并且下降的FAAH水平与升高的AEA水平相关。因此，可以认为FAAH水平的检测为AEA水平的指示。按照本专利技术的另一方面，提供在哺乳动物中用于诊断早产的方法，其包括检测受试哺乳动物中酶脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)的水平，并且将检测到的水平与参考水平相比较，认为受试哺乳动物中下降的水平是早产的征兆。所检测的水平优选地在妊娠过半时检测。更加优选地，所述水平在妊娠晚期期间，并且便利地在或者接近产期时进行检测。人类妊娠晚期可以指第三个三个月或者更晚，优选地在第三个三个月阶段后(大于35周)；更加优选地产期是指大于等于37周。本专利技术的各方面还提供内源大麻素在哺乳动物中用于诊断早产的方法中的应用，所述方法包括检测受试哺乳动物中内源大麻素的水平，并且将检测到的水平与参考水平相比较，认为受试哺乳动物中上升的水平为早产的征兆。本专利技术还涉及内源大麻素在诊断方法中的应用。本专利技术还提供FAAH在哺乳动物中用于诊断早产的方法中的应用，所述方法包括检测受试哺乳动物中FAAH的水平，并且将检测到的水平与参考水平相比较，认为受试哺乳动物中下降的水平为早产的征兆。本专利技术还提供用于诊断哺乳动物的早产的试剂盒，所述试剂盒包括用于检测样品中内源大麻素水平的试剂。所述试剂盒还包括关于使用所述试剂的使用说明。所述试剂可以包括针对内源大麻素的抗体，或者可以包括内源大麻素的受体或其它结合分子。可以将所述抗体或者结合分子标记，例如用荧光或放射性标记；备选地，所述试剂盒可以包括用于检测结合的抗体或者结合分子的其它试剂。所述试剂盒还包括从受试哺乳动物采集样品的工具；例如，拭子，注射器等。本专利技术还提供治疗哺乳动物早产的方法，所述方法包括降低经历早产的受试哺乳动物中的内源大麻素水平。所述内源大麻素优选为AEA。所述内源大麻素水平可以通过施用针对AEA的抗体或者其它结合分子而降低；或者可以通过施用降解内源大麻素的酶，诸如FAAH而降低。备选地，所述内源大麻素可以为2-花生四烯酰甘油或棕榈酰乙醇酰胺。本专利技术还提供内源大麻素在制备用于治疗哺乳动物早产的药物中的应用；和FAAH在制备用于治疗哺乳动物早产的药物中的应用。本专利技术还提供在受试哺乳动物中诱导分娩的方法，所述方法包括在受试哺乳动物中将内源大麻素的有效水平(effective level)升高。所述内源大麻素优选为AEA。所述方法可以包括施用AEA本身的步骤，或者可以包括施用其类似物。备选地，可以降低FAAH水平，或者可以施用AEA的竞争剂以结合FAAH，由此降低其有效水平。备选地，所述内源大麻素为2-花生四烯酰甘油或棕榈酰乙醇酰胺。附图简述现在将仅通过实例和参考附图的方式，描述本专利技术的这些和其它方面，所述附图显示附图说明图1.在绝经后妇女，处于月经周期，妊娠，和产期的未分娩和分娩期间的妇女中的血浆AEA水平。图2.取样时血浆花生四烯酸乙醇酰胺(AEA)水平和收缩持续时间之间的关系。图3.血浆花生四烯酸乙醇酰胺(AEA)水平和从取样到分娩的间隔之间的关系。图4.取样时血浆花生四烯酸乙醇酰胺(AEA)水平和子宫颈扩张之间的关系。附图详述引言内在大麻素，内源大麻素，是作为大麻素受体的配体的不饱和脂肪酸衍生物1。廿碳四烯酰乙醇酰胺或花生四烯酸乙醇酰胺(AEA)，是从脑组织中分离的首个内源大麻素2。应答去极化剂，激素和神经递质，它从细胞膜磷脂前体酶促释放3，4。认为AEA水平受下列因素控制其通过花生四烯酸乙醇酰胺转运蛋白的细胞吸收5，6，和其通过膜结合的脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)7-10以及其它酶11-13的随后酶促降解作用。AEA通过与血浆膜大麻素受体的相互作用发挥作用。已经报道了两种亚型的大麻素受体，CB1和CB214-17，其属于G蛋白偶联受体超家族18。它们本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于诊断哺乳动物早产的方法，其包括检测受试哺乳动物中内源大麻素的水平，并且将检测到的水平与参考水平相比较，认为在所述受试哺乳动物中上升的水平为早产的征兆。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：J科涅，
申请(专利权)人：莱斯特大学，
类型：发明
国别省市：GB[英国]